FICHA

TÉCNICA
CONTROL MICROBIOLOGICO EN
LOS PROCESOS DE LAVADO INDUSTRIAL

La experiencia demuestra que en Lavandería Industrial y Hospitalaria la contaminación

por microorganismos tiene una gran importancia y por ello, a nivel oficial existe una
legislación bastante concreta, aunque en España para las Lavanderías Industriales no
existe reglamentación alguna sobre que tipo de controles microbiológicos se deben
realizar.

Hemos basado el presente estudio sobre una Lavandería que trabaja en túnel de lavado
continuo con 10 comportamientos y con una producción de 1000 kg. de ropa/hora y
hemos utilizado la legislación comparada que rige en Francia, Alemania, Japón y Gran
Bretaña.

Objetivos

El objetivo principal del proyecto realizado fué el establecimiento de un control micro-

biológico en la lavandería objeto del estudio. Para ello se siguieron las siguientes pau-
tas:

1. Determinación de el/los microorganismos más importantes, y la concentración en la

que pueden o suelen presentarse en una Lavandería Industrial.

2. Establecimiento de la metodología más adecuada para realizar el análisis microbio-

lógico necesario en una Lavandería Industrial.

3. Definición del control microbiológico necesario a seguir en las diferentes fases de

lavado en una Lavandería Industrial.

Descripción de la microbiología en una Lavandería

Una Lavandería Industrial, donde además se lava ropa de un hospital, como la que fué
objeto de estudio, al ser un local donde se manipulan materias presumiblemente infec-
tadas, debe siempre considerarse como un foco de contagio y transmisión de enferme-
dades para el personal de la planta industrial. En ocasiones, se ha detectado la trans-
misión de enfermedades, a los manipuladores, tales como fiebre , salmonelosis, infec-
ciones por hongos, hepatitis A, e incluso hepatitis B.

En su mayoría, los contagios se han asociado al deficiente manejo de la ropa sucia,

bien por haber existido contacto con heridas de los manipuladores, o bien porque éstos
se han lesionado con objetos punzantes que aparecían entremezclados en la ropa.

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Por esta razón, es importante realizar la recepción, tratamiento y almacenamiento con
métodos adecuados, para eliminar o disminuir, en lo posible, las fuentes de infección y
contagio.

La Lavandería por estar expuesta a un sin fin de prendas de diferentes orígenes, pre-
senta una grandísima variedad de microorganismos. Para su estudio, inicialmente se
dividen en dos grupos:

A. Microorganismos que pueden aislarse en la ropa de Lavandería.

B. Microorganismos presentes en la maquinaria de la Lavandería.

Microorganismos que pueden aislarse en la ropa de Lavandería

Para la investigación de la flora que aparece, generalmente, en la ropa sucia, se parte

de:

1. Microorganismos presentes en el agua de lavado:

Según las investigaciones realizadas en aguas de lavado utilizadas en varios ciclos de
lavado sin jabón, ni otros aditivos, y neutralizando el cloro residual de otros lavados con
tiosulfato sódico, la flora aislada que predominaba era de bacterias gramnegativas (re-
presentando hasta un 76'2% del total) siendo las familias que destacaban las de
Enterobacterias y Pseudomonas. De los microorganismos grampositivos los más re-
presentativos eran la familia de Staphilococcus y la de los Bacillaceae. Además de
bacterias, también se detectaron hongos, de los que Candida albicans fue la especie
más frecuente.

2. Microorganismos presentes en la ropa sucia:

En este caso se llevó a cabo un estudio en ropa sucia donde las colonias aisladas, a
diferencia del agua, pertenecían en su mayoría a bacterias grampositivas (43'0%
Staphilococcus).

Otro aspecto a tener en cuenta, sobre los microorganismos presentes en la ropa sucia
y que tiene gran importancia, fué el relacionado con las infecciones nosocomiales; és-
tas pueden estar ocasionadas, tanto por bacterias, como por hongos o por virus. De
estos agentes, los más estudiados han sido las bacterias, donde distintos autores co-
incidieron en afirmar la constante presencia de Pseudomona aeruginosa, Bacillus spp.,
Staphilococcus, y Streptococcus en ropa hospitalaria, tanto antes, como después del
procesado.

En lo referente a los hongos, en la década de los ochenta, la Candida albicans, fué

considerado el agente nosocomial fúngico más frecuente en EE.UU. Sin embargo, en
otros estudios no se consiguió aislar hongos en ropa limpia, incluso cuando ésta fué
lavada a bajas temperaturas.
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En el caso de los virus, la escasa bibliografía existente, no hace referencia su presen-
cia en ropa limpia, lo que parece deberse a que los virus necesitan células vivas para
su desarrollo, y fuera del hospedador no sobreviven mucho tiempo.

Microorganismos presentes en maquinaria de Lavandería

El lavado con ropa contaminada provoca que parte de los gérmenes pasen a la maqui-
naria. Estos microorganismos, en algunas ocasiones, son viables durante largos perío-
dos de tiempo, pudiendo por ello ser un foco de contaminación para las prendas de los
siguientes ciclos de lavado. De hecho, en la bibliografía existen referencias sobre estas
contaminaciones cruzadas a partir de lavadoras, calentadores de agua y secadoras
industriales.

a. Presencia de bacterias termófilas en calentadores industriales de agua

Según estudio realizado en 17 Lavanderías se determinó, únicamente, la presencia de

un microorganismo al que se denominó Tyermophilus aquaticus. Este gérmen se aisló
en muestras de agua a 52-83ºC, lo que indica la posible viabilidad de otros microorga-
nismos adaptados a las condiciones extremas de los calentadores.

b. Contaminaciones asociadas a secadores industriales.

Como norma general, el uso de secadores industriales, produce un descenso notable

de la flora residual que presenta la ropa.

Sin embargo, los estudios experimentales realizados demostraron la existencia de gér-

menes que residían en los calentadores y que por tanto, contaminaban la ropa según
se procesaba. Además, en otros casos se detectó la presencia de estos gérmenes
también, en ropa lavada a bajas temperaturas.

Metodologías de análisis microbiológico.

En este apartado se describen las diferentes metodologías de análisis microbiológico

de una Lavandería Industrial.

Investigaciones microbiológicas en muestras textiles.

Según el procesamiento de muestras de ropa, el método seguido se clasifica en:

a) Métodos destructivos: utilizan parte de la prenda de donde se extrae la muestra y por

tanto la destruyen. Estos métodos permiten una mayor recuperación de los microorga-
nismos lo que supone obtener unos resultados más fiables.

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b) Métodos no destructivos. En este caso no se daña la prenda, pero la fiabilidad de los
resultados es menor.

a) Métodos destructivos.

1. Método de agitación: Este procedimiento se utiliza para la extracción de los microor-

ganismos de las prendas. Se basa en una agitación continua que realiza un aparato
específico diseñado para tal efecto (Red Devil Paint Shaker) donde la muestra recorta-
da de la tela se somete, en una solución, a un proceso de agitación.

2. Método de maceración: En este caso, la muestra de tela se macera en una solución

salina de buffer fosfato.

Con la aplicación de ambos métodos, se obtuvieron resultados similares, si bien, resul-

ta más económico y de menor complejidad el método de agitación.

3. Incubación directa: en este tipo de recuperación, se elimina la extracción de los mi-

croorganismos, y por tanto, es la propia muestra de tela la que se introduce, para su
desarrollo por incubación, en un medio de cultivo.

b) Métodos no destructivos.

Este método se basa en la impresión de una superficie de la prenda a analizar, sobre

una placa de Rodack que contiene agar nutritivo (tripticasa soja). Para ello, se ejerce
durante 10 segundos una presión uniforme de 500 g.

Con la aplicación de este método, la prenda no sufre desperfectos, por lo que los resul-
tados lógicamente suponen una ventaja económica frente a los métodos destructivos.
Sin embargo, se ha demostrado que con la aplicación de esta técnica se obtienen re-
sultados variables.

Aún así, la legislación francesa para el control rutinario de la calidad microbiológica de

la ropa recoge en su norma G-07 la utilización de métodos no destructivos en sus con-
troles.

Investigaciones microbiológicas en muestras de agua.

Según la bibliografía consultada, una Lavandería debe analizar microbiológicamente el

agua en tres puntos concretos: antes, durante y al final del proceso de lavado.

El objetivo de este control microbiológico es estudiar el proceso de lavado, aunque se

ha comprobado que los microorganismos que se detectan en la última agua de aclara-
do, no guardan relación directa con los supervivientes de la ropa.

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Investigaciones microbiológicas de la maquinaria y ambientales

1. Maquinaria

La maquinaria y utensilios empleados en la Lavandería se deben mantener en buenas

condiciones de higiene para que no sean fuente de transmisión de microorganismos a
la ropa. No se han encontrado recomendaciones oficiales acerca de los límites de car-
ga en la maquinaria, ni de los utensilios de Lavanderías Industriales.

Un método de control de las condiciones higiénicas de la maquinaria se basa en el

control microbiológico de:

a) Muestras de agua: este tipo de muestras se toman en las distintas fases de lavado;
desde el agua del primer enjuague hasta la del último centrifugado. Si bien habrá que
tener la precaución de anular el efecto de agentes bactericidas y bacteriostáticos que
puede presentar esta agua.

b) Muestras de superficies de los aparatos: este tipo de muestras son especialmente

importantes en los casos en los que alguna superficie del aparato, entre en contacto
con ropa ya limpia.

2. Medio ambiente

El aire es un vehículo de gran variedad de bacterias, levaduras, etc.. y la mayoría de

estos microorganismos están asociados a partículas en suspensión que proceden del
polvo y pelusas eliminadas por el constante movimiento y trasiego de las prendas, cons-
tituyendo, de forma indirecta, una importantísima fuente de contaminación.

Para la toma de muestras en este caso, se puede proceder de dos formas:

-utilizando dispositivos que filtran el aire y retienen los microorganismos.

-utilizando una placa de cultivo estéril abierta en el local donde se toma la muestra,
durante un tiempo mínimo de 30 minutos.

Descripción del protocolo analítico

En base a los distintos estudios descritos, se detallan a continuación las pautas analí-
ticas seguidas en el análisis microbiológico de las muestras de agua y ropa que se
tomaron en el túnel de lavado estudiado.

Se describe inicialmente, cuales fueron las prendas seleccionadas, posteriormente se

determinan los puntos de muestreo y por último se detalla el procesado que se llevó a
cabo de las muestras recogidas.

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Descripción de las muestras y puntos de muestreo.

Dada la heterogeneidad de la ropa que se procesaba en la Lavandería objeto de estu-

dio, para el análisis de la muestra se seleccionó, por tratarse de la más conflictiva, la
ropa procedente de hospital.

En el proyecto llevado a cabo, se recogieron únicamente prendas procedentes de los

programas destinados para el lavado de sábanas y toallas, ya que permitía analizar si la
textura de la prenda estudiada, influía en la recuperación de los microorganismos al
realizar una siembra. Ambos ciclos están diseñados para ropa de hospital de algodón
100%, y conllevan un prelavado a 35ºC (temperatura estudiada para impedir coagula-
ción y fijación de fluido como la sangre) y un lavado que para este tipo de prendas se
realiza a 80ºC.

Respecto a los puntos de muestreo, para poder obtener una visión más general de la
línea de producción, se seleccionaron los siguientes puntos en el procesado de la ropa:

-ropa húmeda: sábana y toalla después de prensar.

-ropa semihúmeda: sábana a la salida de la secadora
-ropa seca: sábana salida de la calandra y toalla salida de secadora

Teniendo encuenta el funcionamiento continuado del túnel, se vigiló la homogeneidad

en los compartimentos para evitar, en lo posible, las interferencias con otros ciclos de
lavado.

Por otra parte se hizo una toma de muestras de agua que se llevó a cabo simultánea-
mente a la toma de muestras de la ropa, ya que se decidió estudiar, en base a los datos
bibliográficos recabados, la relación existente entre la contaminación que había en el
agua y la que aparecía posteriormente en la ropa. Los puntos de muestreo selecciona-
dos de agua en el túnel fueron:

- muestra del agua de la red antes de su entrada en el túnel

- compartimiento 5 y 7 de lavado

- compartimiento 10 de aclarado

- filtro de agua

- agua de prensado de la ropa

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Siembra

Una vez realizada la toma de muestras descrita, en condiciones asépticas, se procedió

a su siembra en un medio de cultivo.

Según el tipo de muestra llevada a cabo, se utilizaron diferentes técnicas:

Agua

Se usaron dos técnicas para la siembra de agua y la posterior comparación de los

resultados:

A. Filtración a vacío: se utilizó un equipo en filtración Millipore con una membrana de

filtración 0'45 micras.

Los resultados en este caso no fueron buenos, por el exceso de fibras en suspensión
que poseían las muestras de agua.
B. Siembra directa en TSA: para esta siembra se pipeteó directamente la muestra en
una placa de Petri que contenía Tripticosa- Soja-Agar (TSA, medio de cultivo sólido,
universalmente utilizado) para soportar el crecimiento de una variedad amplia de mi-
croorganismos.

Además, se sembraron diluciones de las muestras, utilizando como diluyente solución

de Buffer Fosfato (PBS, solución salina apta para mantener constante el número de
microorganismos) mientras se realizaban las diluciones de las muestras.

Ambos medios, TSA y PBS, tuvieron que ser enriquecidos con Tween 80 y lecitina,
compuestos muy utilizados, que permiten el crecimiento rápido de los microorganis-
mos durante la incubación, pues está experimentalmente comprobado, que los restos
de productos en la ropa y en el agua impiden el desarrollo en la incubación.

Ropa

En este caso, se utilizaron también dos técnicas de siembra: las no destructivas y las
destructivas.

a. No destructivas: se hizo mayor hincapié en optimizar esta técnica por la ventaja

que supone el no dañar la prenda a la hora de tomar la muestra.

Se utilizaron placas Rodack, que contenían TSA, caracterizadas porque el medio de

cultivo forma una curvatura convexa que facilita el apoyo en superficies.

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Para mejorar la extracción de los microorganismos de la ropa se hicieron pruebas de
humectación previa de la prenda con PBS.

b. Destructivas: se hicieron un número menor de ensayos utilizando esta técnica debi-

do al deterioro que se ocasionaba en las prendas.

De la ropa se cortaba asépticamente una muestra, se introducía con PBS y se sometía

a agitación.

Esta forma de operar, descrita como maceración, permite extraer los microorganismos
que existen en la ropa en solución.

Todas las muestras de agua y ropa fueron incubadas en estufa a 35-37ºC durante 48
horas.

Tras la incubación, se procedió a la lectura de los resultados.

Resultados

Después de sucesivas repeticiones del muestreo, se recopilaron los siguientes resul-

tados que permitieron definir la base del protocolo microbiológico en la Lavandería
estudiada.

Resultados obtenidos sobre el agua

La experiencia demostró que el agua de proceso de lavado exige una dilución que per-
mita un mejor recuento e identificación de los microorganismos.

Así, exceptuando el agua de la red general (que permitió recuentos negativos en siem-
bra directa) el agua obtenida de los compartimientos de lavado 5 y 7 del túnel, obligaron
para conseguir el recuento de microorganismos, realizar diluciones de hasta 1/1000.

Por otro lado, en los resultados del agua del compartimiento 10, que realiza el último
aclarado, del filtro y la prensa, se observó que existía una disminución de la carga
microbiana, que se debía a la incorporación de agua fresca de la red, al ciclo de lavado.
Hay que añadir, que la ropa en este caso ya esté lavada, y por ello supone una disminu-
ción en los recuentos de microorganismos por lo que sólo era necesario realizar dilu-
ciones de hasta 1/100.

Los resultados obtenidos con el método de filtración a vacío, "Milipore", demostraron

ser solamente útiles para muestras de agua de la red, ya que el alto contenido de sóli-
dos en suspensión que presentaba el agua de lavado, obstruían la membrana de 0'45
micras a los pocos segundos de iniciarse la filtración y no mejoraron haciendo una
filtración previa con filtros desechables de 5 micras de poro.
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Resultados obtenidos sobre la ropa

En el estudio de la influencia de la humectación en la ropa sobre la recuperación de los

microorganismos se comprobó que no se podía mejorar la extracción, ni la adherencia,
ni el crecimiento posterior, cuando se administraba una solución de PBS (solución Bu-
ffer Fosfato), por lo que en el protocolo del control, no se tuvo en cuenta.

Tampoco influyó en los recuentos de la flora, el grado de humedad ni la textura que

presentaba la ropa en el momento del análisis, es decir, esto significaba que no había
relación entre los datos obtenidos cuando se trataba de una toalla o una sábana, ni si
éstas estaban secas o húmedas.

Se descartó, salvo para comprobaciones muy específicas, la técnica de análisis des-

tructivo, ya que su utilización es económicamente inviable (por la destrucción de la
prenda que ello significa) en controles rutinarios de la calidad microbiana en la ropa
hospitalaria de una Lavandería Industrial.

En cuanto al medio de cultivo utilizado, tanto para el de agua como para la ropa, se
obtuvieron muy buenos resultados en medios de TSA (Tripticosa- Soja Agar) donde se
usaba como diluyente la solución PBS (Solución Buffer Fosfato), ambos siempre enri-
quecidos con Tween 80 y Lecitina, para facilitar el crecimiento de la flora.

Definición del control microbiológico

Una vez que se comprobó la efectividad de la técnica analítica en la recuperación de

microorganismos, el siguiente paso fue la descripción del Control Microbiológico en la
Lavandería.

Este control tendría que definir:

*Puntos de muestreo
*Tamaño del lote y número de unidades a muestrear
*Metodología analítica
*Nivel de aceptabilidad del lote
*Periodicidad del control

En este trabajo los puntos de muestreo fueron investigados hasta determinar cuál era
el más idóneo, el resto de los puntos del control se hicieron en base a la Norma estable-
cida por el CEN (Comité Europeo de Normalización).

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Descripción de la Norma.

La Norma, emitida por CEN (Comité Europeo de Normalización) establece los contro-
les microbiológicos que se deben realizar en una Lavandería Industrial y que permiten
comprobar el buen funcionamiento de los procedimientos de lavado.

Esta Norma específica que el tipo de control (que se debe establecer en la ropa limpia
depende de los resultados microbiológicos obtenidos con un muestreo previo de las
prendas).

La norma exige definir unos niveles de calidad o aceptabilidad, valores que la propia
empresa fijará de acuerdo con el cliente, determinando así el tipo de control que se
requiera; control normal, reforzado o un control reducido sobre la eficacia microbiológica.

Otro punto a tener encuenta en la aplicación de la norma, es la periodicidad con que

debe realizarse el control. La frecuencia de los análisis debe garantizar que se manten-
gan los niveles de aceptabilidad acordados y en caso de sobrepasarse el valor fijado,
disminuir el tiempo entre controles para detectar el fallo en la línea de proceso.

La Norma define las siguientes etapas para su aplicación:

1. Selección del número de unidades de ropa, de acuerdo con el tamaño del lote: para
calcular el tamaño del lote, la propia Norma define según una tabla el número de mues-
tras, si bien estará siempre en función del tipo de control que se haya preestablecido.

2. Control microbiológico: la Norma recomienda para el análisis microbiológico de la

ropa, técnicas no destructivas, es decir, mediante placas de Rodack de contacto direc-
to; también determina que los recuentos totales de microorganismos sean sobre bac-
terias aerobias mesófilas.

3. Cálculo del nivel de aceptabilidad del lote: en este apartado se define el procedimien-
to a seguir para aceptar o no, un lote, es decir, a partir de los resultados microbiológicos,
verificar si el lote está entre los niveles establecidos.

La Norma dispone de unas tablas, donde los niveles de aceptabilidad que han sido
previamente fijados, oscilando entre unos márgenes, más o menos estrictos.

Aplicación de la norma

En el estudio realizado, la Norma fué aplicada del siguiente modo.

-Selección de punto(s) de muestreo(s).

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En la aplicación de la Norma en la Lavandería, lo primero que se planteó fué la selec-
ción del punto o puntos de muestreo.

El inconveniente que surgió en la selección de los puntos más idóneos fué, la consecu-
ción de resultados a lo largo del proceso de lavado, en base a los datos obtenidos de la
evolución de la carga microbiana conocida.

Por un lado, la ropa de estudio presentaba una gran heterogeneidad en cuento a la

carga microbiana y además resultaba imposible la selección de prendas en diferentes
puntos de la línea de proceso. Por ello, se partió de unas prendas escogidas con colo-
res llamativos, para su rápida identificación y reconocimiento entre el resto de la cola-
da.

Estas prendas eran esterilizadas en calor seco y antes de ser lavadas, se inoculaban
con concentraciones decrecientes de microorganismos, que habían sido previamente
aislados del agua del propio túnel . La ropa así preparada, se introducía junto al resto de
la colada y se procedía de la forma ordinaria con el ciclo de lavado correspondiente.

Los puntos del proceso donde se tomaron las prendas de colores, previamente selec-
cionadas, fueron diferentes para las sábanas de las tomadas para las toallas. Para
sábanas, se revisó la salida de la secadora, después de pasar por la plancha-calandra
y por último, una vez envasada (fig.1). En el caso de las toallas, se determinó tomar
muestras a la salida de la secadora y también del producto terminado, es decir, ya
envasada (fig.2).

Todas las pruebas que se realizaron en la ropa del túnel, se acompañaron de los estu-
dios ambientales que justificasen los resultados obtenidos.

Con todos estos datos, se definió como punto de muestreo más adecuado para el con-
trol, el producto envasado, tanto en toallas como en sábanas y por ello, se decidió
muestrear esta etapa, ya que los resultados obtenidos en los ensayos de inoculación
que demostraron su mayor idoneidad, para estudiar la calidad microbiana en la ropa
limpia.

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- Aplicación:

Una vez definido el punto de muestreo más adecuados, se procedió con los siguientes
pasos de la Norma, previamente descrita:

a) Selección del número de unidades de ropa

b) Análisis microbiológico
c) Cálculo de aceptabilidad (en base a un control normal y con un nivel de aceptabilidad
intermedio, según los datos que figuran en la Norma).

Para conseguir los mejores resultados en la aplicación de la Norma se procedió, junto

al control de la ropa, a realizar un estudio de contaminación ambiental en la planta, con
el fin de alcanzar, en la medida de lo posible, una baja contaminación microbiológica;
esto permitió definir, las medidas a aplicar de carácter higiénico, junto a las precaucio-
nes necesarias para la manipulación de la ropa, tanto limpia como sucia.

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Discusión

Este trabajo ha permitido establecer unas pautas analíticas y un control microbiológico

del proceso que verifican el estado microbiológico de la ropa hospitalaria procesada.

Se demuestra con los datos obtenidos que el control microbiológico en la ropa es nece-
sario para corregir aquellos programas de lavado, o lotes, en los que se detecte que la
contaminación alcanza niveles no aceptables.

Con los datos del control de la calidad microbiológica de la ropa, junto con la informa-
ción aportada por el estudio del control ambiental, permiten conocer las condiciones y
salubridad del trabajo, del trabajador y del producto obtenido. Así, con toda esta infor-
mación se podrán aplicar medidas higiénicas y de educación de los manipuladores de
la planta, consiguiéndose un ambiente de trabajo seguro.

Punto de control Disoluciones del inóculo de trabajo

Directa 1/10 1/100 1/1000 Testigo
Sábana secadora 13 11 18 10 20
Sábana calandra 1 1 1 1 2
Sábana envasada 1 1 0 0 1
En UFC/placa de Rodack

Punto de control Disoluciones del inóculo de trabajo

Directa 1/10 1/100 1/1000 Testigo
Toalla secadora 2 3 2,5 2 3
Toalla calandra 0 1 1 1 2

En UFC/placa de Rodack

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