UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE YUCATÁN

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

CULTIVO DE TEJIDOS

TAREA.

“Actividad 4. Proteínas recombinantes”

JOSE ANDRES COCOM BASTO

FECHA DE ENTREGA: 13-09-2018

José Andrés Cocom Basto
Ingeniería en Biotecnología
Cultivo de Tejidos

Actividad 4. Proteínas recombinantes.

Ilustración 1. Diagrama para la elaboración de una proteína recombinante, más específicamente para células de
mamífero.

DESCRIPCIÓN DE CADA ETAPA DEL PROCESO

Identificación del gen: en esta etapa se lleva a cabo la identificación del gen que codifica la proteína
de interés.
Generación de ADNc: esta etapa implica la generación del ADNc a partir del ARNm respectivo.

Diseño de vectores de expresión: la finalidad de esta etapa es aumentar la productividad del cultivo
celular mediante la actividad transcripcional a través de vectores de expresión modulando la
coexpresión del producto y los genes marcadores de selección, la rigurosidad del marcador de
selección y los elementos reguladores de ADN transportados en el vector.
José Andrés Cocom Basto
Ingeniería en Biotecnología
Cultivo de Tejidos

Selección de la cepa productora: en esta etapa pueden emplearse estrategias de ingeniería de línea
celular, las cuales se enfocan en extender la longevidad del cultivo celular, acelerar la tasa de
crecimiento específica y aumentar la densidad celular viable máxima.

Transfección de las células huésped con el vector: implica la integración de genes extraños en los
cromosomas de la célula con ayuda de un vector de expresión que contiene dichos genes.

Selección y clonación: esta etapa o serie etapas tienen como finalidad la detección de clonas de
células raras de alta producción para disminuir tiempos y esfuerzos en el proceso de obtención de
la proteína recombinante. En esta etapa, pueden emplearse tecnologías como la selección de célula
activada por fluorescencia (FACTS), ClonePix, Cell XpressTM, entre otras.

Clonación de células individuales o dilución limitante: forma parte de la selección y

clonación, es necesaria debido a que la productividad de proteínas de las células
individuales en las poblaciones celulares transfectadas y amplificadas genéticamente es
variada, ya sea por la inestabilidad genómica inherente o por la heterogeneidad causada
por la integración génica al azar. Dicho esto, puede contribuir a un rendimiento de
biorreactor más consistente, mejor calidad de producto y fabricación del proceso.

Expansión: aquí los análisis de los títulos de proteínas se utilizan posteriormente para elegir
los clones para expansiones progresivas.

Preservación y nueva evaluación: los clones seleccionados se evalúan en biorreactores controlados

y se depositan para su uso futuro.

Referencias

1. Tingfeng Lai, Yuansheng Yang and Say Kong Ng. 2013. Advances in Mammalian Cell Line
Development Technologies for Recombinant Protein Production. Pharmaceuticals 6, 579-603;
doi:10.3390/ph6050579
2. Protein Expression Systems. (2018). SIGMA ALDRICH.
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/articles/biology/protein-expression-
systems.html