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Bacteriología
Unidad Temática I
PLAN 2010
Segundo año
2018-2019
FACULTAD DE MEDICINA
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
Misión
Visión
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
CONTENIDO
Actividades del proceso enseñanza-aprendizaje….... 8 -Práctica No. 2 Manejo y cuidado del microscopio ....... 42
Material de apoyo a la docencia
Libros de consulta
Sitios de Internet con información
-Práctica No. 3 Introducción a la bacteriología ……..… 44
confiable sobre virología médica
-Práctica No. 4 Cultivo de microbiota bacteriana de piel ...
Presentación ……..…………………………………...…... 9 ………………………………………………………...……. 47
Objetivos Generales …………………...…………….… 10
-Práctica No. 5 Infecciones en vías respiratorias ...…... 49
Objetivos del área ………………………………..……... 11
-Práctica No. 6 Infecciones del tracto gastrointestinal .. 51
GUIONES TEÓRICOS
-Práctica No. 7 Infecciones de vías urinarias ……........ 54
1. Introducción a la relación hospedero-parásito …… 12
-Práctica No. 8 Infecciones sistemáticas ……….…....… 58
2. Introducción a la bacteriología ......………................. 13
-Anexo: Determinación de sensibilidad a
3. Bacterias causantes de infecciones del antimicrobianos ………………………………………...… 60
tracto respiratorio ..……………………………….….... 14
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Ubicación 2° año
Duración Anual
Créditos 17
Carácter Obligatorio
Clave 1231
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El alumno al inicio del segundo año de la carrera Dentro de las actividades profesionales realizará las
debe haber alcanzado el nivel suficiente de que sean necesarias para promoción de la salud, la
conocimiento, comprensión y análisis de las materias protección específica y el diagnóstico temprano en
básicas estudiadas durante el primer año asimilando relación con los siguientes padecimientos: difteria,
una mayor comprensión en la relación huésped- tosferina, tetanos, faringoamigdalitis, fiebre tifoidea y
parásito, mecanismos defensivos del primero y paratifoidea; otras salmonellosis, disentería bacilar,
patogénicos del segundo, así como el panorama brucelosis, tuberculosis pulmonar, cólera,
general sobre elementos básicos del problema salud- gastroenteritis, erisipela, escarlatina, varicela,
enfermedad en la comunidad, complementando a sarampión, rubéola, exantema súbito. herpes simple,
este nivel no sólo el aspecto informativo sino el inicio herpes zoster, dengue, hepatitis viral aguda, sífilis,
del formativo. candidosis oral, micosis cutáneas superficiales
(dermatofitosis, pitiriasis versicolor). ascariasis,
Los conocimientos mínimos necesarios para aprobar tricosefalosis, necatoriasis, teniosis, amibiasis,
la asignatura de Microbiología y Parasitología se intestinal, malaria, giardiasis, balantidiasis,
encuentran en este Manual, por lo que, le sugerimos fasciolosis, estrongiloidiasis, miasis, enterobiasis,
las revise cuidadosamente; en caso de que algún pediculosis, sarcoptosis.
concepto no se discuta en clase, es responsabilidad Así como las enfermedades de transmisión por
suya buscar la información correspondiente y contacto sexual (trichomonasis, candiasis sífilis,
aprenderla apoyándose preferentemente en la gonorrea, infecciones por clamidia y mycoplasma,
bibliografía recomendada en el Manual. herpes genital, infecciones inespecíficas).
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1. Microscopios
2. Proyectores
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PRESENTACIÓN
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OBJETIVOS GENERALES
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2. INTRODUCCIÓN A LA BACTERIOLOGÍA
Las bacterias son células procariotas y 2.4 Clasificación. La clasificación más importante
pequeñas que solo se pueden observar con la para el médico es la que permite hacer una
ayuda del microscopio, presentan diferentes oportuna y correcta identificación del
formas, carecen de núcleo y de organelos microorganismo (morfología, agrupación, tipo
celulares. Tienen estructuras únicas como la pared de tinción, identificación serológica,
celular que contiene peptidoglicano con o sin metabolismo y genética).
lipopolisacáridos. Típicamente, el cromosoma
bacteriano es solo uno y es una molécula circular 2.5 Genética bacteriana
de ADN de doble cadena que contiene 2.5.1 Replicación del cromosoma
aproximadamente 5 millones de pares de bases. 2.5.2 Información genética: genes (estructura
Las bacterias tienen ribosomas 70S que son y función: transcripción, traducción).
diferentes a los de las células eucariotas pero que 2.5.3 Mecanismos de intercambio de
realizan la misma función. Aunque las bacterias se información genética entre las
dividen por fisión binaria, han desarrollado bacterias: conjugación, transformación,
mecanismos para intercambiar información transducción.
genética, lo que les ha permitido adaptarse mejor al 2.5.4. Rearreglos cromosómicos por
medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir transferencia horizontal de genes:
en medios hostiles como en los que la presión transposones, secuencias de inserción
osmótica es muy baja o en temperaturas extremas y eventos de recombinación.
y pueden usar diversas fuentes de energía para su 2.5.5 Tipos de mutaciones, factores físicos y
metabolismo. Es indudable que el conocimiento de químicos que intervienen en la
las bacterias, desde el punto de vista genético, inducción de mutaciones.
metabólico y estructural, constituye un elemento
fundamental para poder realizar una clasificación 2.6 Metabolismo bacteriano
útil en la práctica médica, así como comprender la 2.6.1 Autótrofos, Heterótrofos,
participación de la expresión de los factores de Quimiotótrofos y Litótrofos
patogenicidad en la relación huésped – bacteria. 2.6.2 Aerobios, Anaerobios, Facultativos y
Microaerofílicos
2.1 Antecedentes históricos de la bacteriología 2.6.3 Metabolismo fermentativo y oxidativo
2.6.4 Cultivo de bacterias. Curva de
2.2 Formas bacterianas crecimiento bacteriano.
2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos
2.7 Resistencia bacteriana
2.3 Estructura y función de sus componentes
celulares
2.3.1 Cápsula
2.3.2 Pared celular de bacterias gram-
positivas y gram–negativas.
Protoplastos, esferoplastos y formas L
2.3.3 Membrana externa y membrana
plasmática
2.3.4 Pili, fimbrias, flagelos
2.3.5 Citoplasma (ribosomas, cuerpos de
inclusión)
2.3.6 Cromosoma bacteriano, elementos
extracromosómicos
2.3.7 Esporas
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Las enfermedades del tracto respiratorio superior 3.1.4.5 Otras enfermedades asociadas a
representan una de las causas más frecuentes de estreptococos (infecciones de
consulta médica. El tracto respiratorio es un sitio común tejidos blandos).
para el establecimiento de microorganismos patógenos 3.1.4.6 Complicaciones: secuelas
debido al tropismo que tienen ciertos microorganismos posestreptocócicas (fiebre
por el epitelio respiratorio y por encontrarse en real reumática aguda y
comunicación con el medio ambiente. Las glomerulonefritis aguda),
manifestaciones clínicas de las infecciones (otitis media, síndrome de choque toxico
sinusitis, faringitis, amigdalitis, epiglotitis, bronquitis, estreptocóccico.
neumonía, etc.), dependen del órgano blanco del 3.1.5 Participación de la respuesta inmune en el
microorganismo de la edad del paciente y de factores control de las infecciones.
predisponentes agregados que presente. En general, las
infecciones del tracto respiratorio las podemos dividir en 3.1.6 Diagnóstico diferencial
infecciones altas y bajas. Aunque existen numerosas 3.1.6.1 Faringitis de origen viral y
bacterias que pueden producir enfermedad, aquí solo se bacteriano
hará referencia a aquellas que son más importantes por 3.1.6.2 Escarlatina con otras
su frecuencia o por producir cuadros clínicos graves. Un enfermedades exantemáticas
diagnóstico etiológico correcto hará la diferencia en el 3.1.6.3 Fiebre reumática aguda con
éxito del tratamiento y evitará complicaciones con enfermedades autoinmunes
secuelas importantes.
3.1.7 Diagnóstico de laboratorio
3.1 Streptococcus pyogenes 3.1.7.1 Cultivo en agar sangre (Beta
3.1.1 Características del microorganismo hemolicis)
3.1.1.1 Microscópicas 3.1.7.2 Aglutinación con anticuerpos
3.1.1.2 Antigénicas contra el antígeno del grupo A
3.1.2 Factores de virulencia 3.1.7.3 Pruebas serológicas (detección
3.1.2.1 Adherencia al epitelio de anticuerpos anti-estreptolisina
(proteína M, F y ALT) O, anti DNasas y anti
3.1.2.2 Evasión de la fagocitosis hialuronidasa)
(proteína y cápsula M) 3.1.8 Estrategias de tratamiento.
3.1.2.3 Daño al huésped por enzimas 3.1.8.1 Antimicrobiano
(hialuronidasa, DNAsas, C5a 3.1.8.2 Tratamientos de fiebre reumática
peptidasas, estreptocinasas, y glomerulonefritis.
estreptolisinas S y O) y 3.1.9 Prevención y control.
exotoxinas pirogénicas A, B y C. 3.1.9.1 Identificación de portadores y
3.1.3 Epidemiología erradicación del estado de
3.1.3.1 Transmisión por contacto directo portador
y secreciones faríngeas. 3.1.9.2 Quimioprofilaxis en personas que
3.1.3.2 Incidencia de la faringitis en los han padecido fiebre reumática.
grupos de edad 5-15 años.
Importancia de cuadros clínicos
de repetición.
3.1.3.3 Serotipos asociados a
faringoamigdalitis, fiebre
reumática, enfermedades
infecciosas de piel, síndrome de
choque tóxico.
3.1.4 Patogénesis
3.1.4.1 Iniciación del proceso infeccioso y
desarrollo de signos y síntomas.
3.1.4.2 Faringitis.
3.1.4.3 Enfermedades producidas por
toxinas (Escarlatina y Síndrome
de Choque tóxico estreptocócico).
3.1.4.4 Otitis media, adenitis cervical
supurativa, angina de Ludwig,
sinusitis aguda.
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3.6.3 Epidemiología
3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infección emergente (huésped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisión
3.6.4 Patogénesis
3.6.4.1 Iniciación del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y síntomas
3.6.4.2 Formas clínicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infección
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
3.6.5 Participación de la respuesta inmune
en el control de la infección
3.6.6 Diagnóstico diferencial
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M. avium. Destacar la
importancia de estas
micobacterias no tuberculosas
en pacientes
inmunodeprimidos por VIH o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cáncer pulmonar y diabetes
3.6.7 Diagnóstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopía
3.6.7.2 Cultivo en Lowenstein-Jensen
y Medios líquidos.
3.6.7.3 Métodos moleculares
3.6.7.4 Valoración del PPD
3.6.7.5 Radiografía de tórax
3.6.7.6 Otras técnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema de tratamiento
antifímico (Norma Oficial
Mexicana)
3.6.8.2. Treatamientos directamente
observados (DOT)
3.6.9 Control y prevención
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevención
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La piel es el órgano más extenso de nuestro cuerpo, 4.1.8.3 Pruebas bioquímicas específicas
sus principales funciones son cubrir y proteger nuestra y diferenciales
superficie corporal. Actúa como una barrera física contra 4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a
el medio ambiente y es la primera línea de defensa del antimicrobianos
organismo contra la invasión de cualquier 4.1.9 Estrategias de Tratamiento
microorganismo. Cuando la piel es dañada, esta barrera 4.1.9.1 Antimicrobianos
se rompe, haciendo susceptible al organismo a la entrada 4.1.9.2 Medidas de apoyo
de bacterias (patógenas o de la microbiota) hacia la
dermis y capas más profundas produciendo una serie de
4.2 Clostridium perfringens
patologías en cada uno de estos tejidos.
4.2.1 Características del microorganismo
4.2.1.1 Producción de esporas
4.1 Staphylococcus aureus
4.2.2 Factores de virulencia
4.1.1 Características del microorganismo
4.2.2.1 Toxinas: alfa, beta, epsilon, iota,
4.1.2 Factores de virulencia
delta, theta, kappa, lambda, miu,
4.1.2.1 Proteína A
enterotoxina
4.1.2.2 Péptidoglicano y ácido teicoico
4.2.2.2 Neuraminidasa
4.1.2.3 Cápsula
4.2.3 Epidemiología
4.1.2.4 Proteína fijadora de fibronectina
4.2.3.1 Presencia en el intestino de
4.1.2.5 Factor de agregación
mamíferos
4.1.2.6 Toxinas: exfoliativa, toxina de
4.2.3.2 Vías de entrada y transmisión
síndrome de choque tóxico,
4.2.4 Patogénesis
enterotoxinas
4.2.4.1 Iniciación del proceso
4.1.2.7 Citotoxinas: hemolisinas,
infeccioso y desarrollo de
leucocidina
signos y síntomas
4.1.2.8 Enzimas: coagulasa, catalasa,
4.2.4.2 Gangrena gaseosa (signos y
colagenasa, hialuronidasa,
síntomas de la enfermedad)
fibrinolisina, DNasas,
4.2.5 Participación de la respuesta inmune en el
penicilinasas.
control de estas infecciones
4.1.3 Epidemiología.
4.2.6 Diagnóstico diferencial con Streptococcus
4.1.3.1 Importancia del estado de
pyogenes y Staphylococcus aureus.
transmición
4.2.7 Otras enfermedades causadas por C.
4.1.4 Patogénesis
perfringens
4.1.4.1 Iniciación del proceso
4.2.7.1 Intoxicación alimentaria
infeccioso y desarrollo de
4.2.7.2 Colitis ulcerativa
signos y síntomas
4.2.7.3 Endometritis
4.1.4.2 Factores predisponentes para
4.2.8 Diagnóstico de laboratorio
adquirir la infección y
4.1.8.1 Frotis y tinción
desarrollar la enfermedad:
4.1.8.2 Cultivo
Síndrome de piel escaldada,
4.1.8.3 Pruebas bioquímicas
foliculitis, forúnculos, ántrax,
específicas y diferenciales
carbunco y acné.
4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a
4.1.5 Participación de la respuesta inmune en
antimicrobianos
el control de estas infecciones
4.2.9 Estrategias de Tratamiento
4.1.6 Diagnóstico diferencial con
4.1.9.1 Antimicrobianos
Streptococcus pyogenes y Clostridium
4.1.9.2 Medidas de apoyo
perfringens
4.1.7 Otras enfermedades asociadas a
S. aureus
4.1.7.1. Osteomielitis
4.1.7.2 Intoxicación alimentaria
4.1.7.3 Infecciones en pacientes
inmunocomprometidos o con
factores de riesgo agregado
(infecciones intrahospitalarias)
4.1.8 Diagnóstico de laboratorio
4.1.8.1 Frotis y tinción
4.1.8.2 Cultivo
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En nuestro país, las diarreas siguen siendo una 5.1.6 Diagnóstico de laboratorio
causa común de consulta con el médico general. 5.1.6.1 Métodos invasivos
Aunque, generalmente son enfermedades que se 5.1.6.2 Métodos no invasivos
autolimitan, es importante mantener el buen estado 5.1.7 Estrategia de tratamiento
de hidratación y de nutrición del paciente para 5.1.7.1 Terapia triple
evitar serias complicaciones. La mayoría de las 5.1.7.2 Terapia cuádruple
diarreas no requieren del uso de antimicrobianos
para su tratamiento. Sin embargo, existen INTESTINOS DELGADO Y GRUESO
patógenos importantes que producen diarrea 5.2 Escherichia coli enterotoxigénica
acompañada de moco y sangre produciendo daño Escherichia coli enteroagregativa
en la mucosa o en el epitelio intestinal, que pueden Escherichia coli enteropatógena
llevar al paciente a presentar complicaciones Escherichia coli enteroinvasiva
graves. En estos casos de diarrea, el tratamiento Escherichia coli enterohemorrágica
correcto comprende la administración de 5.2.1 Características de los microorganismos
antibióticos, además, de las medidas generales 5.2.1.1 Morfología
para obtener la completa recuperación del paciente. 5.2.1.2 Metabolismo y medios de
Por tal motivo, el médico debe de saber cuáles son cultivo diferenciales para su
los microorganismos causales en diarreas acuosas crecimiento
y cuáles son productores de diarrea con sangre, 5.2.1.3 Características bioquímicas
con el fin de hacer un diagnóstico etiológico diferenciales
correcto e instalar el tratamiento adecuado. 5.2.1.4 Estructuras antigénicas para
su clasificación serológica
ESTOMAGO Y DUODENO (antígenos K, O y H)
5.1 Helicobacter pylori 5.2.1.5 Variación antigénica
5.1.1 Características del microorganismo 5.2.2 Factores de virulencia
5.1.1.1 Morfología 5.2.2.1 Escherichia coli
5.1.1.2 Diversidad genética enterotoxigénica
5.1.1.3 Variación antigénica - Toxinas termoestables (STa
5.1.2 Factores de virulencia y STb)
5.1.2.1 Ureasa - Toxinas termolábiles (LT-1 y
5.1.2.2 Antígenos de Lewis LT-2)
5.1.2.3 Adhesinas - Adhesinas CFA/I, /II, /III
5.1.2.4 Isla de patogenicidad cag 5.2.2.2 Escherichia coli
5.1.2.5 Proteína CagA enteroagregativa
5.1.2.6 Citotoxina vacuolizante - Plásmido que codifica
5.1.3 Epidemiología fimbria (GVVPQ) que media la
5.1.3.1 Frecuencia de la infección a unión con la mucosa
nivel nacional y mundial intestinal.
5.1.3.2 Factores predisponentes para - Patrón de adherencia
adquirir la infección (formando agregados)
5.1.3.3 Vía de transmisión - Toxina EAST (parecida a
5.1.4 Participación de la respuesta inmune la LT)
en el control de la infección - Hemolisina
5.1.5 Patogénesis 5.2.2.3 Escherichia coli
5.1.5.1 Iniciación del proceso enteropatógena
infeccioso y desarrollo de - Plásmido EAF que codifica
signos y síntomas. para una adhesina Bfp (pili) –
5.1.5.2 Gastritis estrecha codificada por el gen
5.1.5.3 Ulcera péptica eae que favorece la unión
5.1.5.4 Asociación con desarrollo de íntima entre la bacteria y la
cáncer célula.
-Rearreglo del citoesqueleto
celular (fenómeno de unión y
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Las infecciones del tracto urinario (ITU) son 7.2 Cocos Gram positivos
causa frecuente de consulta con el médico general. 7.2.1 Staphylococcus saprophyticus
Se ha estimado que aproximadamente 30% de las segunda causa de infecciones de tracto
mujeres sufre una infección de vías urinarias en urinario (ITU) en mujeres con vida
algún momento de su vida, aumentando esta sexual activa.
frecuencia en mujeres con vida sexual activa. Las 7.2.2 Staphylococcus epidermidis (causa de
bacterias que más frecuentemente se asocian a infección urinaria adquirida en hospital).
ITU en mujeres jóvenes son Escherichia coli (80- 7.2.3 Staphylococcus aureus (generalmente se
90%), Staphylococcus saprophyticus y otras establece por vía sistémica).
enterobacterias. Existen factores predisponentes en 7.2.4 Estreptococos del grupo D de Lancefield
el huésped que favorecen las ITU por 7.2.5 Enterococos: Enterococcus faecalis,
microorganismos, en su mayoría, de la familia Enterococcus faecium.
Enterobacteriaceae. Estos factores incluyen la
permanencia de sondas utilizadas para drenar la 7.3 Factores de virulencia de cada uno de los no
orina, una estancia prolongada en el hospital y enteropatógenos y sus mecanismos de
septicemia. La infección bacteriana se adquiere acción.
habitualmente por vía ascendente desde la uretra a 7.3.1 Escherichia coli uropatógena: adhesina,
la vejiga y en ocasiones hasta el riñón. Pili P, AFAI, AFAII, hemolisina, HiyA.
Ocasionalmente, durante una infección del tracto Formación de comunidades bacterianas
urinario, las bacterias invaden la sangre intracelulares
produciendo septicemia. Con menos frecuencia, la 7.3.2 Pseudomonas aeruginosa: hemolisina,
infección puede ser consecuencia de la colagenasa, elastasa, fibrinolisina,
diseminación hematógena de un microorganismo al fosfolipasa C, DNAasa, cápsula (algunas
riñón y ser en este órgano donde ocurra la primo cepas).
infección. Cuando ha habido diseminación 7.3.3 Klebsiella pneumoniae: Cápsula
hematógena al tracto urinario pueden encontrarse 7.3.4 Proteus mirabilis: Flagelos, ureasa.
otras especies involucradas, por ejemplo
Salmonella entérica serotipo Typhi, Staphylococcus 7.4 Epidemiología.
aureus y Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis 7.4.1 Transmisión; ascendente y hematógena
renal). 7.4.2 Factores predisponentes:
7.4.2.1 Pacientes hospitalizados
7.1 Bacilos Gram negativos 7.4.2.2 Instalación de sondas de Foley
7.1.1 Escherichia coli (agente etiológico más 7.4.2.3 Inmunosupresión
frecuente). 7.4.2.4 Diabetes
7.1.2 Klebsiella pneumoniae (asociado a 7.4.2.5 Malformaciones congénitas
infecciones urinarias en pacientes 7.4.2.6 Embarazo
hospitalizados). 7.4.9 Patogénesis
7.1.3 Proteus mirabilis (produce una orina 7.4.9.1 Iniciación del proceso
alcalina, está asociado a la presencia infeccioso y desarrollo de
de litos en la vejiga). signos y síntomas.
7.1.4 Enterobacter sp 7.4.9.2 Infección de vías urinarias bajas:
7.1.5 Citrobacter sp cistitis, uretritis.
7.1.6 Pseudomonas aeruginosa (generalmente 7.4.9.3 Infección de vías urinarias altas:
en pacientes inmunocomprometidos). pielonefritis, pielitis.
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Las enfermedades que afectan a los seres leptospirosis. Algunas de importancia regional y
humanos cambian lentamente y una vez que se otras mundial.
establecen se mantienen por largo tiempo. El Las enfermedades emergentes o re-emergentes
concepto de enfermedad incorpora además de la tienen en general una alta mortalidad, por lo que
sintomatología, el conocimiento de su etiología, del requieren ser identificadas en forma rápida y ser
agente causal y de los factores que la condicionan, motivo de reporte local e internacional. Esto tiene
considera la epidemiología e historia natural, la como objetivo el tratar de desarrollar medidas
fisiopatología, el diagnóstico, tratamiento, y preventivas y terapéuticas con la mayor rapidez
pronóstico y eventualmente de las ideas o posible.
conceptos que la población en general tiene de una
enfermedad en particular. Todo ello acaba 11.1. Definición de enfermedades emergentes y
conformando el significado o el impacto de una re-emergentes.
enfermedad.
11.2. Etapas históricas de la transición de las
El concepto de enfermedades nuevas incluye a enfermedades emergentes y reemergentes.
enfermedades de reciente aparición, no conocidas
anteriormente. El término “nuevas” se refiere 11.3. Factores relacionados con su surgimiento
fundamentalmente a su reciente identificación,
conocimiento, extensión o gravedad y no 11.4. Importancia sanitaria de cada uno de ellos.
necesariamente que esta enfermedad no existiera
previamente. Por lo anterior al considerar a las 11.5. Consecuencias e impacto social de
enfermedades emergentes y re-emergentes.
nuevas enfermedades se hace en el contexto de
enfermedades emergentes o re-emergentes. 11.6. La resistencia antimicrobiana como factor
La definición de “enfermedades emergentes” de surgimiento de enfermedades reemergentes.
considera tanto a padecimientos relacionados a
nuevos agentes, como también a enfermedades 11.7 Reportes epidemiológicos a nivel mundial y
con factores causales ya conocidos, pero que nacional.
recientemente han adquirido carácter epidémico, se 11.8. Enfermedades emergentes de etiología
convierten en amenaza y ocurren en regiones en bacteriana:
las que antes no existían. En las tres últimas 11.8.1 Ehrlichiosis.
décadas se han identificado una serie de 11.8.2 Enfermedad diarreica aguda por
enfermedades catalogadas como emergentes la Campylobacter jejuni y Escherichia coli
mayoría de las cuales tienen una etiología O157 H7.
infecciosa e incluyen enfermedades bacterianas 11.8.3. Legionelosis.
(legionelosis, enfermedad de Lyme, 11.8.4. Gastritis por Helicobacter pylori.
campilobacteriosis, gastritis por Helicobacter pylori, 11.8.5. Síndrome de shock tóxico por
erlichiosis, diarrea por E. coli O157:H7), virales Staphylococcus aureus.
(HIV, ebola, SARS, hantivirus, virus de de las 11.8.6. Enfermedad de Lyme.
hepatitis B y C), parasitarias (criptosporidiosis,
ciclosporidiosis) y otras de difícil clasificación como 11.9. Enfermedades re-emergentes bacterianas:
las encefalopatías espongiformes. Muchas de estas 11.9.1.Cólera por V. cholerae O1
enfermedades son a menudo de origen zoonótico 11.9.2.Difteria por Corynebacterium
resultado de la transmisión a humanos de diphtheriae.
patógenos de otras especies animales. 11.9.3.Fascitis necrotizante por
Las “enfermedades re-emergentes” incluyen a Streptococcus pyogenes.
enfermedades anteriormente conocidas y 11.9.4.Leptospirosis por Leptospira
controladas o tratadas eficazmente y cuya 11.9.5.Peste por Francisella tularensis.
frecuencia y/o mortalidad se encuentra actualmente 11.9.6.Tuberculosis por M tuberculosis
en aumento. Estas enfermedades habían dejado de multiresistente.
considerarse un problema de salud pública y en los 11.9.7. Cólera por V. cholera O139
últimos años han sufrido un retorno alarmante.
Entre las enfermedades catalogadas como re- 11.10. Medidas empleadas para combatir esta
emergentes de etiología bacteriana están: diftéria, situación.
cólera, peste, tuberculosis multiresistente y
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GUIONES PRÁCTICOS
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Las siguientes consideraciones generales pueden 1. Limpie la superficie de su mesa con una
hacer menos riesgosas las actividades a realizar en solución germicida, al principio y al final de
el laboratorio: cada sesión de laboratorio.
2. Mantenga la mesa libre de todo lo que no sea
1. Cada persona que labore en el laboratorio, esencial y al final de la sesión déjela limpia y
debe ser informada acerca de la ubicación y la libre de material y equipo.
operación de cada uno de los equipos de 3. Ponga todo el material sólido en las
seguridad y de las instalaciones, tales como canastillas para este fin y el material de vidrio
extinguidores, duchas y lava ojos, los cuales en las gradillas.
deben ser fácilmente accesibles en el 4. Debido a que algunos de los microorganismos
laboratorio. con que se va a trabajar son patógenos en
2. Los equipos de protección personal, que potencia, es necesario desarrollar técnicas de
incluyen entre otros guantes y bata, deben ser asepsia al manejarlos y transferirlos.
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5. Evite el contacto de la boca con las manos, 6. Inunde con solución desinfectante cualquier
comer o humedecer las etiquetas con la lengua. área donde haya ocurrido un derrame de
6. Informe inmediatamente al instructor de sangre o suero. Utilice guantes, toallas de
cualquier accidente tal como cortaduras, papel o gasa para absorber el líquido, y luego
quemaduras o derrame de cultivos. realice un lavado minucioso con agua. Guarde
7. Tome todas las precauciones posibles para en una bolsa todo el material empleado
evitar estos accidentes. contaminado, para eliminarlo como material
infeccioso.
Precauciones sistemáticas de seguridad
Manipulación de desperdicios
Agujas y material de vidrio
1. Reserve algunas de las piletas del laboratorio
1. Desechar todo material de vidrio que esté para eliminar muestras de sangre y orina. No
quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes permitir el lavado de manos en estas piletas.
adecuados. 2. Eliminar en recipientes adecuados y rotulados:
2. Recoger los vidrios rotos con escobillón y pala; tubos con sangre, pipetas, puntas y agujas.
no hacerlo con la mano. 3. El material de vidrio o cortante debe ser
3. Los artículos de vidrio no deben ser arrojados a eliminado en recipientes adecuados de
la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de paredes sólidas.
desperdicios en el que se arrojan artículos de 4. Llevar estos recipientes al área de desecho
papel. con la frecuencia necesaria para evitar su
4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse acumulación.
en recipientes para agujas usadas para ser 5. Sumerja el material de vidrio contaminado en
eliminados de manera adecuada. solución desinfectante. Enjuague
5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o minuciosamente con agua y esterilícelo antes
intercambiar las agujas de las jeringas. La de usarlo otra vez.
práctica de cambiar las agujas antes de
descartar la sangre extraída de la vena dentro Desarrollo de la práctica
de la botella de cultivo ha sido abandonada por Sesión I
la mayoría de los hospitales. 1. El profesor definirá el concepto de
bioseguridad.
Manejo de muestras y derrames 2. Los alumnos, en grupos pequeños, revisarán
las normas a seguir en el laboratorio.
1. Las muestras se deben de recolectar en 3. El profesor dirigirá la discusión sobre:
recipientes sólidos, con cierres adecuados para a) Manipulación de agujas y material de
evitar derrames y pérdidas. Todas las vidrio.
muestras deben ser consideradas b) Manejo de muestras y derrames
potencialmente peligrosas. c) Manipulación de material infecto-
2. Las cortaduras en las manos deberán ser contagioso.
adecuadamente protegidas con tela adhesiva.
Si la actividad laboral implica el manejo de NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
sangre, suero, plasma u otras muestras, se están dirigidas al manejo adecuado de
debe de usar guantes desechables. productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
3. Si una muestra presenta evidencia de rotura, Tóxico, Inflamables, Biológicos-infecciosos
derrame o suciedad dentro del recipiente, (CRETIB) y Radioactivos con el fin de
ponerse guantes. evitar riesgos.
4. Las muestras contaminadas con sangre deben
ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes.
Notificar este hecho como peligroso para la
salud.
5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y
jabón varias veces al día, en particular después
de manipular las muestras y antes de retirarse.
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PRÁCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
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Método
1. El profesor explicará la diferencia entre una
preparación en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X
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PRÁCTICA No. 3
INTRODUCCIÓN A LA BACTERIOLOGÍA
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia en el estudio de se tomará exudado faríngeo, nasal o muestras
la Bacteriología clínica. obtenidas por lavado bronquial o esputo.
Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio En enfermos del tracto gastrointestinal, se
de bacteriología para la realización de tinciones y tomará materia fecal o bien muestras con hisopo
cultivos bacteriológicos, empleados en la estéril por vía rectal o directamente utilizando
identificación de una bacteria. rectosigmoidoscopía. En casos de infecciones
de vías urinarias, la muestra es la orina
Explicar la importancia que tiene el laboratorio de recolectada en condiciones de esterilidad y, en
bacteriología clínica, en la determinación del infecciones localizadas, como es el caso de
diagnóstico etiológico correcto para establecer la pústulas, forúnculos, fístulas, otitis, lesiones
terapia antimicrobiana específica. oculares, etc., el producto a tomar será el
exudado de esas lesiones.
Antecedentes En caso necesario, se empleará un medio de
El cuerpo humano se encuentra formado por 1014 transporte que permitirá sobrevivir a la bacteria
células. De las que solo, aproximadamente, el 10% antes de ser sembrada en un medio de cultivo.
son humanas. El resto son microorganismos
asociados. Desde el momento de su nacimiento, el B). Aislamiento: Proceso necesario para identificar
individuo establece una relación con al microorganismo. Para lo cual, se emplean
microorganismos del ambiente que formarán la diferentes medios de cultivo, que
microbiota. Dependiendo del sitio del cuerpo será el proporcionarán los requerimientos nutritivos
tipo de microorganismo que lo colonice. La necesarios (carbono, nitrógeno, electrolitos,
microbiota es benéfica para el humano, salvo en el agua y, en algunos casos, sustancias de
momento en que se presente algún factor de enriquecimiento como es la sangre) para el
oportunismo que favorezca el crecimiento inusual crecimiento y reproducción de la bacteria.
de los microorganismos y produzca daño. Por lo Atendiendo a su estado físico, los medios de
tanto, en la mayoría de los casos, esta interacción cultivo pueden ser líquidos, semisólidos y
es benéfica. sólidos. Los sólidos son empleados en el
El conocimiento de la microbiota permite diferenciar aislamiento y caracterización de la morfología
los microorganismos patógenos de los no colonial del microorganismo.
patógenos. Por otro lado, debido a que se han De acuerdo con su utilidad práctica, pueden ser
incrementado los factores de oportunismo que selectivos, no selectivos, enriquecidos y para
favorecen las patologías por estos aislamiento especializado. Los selectivos son
microorganismos, las infecciones que producen aquellos que promueven el desarrollo de ciertas
representan, en la actualidad, un problema de bacterias, inhibiendo otras. En tanto que los no
diagnóstico. selectivos están libres de inhibidores lo cual,
En el estudio bacteriológico de un caso clínico, se permiten el desarrollo de una gran cantidad de
sigue la secuencia siguiente: bacterias.
Entre los empleados para la identificación se
A). Toma de productos: Es importante el cuenta con los medios diferenciales.
conocimiento del sitio de donde se tomará la Métodos de aislamiento y observación de la
muestra. A las bacterias se les puede aislar morfología colonial.
prácticamente de cualquier sitio (piel, mucosas y La técnica de aislamiento más frecuentemente
secreciones), sin que estén produciendo usada es por estrías en medio de cultivo sólido
procesos patológicos. En otras ocasiones, se en placa de petri. Con este procedimiento se
presenta la necesidad de aislar bacterias a partir logra obtener un cultivo puro. Es decir, se logra
de tejidos lesionados o productos patológicos. separar un tipo de bacteria de otras presentes
En el caso de infecciones de vías respiratorias, en la misma muestra clínica. También se cuenta
con el método de dilución con asa calibrada
(cultivo de orina) o la de medición con pipeta
graduada.
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Resumen de la práctica:
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PRÁCTICA No. 4
CULTIVO DE MICROBIOTA BACTERIANA DE PIEL
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Sin lavar
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PRACTICA No.5
INFECCIONES DE VÍAS RESPIRATORIAS
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Método
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PRÁCTICA No.6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
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MIO (Agar hierro ornitina). Prueba que permite Preguntas orientadas para evaluar el
detectar la movilidad del microorganismo, conocimiento adquirido
producción de indol y descarboxilación de ornitina.
La fermentación de la dextrosa hace que el medio 1. ¿Cuál fue el agente etiológico en el caso clínico
vire a un color amarillo. revisado?
La descarboxilación de la ornitina alcaliniza el 2. ¿Qué estudios se usaron para confirmar el
medio dando un vire a color púrpura. diagnóstico clínico del caso revisado?
La producción de indol a partir del triptófano se 3. ¿Qué utilidad tienen las pruebas bioquímicas
manifiesta al agregar el reactivo de Kovac o de en la identificación del agente etiológico en el
Erlich. caso clínico revisado?
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PRÁCTICA No. 7
INFECCIONES DE VÍAS URINARIAS
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
Los criterios de Kass establecen lo siguiente: Se realiza preparando diluciones 1:10, 1:100 y
1:1000 a partir de la muestra, empleándose SSI
No de UFC/ ml INTERPRETACIÓN estéril como diluyente, y, posteriormente, se coloca
≥ 100 000 Infección activa 1 ml de la última dilución en una o mas cajas Petri
÷ 10 000 y 100,000 Dudosa* estériles, a las que después se le vierten 20 ml de
≤ 1000 Contaminación de la los medios seleccionados cuando estos se han
muestra esterilizado y se encuentran a una temperatura de
*Debe analizarse otra muestra del paciente. 45 o 50º C.
Las cajas se mezclan, de manera que la alícuota se
distribuya uniformemente; finalmente, se permite
Considerar que los medios solidifiquen y la placa se incuba a
Los falsos negativos pueden obtenerse cuando 35º C en aerobiosis, durante 24 a 48 h.
a) El paciente se encuentra bajo tratamiento El procedimiento y la interpretación de resultados
antimicrobiano poco antes o durante la son similares al descrito para el método del asa
recolección de la muestra: calibrada. Considerando en este caso, la posibilidad
b) El microorganismo causante del cuadro es de falsos negativos cuando los medios se vierten a
incapaz de desarrollarse en los medios temperaturas mayores a las señaladas, y la de
utilizados o bajo las condiciones de incubación falsos positivos cuando las diluciones se preparan
que se seleccionaron con una misma pipeta o sin condiciones asépticas.
c) La muestra analizada no fue la primera de la
mañana Consideraciones especiales
d) El depósito en el que se recoge el espécimen 1. No cultivar lo siguiente:
contiene restos de detergente o desinfectante a) Puntas de catéter de Foley
e) El enfermo se encontraba recibiendo líquidos b) Orina en medio líquido
intravenosos
f) La calidad y/o la preparación de los medios no c) Sedimento de orina
es la adecuada 2. El criterio de ≥ 105 UFC/ml puede ser aplicado
g) El asa calibrada recoge volúmenes menores a a la mayoría de las muestras remitidas para
los esperados cultivo
h) La muestra no se homogenizó antes 3. Las cuentas de colonias ≤ o igual a 105 UFC en
de introducir el asa muestras emitidas espontáneamente con
i) La alícuota descargada en la superficie del
disuria y síntomas de infección del tracto
medio no se distribuyó adecuadamente.
urinario puede ser importante y debe ser
Los falsos positivos pueden ocurrir cuando valorado por el clínico.
a) El paciente no efectúa la limpieza previa en 4. Realizar cultivos en anaerobiosis solo en
forma adecuada aspirados por punción suprapúbica cuando
b) El espécimen se siembra después de haber sean requeridos
permanecido dos horas o más a temperatura
ambiente Desarrollo de la práctica:
c) El depósito en el que se recoge la muestra se Sesión I
encuentra contaminado 1. El profesor del laboratorio conjuntamente con
d) El asa calibrada recoge mayores cantidades los alumnos revisarán un caso clínico de
que las esperadas infecciones bacterianas de vías urinarias e
e) La paciente suspendió la micción para identificarán:
recolectar la parte media a) Datos relevantes del caso.
f) El catéter se encontraba contaminado b) Posibles diagnósticos clínicos.
c) Productos biológicos a utilizar.
Procedimientos de medio mínimo d) Exámenes de laboratorio a útiles para
confirmar el diagnóstico clínico.
Método de las diluciones 2. Realizarán un urocultivo.
Este se considera más confiable que el del asa
calibrada,
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
Método
Los alumnos:
1. Observarán macroscópicamente los cultivos
(morfología colonial) y diferenciarán las
colonias.
2. Contarán el número de colonias que se
desarrollaron en las placas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el número de bacterias es ≥ 100 000
UFC/mL, se procederá a identificar él o los
microorganismos por los métodos usuales.
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
PRÁCTICA No.8
INFECCIONES SISTÉMICAS
El SNC puede ser infectado por diferentes micro El diagnostico rápido y la aplicación temprana del
organismos, entre los que se encuentran bacterias tratamiento con el antibiótico especifico, son pasos
consideradas potencialmente patógenas como es el esenciales para prevenir las complicaciones del
caso de Streptococcus pneumoniae, Haemophilus padecimiento, como son las secuelas neurológicas
influenzae, Neisseria meningitidis y Mycobacterium que pueden presentarse sobre todo en un número
tuberculosis y aquellas pertenecientes a la apreciable de lactantes y niños. Sin embargo, pese
microbiota transitoria o permanente. La a la existencia de tratamiento efectivo el índice de
participación de estas va a depender de la edad, letalidad por meningitis bacteriana puede llegar al
estado inmunológico e integridad anatómica del 15% aproximadamente.
SNC del paciente. Entre los cuadros clínicos
ocasionados se encuentran; meningitis aguda, Desarrollo de la práctica
crónica (tuberculosa, brucelosis) absceso cerebral, Sesión I
infarto cerebral embolico por endocarditis 1. El profesor de laboratorio conjuntamente con
bacteriana y empiema subdural. los alumnos revisarán un caso clínico de SNC e
El examen de líquido cefaloraquidio (LCR) es identificará:
importante y fundamental en la valoración del a) Datos relevantes del caso.
paciente con una infección del SNC. Por lo cual se b) Posibles diagnósticos clínicos.
requiere de la realización de una punción raquídea c) Productos biológicos a utilizar para el
técnicamente correcta y de un estudio meticuloso diagnóstico de laboratorio.
del producto. Su análisis incluye, la determinación d) Exámenes de laboratorio útiles para
de la presión de apertura, aspecto, recuento celular confirmar el diagnóstico clínico.
y diferencial, glucosa y proteínas. Así como la 2. Realizara un cultivo de LCR.
demostración directa de patógenos a través de la
microscopia y el empleo de tinción de Gram y/o Material
Ziehl Neelsen. La detención de antígenos 1. Muestra de LCR
bacterianos se realiza con el objeto de identificar al 2. Placas de agar chocolate y agar Mac Conkey
microorganismo sin tener que esperar a su 3. Equipo para tinción de Gram
aislamiento mediante el cultivo, el cual se debe 4. Asa bacteriológica
realizar con el empleo de medios de rutina para el
aislamiento de bacterias y confirmar el diagnóstico Metodología
etiológico. 1. Los alumnos: describirán las características
macroscópicas del LCR proporcionado
La meningitis purulenta es una enfermedad 2. Sembrara la muestra en los medios de cultivo
infecciosa aguda y mortal, causada por bacterias 3. Realizaran frote y tinción de Gram a partir de la
invasoras que provocan una respuesta inflamatoria muestra.
en las meninges. La incidencia en la meningitis 4. Observaran al microscopio el frote realizado.
varia en relación inversa a la edad, y con la
frecuencia relativa de las especies de micro
organismos causantes de la enfermedad.
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
1. Placas de medio de cultivo demostrativas y 1. ¿Qué utilidad tienen las pruebas rápidas en el
las sembradas por los alumnos. diagnóstico de enfermedades de etiología
2. Pruebas bioquímicas demostrativas. bacteriana?
3. Equipo para tinción de Gram. 2. ¿Qué estudios se usan para llegar al
4. Asas bacteriológicas diagnostico de meningo encefalitis?
3. ¿Qué métodos directos se pueden emplear
para el diagnostico de origen bacteriano en el
Metodología laboratorio?
Los Alumnos:
1. Describirán la morfología colonial. Resumen de la práctica:
2. Comparara su aislado con las placas de
demostración. El profesor junto con los alumnos correlacionarán el
3. Leerán las pruebas bioquímicas demostrativas caso clínico con el diagnóstico de laboratorio y
4. Realizaran frote y tinción de Gram a partir de elaborará un esquema gráfico.
los aislados.
5. Identificaran la especie bacteriana aislada
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2018-2019
ANEXO
DETERMINACIÓN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
Objetivos
Identificar el efecto antibacteriano de los fármacos en 1. Difusión en disco: procedimiento simple que
un cultivo de bacterias. emplea agar Müeller-Hinton, medio que permite el
Demostrar la utilidad de la prueba de sensibilidad crecimiento de la mayoría de los microorganismos
antimicrobiana por difusión en disco. para los cuales estas pruebas son relevantes. Está
Identificar la utilidad de las pruebas de sensibilidad a técnica es cualitativa, reproducible, económica, no
los antimicrobianos en la clínica. requiere de equipo especial y está estandarizada
para probar bacterias de crecimiento rápido.
Antecedentes Determina sensibilidad, sensibilidad intermedia y
La quimioterapia antimicrobiana ha desempeñado un resistencia empleando un disco de papel filtro
papel vital en el tratamiento de las enfermedades impregnado con un antimicrobiano seleccionado
infecciosas durante el siglo XX. Desde el que se difunde a través del medio.
descubrimiento de la penicilina, cientos de agentes
antimicrobianos han sido obtenidos a partir de Para efectuarla se inocula una placa de agar con el
microorganismos o por síntesis. El uso de estas microorganismo problema, a la que se le depositan
sustancias ha permitido la selección de variantes discos secos de papel filtro que contienen los
resistentes a los mismos. agentes antimicrobianos. Los discos adsorben
Existen dos mecanismos principales por los cuales los agua del medio, la droga se disuelve y difunde
microorganismos cambian su sensibilidad hacia los hacia el medio adyacente siguiendo las leyes
antimicrobianos y otras drogas utilizadas en la práctica físicas que gobiernan la difusión de las moléculas
médica: la mutación e intercambio genético a través de agar. El resultado es un gradiente de
(conjugación, transformación o transducción). La concentración de la droga alrededor del disco. Las
resistencia a los antimicrobianos se manifiesta como células bacterianas que no son inhibidas por el
decremento de la permeabilidad al medicamento, agente antibacteriano, serán capaces de crecer en
modificación de su receptor, inactivación enzimática de toda la zona alrededor del disco, mientras que en
la droga, alteración del blanco del antimicrobiano, las bacterias sensibles a la droga, no se observará
etcétera. crecimiento en el área donde las concentraciones
inhibitorias de la doga estén presentes. La zona de
Las pruebas in vitro de sensibilidad antimicrobiana inhibición es afectada por la velocidad de difusión
están indicadas para determinar los fármacos de de las diferentes drogas a través del agar, por lo
elección en infecciones producidas por que las zonas observadas con una droga no
microorganismos cuya sensibilidad es impredecible o pueden ser comparadas con las de otra droga. Sin
en infecciones que no responden al tratamiento embargo, el diámetro de la zona de inhibición es
inicialmente elegido, infecciones intrahospitalarias, inversamente proporcional al MIC.
infecciones crónicas o cuadros clínicos de repetición; y
para seleccionar el antimicrobiano más adecuado en Algunas de las limitaciones de este procedimiento
pacientes con problemas específicos como edad, son:
hipersensibilidad, etc. Algunos microorganismos que a) El método está estandarizado sólo para
con frecuencia desarrollan resistencia a los microorganismos aerobios de crecimiento
antimicrobianos son: Staphylococcus aureus, rápido incluyendo Enterococcus sp.,
Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Staphylococcus sp. Pseudomonas aeruginosa,
Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y Acinetobacter sp., algunos Streptococcus y
Proteus sp. Listeria monocytogenes y con algunas
No está indicado solicitar pruebas de sensibilidad a modificaciones ha sido utilizado para
antimicrobianos cuando no se ha reportado resistencia microorganismos exigentes como
al agente de elección o está se ha reportado sólo Haemophilus sp., Neisseria sp. y
raramente. Streptococcus pneumoniae.
Algunas de las pruebas de sensibilidad antimicrobiana b) Organismos de crecimiento lento, anaerobios
realizadas en los laboratorios clínicos son las obligados y aquellos que requieren CO2 para
siguientes: su crecimiento no dan resultados confiables al
ser probados por este método por lo que se
recomiendan métodos de dilución.
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Primer día
Incubar a 37 ºC x 24 horas
Segundo día
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