ESCUDERÍA “ATP”

Numero de teórica: 83
Materia: Microbiología
Fecha: 14 de noviembre de 2018
Tema: IDENTIFICACIÓN BACTERIOLÓGICA
DE BACILOS NO FERMENTADORES
Docente: Dra. Ode
Encargado de transcripción: Nayeli Apaza
Encargado de revisión: Daniel Calderon

Se hablará de dos géneros que son Stenotrophomonas y Burkholderia que son bacterias
que desde hace 6 años ya se han visto con nosotros.

STENOTROPHOMONAS- Ahora vamos a ver la parte general, se

encuentra como identificación bacteriológica
BURKHOLDERIA
 de bacilos no fermentadores porque de
tendrían las mismas carácteristicas que
pseudomonas y eritrobacter, ahora segun la
imagen del microscopio podría ser desde una
E coli hasta el grupo de bacilos gram
negativos no fermentadores cómo son
pseudomonas o eritrobacter y los géneros de
stenotrophomonas maltophilia y
burkhordelia que son los géneros que vamos
a ver el día de hoy.
Entonces generalmente se caracterizan por ser bacilos GRAM negativos pequeños
alargados no forman esporas y se llaman no fermentadores porque no fermentan
azúcares, no solamente no fermentan lactosa, estos en general no fermentan azúcares

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 ¿QUE ES UN “NO FERMENTADOR”?

Estas son vías metabólicas, para que una bacteria obtenga energía a partir de hidratos de
carbono y glucosa entonces tiene que existir una degradación de los hidratos de carbono
y glucosa para que las bacterias obtengan su energía, en esta degradación existen varias
vías metabólicas.
Aquí les presento las más mencionadas que son ENTNER-DOUDOROFF y EMBDEN-
MEYERHOF.
 La diferencia en la VIA EMBDEN-MEYERHOF, también llamada vía glucolítica, vía
fermentativa o vía anaerobia, es que las bacterias degradan el azúcar y la glucosa
sin necesidad de oxígeno por lo cual es usado por las bacterias anaerobias y
también por las bacterias anaerobias facultativas
¿Qué es lo que sucede en esta vía? Se va degradando la glucosa sin necesidad
de oxígeno hasta llegar a Ácido pirúvico además de las moléculas de ATP que se
forman en este proceso el cual se realiza sin necesidad de oxígeno.

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 La VÍA ENTNER-DOUDOROFF, también llamada vía oxidativa, no fermentativa o

vía aerobia en esta ruta la glucosa es degradada con la ayuda de oxígeno es decir
hay moléculas de oxígeno que participan en esta vía metabólica incluso van a
oxidar la glucosa antes de la formación del ácido pirúvico por eso se llama también
vía oxidativa, entonces ese oxígeno qué va a participar en esta vía se va a unir a las
moléculas de hidrógeno en el ciclo de Krebs para formar moléculas de agua y todo
esto también está desprendiendo moléculas de ATP lo por lo que obtiene más
energía donde también existe la formación de ácido pirúvico al final, las bacterias
que estamos viendo son bacterias no fermentadoras por lo cual utilizan una vía
oxidativa y por lo tanto estás bacterias son aerobias.

STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA
STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA
 Bacilo Gram negativo, fino
 Flagelo polar
 Aerobio
 metabolismo oxidativo
 poco exigente
 baja patogenicidad
 hábitat natural: ambiente acuático
 patología nosocomial
 alta resistencia a los antimicrobianos

La Stenotrophomona es un bacilo alargado delgado y corto, qué tiene un flagelo en un

solo polo, eso significa que se mueve, es importante esa característica de esta bacteria
porque nos ayuda a diferenciar las bacterias, para saber si es una Trophomona o una
Stenotrophomona lo cual es mucho más complicado por lo que ambas se mueven y
ambas tienen las mismas características, es más las Stenotrophomonas inicialmente eran
Trophomonas maltophilia después pasó al género Santomonas maltophilias y finalmente
Maltophilia la cual es la última identificación taxonómica donde está el género de
Stenotrophomonas.
Entonces es un bacilo Gram negativo, es un bacilo polar y recuerden que todas estas
son aerobias y tienen un metabolismo oxidativo en común, ahora está bacteria es poco
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exigente y tiene una baja patogenicidad eso significa que si nosotros estamos en
contacto con esta bacteria puede ser que no nos suceda absolutamente nada, es una
bacteria oportunista, poco exigente quiere decir que puede crecer en un tipo de cultivo
que no sea muy enriquecidos y de baja patogenicidad porque no necesita hacer grandes
cosas para causar daño.
¿En quiénes causa daño? En personas que son inmunocomprometidas o tienen algún
factor de riesgo.
Su ambiente natural es el ambiente acuático, esta bacteria vive en el hospital, un
ambiente acuático en el hospital pueden ser los respiradores, los tubos corrugados que
conectan la máscara, la máquina de respiración en las salas de terapia intensiva, las
incubadoras donde tiene que ver humedad para el bebé o en las salas de hidromasaje
que forman parte de fisioterapia, ya que no hay una buena desinfección y mantenimiento
de sus ambientes, siempre produce una patología nosocomial, no existe un
Stenotrophomona que se contagiara en la comunidad, si o si se adquiere en el hospital y
¿porque nos interesa que ustedes conozcan esta bacteria? Porque tiene una altísima
resistencia a los antimicrobianos.
STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA
 Crece Mac Conkey
 Móvil
 Oxidasa negativa
 Prueba DNAsa positiva, clave para su
identificación
 Oxida la glucosa y maltosa en medio OF

Este es un medio Mac Conkey, aquí podemos ver que es lactosa negativa, lo primero que
hacemos es ponerle un medio de cultivo y después hacer las pruebas, fácilmente se podría
confundir con Shiggela que es lactosa negativa, pero a diferencia de otros no
fermentadores esta bacteria si crece en Mac Conkey, se mueve debido a que tiene un
flagelo polar, la prueba de la oxidasa es importante ya que sirve para diferenciar de las
enterobacterias qué son oxidasa negativa de los no fermentadores que son oxidasa
positiva. son muchas cosas que nos ayudan a realizar el diagnóstico diferencial, se hace

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una prueba de DNAasa para su confirmación que es clave y el medio OF qué es un medio
específico para hacer su diagnóstico.
Tambien se ve resistencia
STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA
animicrobiana ya que es una
 Patógenos resistentes
bacteria resistente naturalmente, si
 Bacteria
hablamos del aislamiento de la
 Endocarditis
Trophomona se tienen que
 Sistema respiratorio
descartar muchos antibióticos y no
 Sistema nervioso central
tenemos que esperar el cultivo o el
 Tracto urinario
antibiograma, producen reacciones
que se dan en el hospital.
¿Por dónde puede ingresar la bacteria al paciente? Por los respiradores, cuando ingresa
por vía respiratoria lo primero que va a producir es neumonía, de esta neumonía puede
irse al torrente sanguíneo y causar septicemia. Si el punto de entrada no fuera infeccioso
y fuera un catéter por mala manipulación del personal de salud también puede producir
septicemia, pero tiene un lugar donde al agente le gusta estar que es el corazón donde
produce bacteremia endocarditis, en el sistema respiratorio produce neumonía
intrahospitalaria, meningitis, cómo produce bacteremia y septicemia podría ingresar al
líquido cefalorraquídeo, pero en los casos vistos los más frecuentes son a nivel
respiratorio, en segundo lugar en la sangre y en la tercera frecuencia es el ingreso por la
vía urinaria en esos pacientes que están en terapia intensiva con sonda vesical durante
mucho tiempo con una estancia prolongada además con una mala manipulación y
contando con que la bacteria vive ahí puede ingresar a la vía urinaria, una cosa importante
a esta bacteria le gusta vivir en los desinfectantes, por lo cual es resistente a muchos
desinfectantes y puede ingresar por heridas por ejemplo las heridas operatorias ya que
se encuentró desinfectantes antisépticos que no fueron conservados de manera
adecuada.

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¿Cuáles son los factores de riesgo para que

FACTORES DE RIESGO una persona pueda adquirir?
 Malignidad Particularmente la hospitalización prolongada
 Neutropenia es uno de los factores más importantes,
 Uso prolongado de antibióticos pacientes que han recibido muchos ciclos de
de amplio espectro antibiótico lo que generalmente sucede en
 Hospitalización prolongada pacientes de terapia intensiva, uso de
antibióticos de amplio espectro, neutropenia
(disminución de neutrófilos) lo que nos importa más ya que va en la primera línea de
defensa, en pacientes que tienen algún tipo de cáncer, VIH porque baja las defensas,
diabetes también, pero estos vienen después.
¿Dónde se puede aislar la bacteria de
HÁBITAT EXTERNO E INTERNO
todos estos lugares?
 Aislamiento
La bacteria está dentro de la unidad de
 Catéter venoso central/ arterial
terapia intensiva si el paciente está
 Monitores/ máquinas de diálisis
cateterizado todos los elementos externos
 Soluciones desinfectantes
son posibles contaminantes, catéter venoso
 Desionizadores/ nebulizadores
central, catéter vesical son los más
 Sistemas de ventilación
importantes, una sonda nasogástrica no es
 Material protésico
tan riesgosa porque afecta la zona donde ya
 Mano del personal de salud
existe un foco de defensa.
Las máquinas, desde el monitor de la presion y los signos vitales de paciente o la máquina
de ventilación pero también pueden haber en máquinas de hemodiálisis en pacientes
que están hospitalizados, además que la máquina se lleva al área de terapia intensiva a
realizar en los pacientes, son un factor de riesgo, en sí cualquier máquina que sea
reservorio de agua, entre los sistemas ventilación también se incluyen los de ventilación
del hospital porque tienen que tener cierto grado de sequedad pero algunos son
humedos, entonces ahí viven las Stenotrophomonas tranquilamente, en material
protésico pero esto depende mucho de la manipulación, todos eso son factores que
constituyen a tener la infección y principalmente las manos del personal de salud.

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Los factores de patogenicidad son muchos pero no

FACTORES DE PATOGENICIDAD
son muy importantes, la DNAsa y la RNAsa son
 RNA asa
enzimas que técnicamente rompen el DNA y el RNA
 DNA asa
eso lo hacen una vez que invaden la célula pero no
 Fibrinolisina
pueden invadir ningún lugar si no existieran
 Lipasas
las fibrolisinas, las lipasas, hialuronidasa y las
 Hialuronidasas
proteasas de esta forma pueden abrir espacio para
 Proteasas
poder ingresar, por ejemplo si estamos en vía
 Elastasas
respiratoria nuestra bacteria ingresa y el sistema
inmunologico automáticamente intenta expulsarla, esta bacteria lo que hace es no utilizar
la fagocitosis como protección, si llega una célula nuestra y la fagocita la bacteria se muere
por eso es que en pacientes inmunocomprometidos esta bacteria puede ingresar
fácilmente, puede romper membranas tejido conectivo puede invadir hasta llegar a
células o lugares estériles hasta el torrente sanguíneo gracias a esta pectina, pero después
para protegerse no tiene nada por eso si la persona es inmunocompetente la bacteria no
logrará romper ninguna barrera.
¿Qué tipo de
MECANISMOS DE RESISTENCIA
mecanismos de
Desarrollo de mecanismos de resistencia efectivos
resistencia tiene esta
(ejem. bombas de flujo, betalactamasas, modificación de
bacteria?
ligandos de membrana externa).
Esta bacteria productora
de betalactamasas
puede producir
alteración en la
permeabilidad de la
membrana y puede
generar bombas de
eflujo cómo principales
mecanismos de
resistencia.

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Este es el estudio que se

RESISTENCIA INTRÍNSECA
hizo para comparar
antibióticos y se utilizado
una cefalosporina de
primera generación,
Carbapenemicos,
cloroquinolona y se utilizó
cotrimoxazol lo
importante es que esta
bacteria de nacimiento es
resistente a los
carbapenémicos.

¿Qué es lo que pasa con un

RESISTENCIA
paciente que entra a terapia
 Genéticamente resistente: R. intrínseca:
intensiva?
 Betalactamicos: B-asas plasmidicas,
Directamente se le da IMIPENEM
permeabilidad y bombas de eflujo
pensando que está con una
 Aminoglucósidos: enzimas inactivantes y
bacteria resistente a todos los
bombas de eflujo
demás antibióticos pero
 SXT y fluoroquinolonas: activas in vitro,
seleccionan mutantes
Stenotrophomona es resistente a
esta así que no le causa ningún
 Se debe asociar ticarcilina/ Clav
daño además que son pacientes
que han recibido Carbapenémicos durante mucho tiempo los que generalmente pueden
ser infectadas por Stenotrophomona aparte de que tienen resistencia intrínseca a casi
todos los betalactámicos, también tiene resistencia intrínseca al grupo de las penicilinas,
al grupo de cefalosporinas, a las penicilinas por inhibidores de betalactamasas, también
tiene resistencia a los monolactamicos, estamos hablando de toda la familia de
Betalactamicos, gracias a las betalactamasas plasmídicas también hay unas bombas de
flujo que nos van a ayudar a expulsar, se puede ver que hay un poco de sensibilidad a las
cefalosporinas de tercera generación eso termina de ser resistente gracias a la alteración
de la permeabilidad de la membrana y a las bombas de flujo, tiene resistencia intrínseca

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a los aminoglucósidos, es sensible a cotrimoxazol y ciclofloxacina, si realizamos un

antibiograma pueden ser sensibles in vitro pero para que sean sensibles al paciente la
recomendación es combinarlas con otro antibiótico. Hemos utilizado hiperacilina-
tazobactam es un Beta lactámico con un inhibidor de betalactamasa + cotrimoxazol
endovenoso o más ciclofroxacino para un Stenotrophomona.

Entonces en el antibiograma la CLSI

METODOLOGÍA
recomienda hacer antibiograma
 Hospital de Turquía
solamente utilizando cuatro discos
 550 camas_ 2.5 millones de personas
incluso dice que se podría colocar 5
 118 cepas aisladas de diferentes
discos pero solamente para un
especímenes (enero 2006- junio 2012)
estudio interno no hay que
 Se cultivaron en Agar sangre y EMB
informarle al paciente, entonces se
 Sistemas automatizados para identificar:
coloca una cefalosporina de tercera
 BacT/ alert 3D
generación que no es cualquier
 BD Phoenix
cefalosporina es la CEFTAZIDIMA,
 Antibiograma CLSI
no podemos utilizar otra
 Ceftazidima
cefalosporina de tercera generación
 SXT
está cefalosporina es dirigida a
 Cloranfenicol
matar Pseudomonas pero existieron
 Levofloxacina
buenos resultados con
Stenotrophomonas, ceftazidima cotrimoxazol cloranfenicol y levofloxacina que es una
fluoroquinolona, prima hermana de la ciprofloxacina pero se prefiere esta porque es
una fluoroquinolona pulmonar, se mandó hacer el antibiograma sólo con estos 4 discos
además se puede sacar la concentración inhibitoria mínima pero si no se tiene resultado
de primera línea se recomienda levofloxacina pero si tenemos el antibiograma fácilmente
podemos utilizar cualquiera de los 4 menos el cotrimoxazol que sí o sí tiene que ser
asociado a otro antibiótico.

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BURKHOLDERIA CEPACIA

Complejo denominado BURKHOLDERIA CARACTERISTICAS

CEPACIA compuesto por al menos 9  Oxidasa positiva
diferentes especies de bacilos Gram  Móviles por un flagelo polar único
negativos no fermentadores asociados a  Metabolismo aerobio
infecciones graves en pacientes con  De crecimiento lento
fibrosis quística e inmunodeprimidos.  Catalasa positiva

Burkhordelia es un género que antes también pertenecían a Trophomonas después de

los estudios de DNA de la bacteria ahora es un grupo Burkhordelia cepacia entre las
características es un bacilo Gram negativo es un no fermentador ósea que tiene un
metabolismo aerobio es oxidativo y a diferencia Stenotrophomonas.
¿A qué pacientes va elegir Burkhordelia?
A pacientes con fibrosis quística que es una enfermedad pulmonar degenerativa
progresiva que tiene mal diagnóstico de vida que quiere decir que mueren a una edad
mediana y tienen una vida respiratoria lamentable a esas pacientes ataca el género
Burkhordelia a diferencia de la Stenotrophomonas la fibrosis quística siempre tiene
Burkhordelia.
También tiene movimiento al igual que le Stenotrophomonas su metabolismo aerobio es
oxidasa positiva de crecimiento lento, si eso no lo sabe el laboratorio generalmente
desecha la caja en 24 horas, pero con Burkhordelia podemos esperar hasta 3 días,
entonces podemos estar con muchas burkhordelias cerca pero no lo aísla el laboratorio
a menos de que se lo pida.
RESISTENCIA
RESISTENCIA En relación a la resistencia
 Natural: Beta- lactámicos mediada por B-asas tienen una resistencia natural a
constitutivas o inducibles impermeabilidad de Beta lactámicos mediados por
la membrana. betalactamasas constitutivas
 Metalob-asa que hidroliza imipenem qué significa que la bacteria, las
 Aminoglucósidos, colistin, tetraciclina tiene en su estructura, o
 Tto.- SXT, meropenem ciprofloxacina betalactamasas inducibles que
significa que si nosotros le

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damos por ejemplo IMIPENEM esta bacteria va a formar Resistencia a imipenem o va a

formar resistencia a las cefalosporinas o sea se está induciendo a otro antibiótico.
Alteración de la permeabilidad de la membrana y especialmente tiene una Beta lactamasa
que está enfocada al imipenem, no a todos los carbapenemes, entonces con esta bacteria
podemos utilizar otro carbapenémicos como el meropenem.
Entonces está metalobetalactamasa está dirigida, el imipenem lo rompe, pero no al
meropenem entonces lo podemos utilizar como tratamiento aminoglucósidos colistin, un
fármaco que se utiliza en pacientes que tienen bacterias con resistencia a básicamente
todo incluyendo carbapenem, entonces entre las alternativas que tenemos son el
cotrimoxazol que es considerado como el peor es nada pero que actualmente está
reaccionando, la ciclofloxacina y el meropenem.

SOSPECHA DE UN NO FERMENTADOR Cómo sabemos si es un

no fermentador o es una
entero bacteria, se realiza
una tinción Gram,
cuando es un bacilo
Gram negativo, y a todos
los bacilos Gram
negativos se hace la
bacteria de diagnóstico y
todos los fermentadores
son enterobacterias qué son todas las Pruebas bioquímicas que ustedes han visto tanto
en teoría como en práctica.

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FLUJOGRAMA
FLUJOGRAMA DIAGNOSTICO INICIAL
DIAGNOSTICO INICIAL
Aquí estamos jalando una línea
de el TSI donde podemos ver la
fermentación de tres azúcares en
la prueba de Petri que es la que
nos interesa para ver si es un
fermentador o un no
fermentador de los 5 grupos , las
enterobacterias pueden
fermentar los 3: glucosa sacarosa
y lactosa o los que no fermentan
lactosa por ejemplo van a hacer
amarillo rojo o sea van a
fermentar sólo la mitad estás
bacterias que estamos viendo o
sea las no fermentadoras mantienen el color rojo o sea no fermentan absolutamente nada
ninguna enterobacteria reacciona de esa forma, entonces viendo nuestro tubito rojo ya
sabemos que estamos frente a un no fermentador, ausencia de fermentación de todos los
azúcares, la oxidasa nos ayuda pero es dudosa sí es oxidasa positiva definitivamente no
es enterobacteria pero si es oxidasa negativa tenemos que continuar con los exámenes.
Crecimiento en Mac Conkey también es dudoso porque ya sabemos que existen no
fermentadores que crecen es Mac Conkey como las Stenotrophomona.
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS
Está es una prueba que nos sirve
para confirmar el diagnóstico, esta
es una prueba en la que se utiliza un
medio de cultivo, pero en realidad
es un medio que se utiliza para
realizar pruebas bioquímicas que se
llama OF porque es OXIDACIÓN
FERMENTACIÓN estos tubos de

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ensayo tienen el medio que es de color verde y nosotros le ponemos la bacteria y a uno
de los dos lo sellamos con bacterinas para quitarle el oxígeno, aquí han crecido con
oxígeno y sin oxígeno entonces puede ser una enterobacteria en cambio en otro tubo ha
crecido con oxígeno pero una vez que se le quitó el oxígeno no creció por lo tanto es que
es una bacteria aerobia y que no crece sin oxígeno, ese es el patrón que nos tiene que dar
una bacteria no fermentadora ahora con estos tubos se puede ser para los azúcares que
queramos: OF para glucosa, OF para sacarosa, OF lactosa maltosa. Tenemos una larga
lista de azúcares qué tenemos que probar para ver género y especie de las bacterias el
último que no creció con oxígeno ni sin oxígeno significa que es un asacarolÍtico al cual
no le sirve para nada los azúcares.
STENOTROPHOMONAS- BURKHOLDERIA
PRUEBA STENOTROPHOMONAS BURKHOLDERIA
OXIDASA - +
GLUCOSA OF A A
MALTOSA OF A A
MANITOL OF - A
LISINA + V
DNAasa + -
POLIMIXINA B S R
PIGMENTO VERDE AMARILLENTO

Este es un cuadro que nos puede ayudar con todos los no fermentadores en este caso
sólo de Trophomonas y burkhordelia, entonces vemos las pruebas de oxidasa glucosa OF,
maltosa OF, ese Manitol OF. La A significa es ácido, significa que sale amarillo en 1 y
verde, el manitol es el único que tiene alguna diferencia y otros azúcares.

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PRUEBA DE LA DNAsa La prueba de la DNAsa qué

es muy importante para las
Stenotrophomonas
maltophilia. Para esta
prueba se pone una estria
de la bacteria en un medio
que contiene DNA y
después de las 18 a 24
horas de incubación le
ponemos acido clorhídrico
para que se manifiesta el
DNA y aparezca un halo
alrededor lo que indica que
está bacteria ha roto el DNA
que tenemos cerca.

DIAPOSITIVAS

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