NIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS “ESPE”

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA

CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

SANTO DOMINGO

PERÍODO : Octubre 2018 – Febrero 2019

ASIGNATURA : Cátedra Integradora de Bioquímica.

INTEGRANTES : Chávez Esteban, Dela Génesis,

Sarango Jordan, Verduga Ángela

NIVEL : Tercero

DOCENTE : Dr. Juan Neira

FECHA : 30/Enero/2019

TEMA : Identificación de aminoácidos

SANTO DOMINGO – ECUADOR

2019
 I. INTRODUCCIÓN
Los aminoácidos son moléculas las cuales en su estructura contienen grupos funcionales
carboxilo (-COOH) así como también amino (-NH2). Estas estructuras Son esenciales
para que exista la vida ya que cumplen un sin número de roles en el metabolismo del
organismo como la formación de proteínas, También Estas son muy importantes en otras
moléculas biológicas las cuales forman parte de coenzimas las cuales son precursores de
la biosíntesis de moléculas del grupo hemo. (notijenck, 2011)
Se conoce que son 20 aminoácidos de los cuales Están clasificados cómo 8 qué son
indispensables O es decir esenciales para la vida humana y 2 resultan ser semi
indispensables, Estos 10 aminoácidos son aquellos que se requieren que sean
incorporados al organismo en una dieta cotidiana, Y mucho más cuando el organismo
requiere De su incorporación Cómo en momentos de Enfermedad En dónde vienen hacer
de vital importancia. (Carpio, 2011)
De estos aminoácidos esenciales los que más se tiene problemas en el momento de ser
ingeridos Son el triptófano la lisina y la metionina Sugerencia es muy típica en algunas
poblaciones en las cuales su alimentación depende de tubérculos y cereales. (Carpio,
2011)

II. OBJETIVOS
Objetivo General

 Realizar la identificación de aminoácidos de las muestras de leche, albúmina glicina

y cisteína utilizando diferentes reacciones químicas.
Objetivos específicos
 Reconocer la presencia de aminoácidos por la reacción de coloración de Ninhidrina
y millon.
 Identificar algunos grupos funcionales presentes en aminoácidos específicos
mediante la formación de productos coloreados.

III. REVISIÓN DE LITERATURA

¿Qué son los aminoácidos?

Los aminoácidos son compuestos orgánicos que se combinan para formar proteínas, las
cuales son indispensables para nuestro organismo. Están formadas de carbono, oxígeno,
hidrógeno y nitrógeno. Entre sus funciones, los aminoácidos ayudan a descomponer los
alimentos, al crecimiento o a reparar tejidos corporales, y también pueden ser una fuente de
energía.
Los aminoácidos son también los encargados de permitir la contracción muscular o mantener
el equilibrio de ácidos y bases en los organismos. Aparte, cada uno de los diferentes
aminoácidos cuenta con una función independiente.

Composición

Los aminoácidos están compuestos por una molécula orgánica con un grupo amino y un
grupo carboxilo. Dependiendo de su estructura, se pueden diferenciar en formas L y D. Las
estructuras L son las naturales para los organismos, y por tanto, las más importantes.

De forma general, por tanto, un aminoácido se compone de carbono, carboxilo, un grupo

amino, un hidrógeno y una cadena lateral.

Tipos

De los cerca de 250 aminoácidos que existen, hay 20 aminoácidos, denominados

proteinogénicos, que se consideran importantes y esenciales para el correcto funcionamiento
del organismo y que se dividen de la siguiente forma:

Esenciales
Son aquellos que no produce el cuerpo y por lo tanto han de adquirirse a través de alimentos:
histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina.

No esenciales

Son los aminoácidos que sí produce el cuerpo: alanina, asparagina, ácido aspártico y ácido
glutámico.

Condicionales
Son necesarios para paliar ciertas enfermedades o el estrés: arginina, glutamina, tirosina,
glicina, ornitina, prolina y serina.

Pese a los nombres en su clasificación, tanto los esenciales como los no esenciales tienen la
misma importancia para el cuerpo, necesitando de un equilibrio entre las cantidades de ambos
en nuestra dieta habitual. Esta cantidad igualmente varía en cada persona, siendo la edad o el
desgaste físico y mental factores variables en este aspecto.

Los aminoácidos también pueden clasificarse bajo otros criterios:

 Dependiendo del número de grupos ácidos o básicos en la molécula: acídicos, básicos

y neutros (hidrófilos e hidrófobos).
 Según su estructura: alifáticos, aromáticos y azufrados.
¿Qué función tienen los aminoácidos?

Aunque se tienda a simplificar las funciones de los aminoácidos, tienen una participación
importante en la mayoría de los procesos de nuestro organismo, como por ejemplo a nivel
cerebral (GABA, Triptófano), vasodilatador (Citrulina), como precursor de la glucosa
(alanina) o de sustancias relacionadas con la alergia (histidina) e incluso, ayuda en la
eliminación de toxinas (caso de la Cisteína).

Aun así, nos podemos encontrar derivados de aminoácidos que tienen otras funciones, como
pueden ser:

 Reparación de tejidos (principalmente muscular)

 Síntesis de colágeno
 Mediadores en el metabolismo de grasas y azúcares
 Reguladores de la glucosa sanguínea
 Mediadores del apetito
 Síntesis de neurotransmisores relacionados con el sueño
 Síntesis de catecolaminas

Grupos funcionales de los aminoácidos

Los veinte tipos distintos de aminoácidos esenciales que se encuentran en condiciones

normales en las proteínas contienen un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (- COOH)
unidos al mismo átomo de carbono, llamado carbono alfa. Los aminoácidos difieren en su
grupo R o cadena lateral unida al carbono alfa. Los aminoácidos puestos en una solución de
pH neutro se comportan como iones dipolares. Esta es la forma en que se comportan en el
pH celular. El grupo amino (- NH2) acepta un protón hasta convertirse en -NH3 + y el grupo
carboxilo dona un protón convirtiéndose en -COO- disociado. Una solución, resiste cambios
en la acidez o alcalinidad y, por lo tanto, desempeña las funciones de un importante
amortiguador biológico. El carbono alfa de un aminoácido es un carbono asimétrico. Por
tanto, cada aminoácido puede presentarse en dos enantiómeros distintos, o imágenes en
espejo. Ambas imágenes se Ilaman L-isómero y D-isómero. Cuando se sintetiza un
aminoácido en el laboratorio se produce una mezcla de isómeros L y D.
Reacción de Ninhidrina
Esta prueba es una de las más eficaces y específicas para la determinación de aminoácidos
y proteínas. Está reacciona con todos los aminoácidos que están inmersos dentro de la
proteína dando lugar a una formación de una estructura color púrpura cuyo pH se encuentra
entre 4 y 8, Pero existen excepciones has en las cuál es el color del complejo es amarillo Y
el aminoácido que le corresponde es la prolina y la hidroxiprolina.

Figura 1. Reacción de un aminoácido con la ninhidrina.

Reacción de Millon
Este reactivo está formado por una mezcla de nitrito y nitrato mercúrico disuelto en ácido
nítrico. Esta reacción se lleva a cabo con residuos fenólicos, es decir proteínas que contienen
tirosina para la formación de nitrotirosina. Las proteínas se precipitan por acción de los ácidos
inorgánicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente
rojo al calentar por formación de una sal mercúrica (Gonzales, 2017).

Fig. 1- Formación del complejo (sal mercúrica) a partir de una proteína con restos de
tirosina

IV. MATERIALES Y METODOS

4.1 Materiales
Reactivos
- Ninhidrina 0.3%
- Etanol 95%
- Acetona
- Reactivo de Millon
Insumos
- Vaso de precipitación de 250 mL
- Tubo de ensayo
- Varilla de vidrio
- Gotero
- Pipeta aforada
Equipos
- Balanza
- Baño María
- Plato agitador (Hot Plate)
Muestra
- Leche UHT
- Albúmina
- Glicina
- Cisteína
4.2 Procedimiento
Preparación de solución de Ninhidrina 0.3%
 Ninhidrina 0.9 gramos y disolver en 300 mL, de etanol al 95%.
Reacción de Ninhidrina (presencia de aminoácidos libres)
 Colocar 3 mL de muestra (Leche UHT, Albúmina, Glicina, Cisteína), en un tubo de
ensayo.
 Adicionar 5 gotas de reactivo de Ninhidrina.
 Calentar a baño María durante 5 minutos, si no hay cambio calentar 15 minutos más.
 Observar el resultado, la coloración azul o violeta, indicando la presencia de
aminoácidos.
Reacción de Millon (Presencia de restos fenólicos)
 Colocar 3 mL de muestra (Leche UHT, Albúmina, Glicina, Cisteína), en un tubo de
ensayo.
 Adicionar 5 gotas de reactivo de Millon.
 Calentar a baño María durante 5 minutos.
 Observar el resultado, aparición de color rojo, indicando que la prueba es positiva.
 V. RESULTADOS

En la reacción de ninhidrina con los 3mL de leche entera, albumina, glicina y L- cisteína se
pudo observar lo siguiente:
Muestra Coloración Observación
Leche entera Positivo

Violeta
Albumina Positivo

Violeta en la parte
superior
Glicina Positivo

Azul purpura
L-cisteína Negativo

No presento cambios
En la reacción de Millon con los 3mL de leche entera, albumina, glicina y L- cisteína se
pudo observar lo siguiente:
Muestra Coloración Observación
Leche entera Positivo

Rojo
Albumina Positivo

Rojo en la superficie
Glicina Negativo

Transparente
L-cisteína Blanquecino

Dos fases
VI. DISCUSION

Identificación de los aminoácidos

La prueba de ninhidrina que se utilizó para identificar la presencia de aminoácidos en las
soluciones de leche, albumina, glicina y cisteína, resultó ser positiva solo para las tres
primeras muestras, donde se pudo presenciar el característico color violeta o azul purpura
que corrobora una prueba positiva. La estructura de la ninhidrina reacciona
específicamente con aminoácidos de configuración alfa, contenidos en las proteínas de
las distintas muestras, siendo que la caseína de la leche reaccione rápidamente al igual
que los aminoácidos contenidos en la albúmina de huevo y glicina, sin embargo, la prueba
fue negativa con cisteína debido a su configuración sulfatada. El hidrato de
tricetohidrindeno es un agente oxidante energético que por una desaminación oxidativa
de los aminoácidos conduce a la formación del aldehído correspondiente, con liberación
de amoniaco, gas carbónico y formación de la ninhidrina reducida o hidrindrantina, la
cual forma una estructura llamada púrpura de Ruhemann. (Túnez, 2018).
En cuanto a la prueba de Millon, este reactivo está formado por una mezcla de nitrito y
nitrato mercúrico disuelto en ácido nítrico. Esta reacción se lleva a cabo con residuos
fenólicos, es decir proteínas que contienen tirosina para la formación de nitrotirosina. Las
proteínas se precipitan por acción de los ácidos inorgánicos fuertes del reactivo, dando
un precipitado blanco que se vuelve gradualmente rojo al calentar por formación de una
sal mercúrico. (Torten, 1964). Por tanto, la proteína de la leche, caseína, al estar
conformada por la mayor parte de los aminoácidos esenciales incluyendo aquellos que
contienen grupos fenólicos resulta positiva a la prueba presentando un color rojizo
después del calentamiento, al igual que la albumina del huevo, por otra parte la cisteína
solo presentó dos fases debido a una pronta desnaturalización por los ácidos, en cuanto a
la glicina al ser un aminoácido simple, cuya cadena lateral es un hidrógeno, no reacciona
frente al reactivo y la solución es traslucida, ligeramente amarilla.

VII. CONCLUSIONES
 En la reacción de Ninhidrina, la cisteína no presenta grupos amino libres. La albumina
si presenta aminoácidos libres.
 El grupo alfa – amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la
ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es
primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la aspargina que tiene
un grupo amino en la cadena lateral. Esta reacción también identifica los grupos alfa
– amino libres presentes en péptidos y proteínas.
 La prueba de Millon indica si presenta restos fenólicos o no. Además, se identificó
que la albumina y la leche presenta tirosina en su secuencia de aminoácidos.
 El reactivo de Millon es una mezcla de nitrato y nitrito mercúrico disueltos en ácido
nítrico concentrado. La presencia, e n la molécula de proteína, de la tirosina produce
una coloración roja que se debe a la formación de nitro tirosina que, por adición de
 mercurio en el curso del calentamiento, se transforma en una sal mercúrica de color
rojo.

VIII. RECOMENDACIONES

 En las muestras utilizadas se debe manipular de la mejor forma los reactivos para
tener una buena resolución y así poder llegar a los resultados requeridos.
 Las soluciones para utilizarse se recomiendan sean preparadas antes de iniciar la
práctica.

Bibliografía
Carpio, E. L. (15 de Octubre de 2011). IDENTIFICACIÓN Y REACCIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS Y
PROTEINAS. Obtenido de https://www.scribd.com/doc/68832499/IDENTIFICACION-Y-
REACCION-DE-LOS-AMINOACIDOS-Y-PROTEINAS

notijenck. (Septiembre de 2011). IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS MEDIANTE FT-NIR. Obtenido

de https://www.notijenck.com.ar/aplicaciones/identificacion-de-aminoacidos-mediante-
ft-nir

Torten, J. (1964). Evaluation of the Biuret and Dye‐Binding Methods for Protein Determination in
Meats. Journal of food science banner , 168-174.

Túnez, I. (2018). Departamento de Bioquimica y biología molecular. Obtenido de

https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/26aminoacidos.pdf

Anónimo. (03 de 11 de 2016). ¿Qué son los aminoácidos? . Obtenido de allnutrition:

https://www.allnutrition.cl/estilo/que-son-los-aminoacidos.html

Anónimo. (s.f.). Aminoácidos. Obtenido de cuidateplus:

https://cuidateplus.marca.com/alimentacion/diccionario/aminoacidos.html

Gonzales, M. (2017). Reacciones de reconocimiento de Proteínas | Química de los

Alimentos. Obtenido de
http://blog.pucp.edu.pe/blog/quimicaalimentos/2017/10/31/reacciones- de-
reconocimiento-de-proteinas/