Práctica VIII

Flora microbiana normal del cuerpo humano

INTRODUCCION:

El término “Flora microbiana normal” Se refiere a la población de microorganismos que residen

en la piel y membranas mucosas de personas normales sanas. La piel y las mucosas hospedan
siempre una gran variedad de microrganismos, los cuales pueden ser divididos en dos grupos:

La flora residente está compuesta de tipos relativamente fijos de microorganismos, los cuales se
encuentran constantemente en un sitio dado a una edad dada; si se le trastorna, se establecen
espontáneamente con rapidez.

La flora transitoria está formada por microorganismos no patógenos o sólo potencialmente

patógenos hospedados en la piel o las mucosas durante horas, días o semanas; provienen del
ambiente, no producen enfermedad y no se establecen por sí mismos permanentemente sobre la
superficie. Los miembros de la flora transitoria son generalmente de poca significación en tanto
que la flora residente normal permanece sin alterarse, pero si la flora residente sufre alteraciones,
lo microorganismos transitorios pueden colonizar, proliferar y producir enfermedad.
OBJETIVOS

-Conocer los diferentes tipos de microorganismos en cada parte del cuepo humano.

-Conocer la flora normal de la piel.

Saber lo que es un colorante.

-Aprender como se clasifican los colorantes

PAPEL DE LA FLORA RESIDENTE:

Los microorganismos que están siempre presentes en las superficies del cuerpo son comensales. El
hecho de que prosperen en un área determinada depende de factores fisiológicos como
temperatura, la humedad y la presencia de determinados nutrimientos y sustancias inhibidoras. Su
presencia no es esencial para la vida, ya que pueden ser criados animales libres de gérmenes que
carecen completamente de una flora microbiana normal. Sin embargo, la flora residente de
algunos sitios desempeña un papel definido en el mantenimiento de la salud y de las funciones
normales. La supresión de la flora normal crea un vacío local parcial que tiende a llenarse por
microorganismos que se comportan como oportunistas y pueden volverse patógenos.

8.3- FLORA NORMAL DE LA PIEL:

Entre los factores que pueden ser importantes en la eliminación de los microorganismos no
residentes de la piel, se encuentra el PH bajo, los ácidos grasos, las secreciones sebáceas y la
presencia de lisozima. Ni la sudación abundante, ni el lavado, ni el baño pueden eliminar o
modificar significativamente la flora normal residente. Puede disminuirse el numero de
microorganismos superficiales restregando vigorosamente la piel todos los días con jabón, que
contenga hexaclorofeno u otro desinfectante, pero la flora es reemplazada rápidamente a través
de las glándulas sebáceas y sudoríparas.

FLORA BACTERIANA NORMAL O RESISTENTE DE LA PIEL:

Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus (en pequeñas cantidades), Especies de

Micrococus, Estreptococos alfa hemolíticos S. Viridans y no hemolíticos, Especies de Peptococcus,
Cantidades pequeñas de otros microorganismos (especies de cándida, de Acinetobacter. etc.)
enterococos (S. Faecalis), Especies de Propionibacterium, Especie no patógenas de Neisseria.

FLORA NORMAL DEL INTESTINO:

Al nacer el intestino es estéril, pero son introducidos los microorganismos con el alimento. En
niños amamantados contiene estreptococos lácticos y lactobacilos. Estos organismos inmóviles
gram positivos aerobios y anaerobios (Porej.: Bifidobacterium) en guarderías se encuentra por
ejemplo klebsiella, citrobacter, enterobacter.
-FLORA BACTERIANA NORMAL O RESIDENTE DELINTESTINO:

Estreptococos lácticos y Lactobacilos, en el colon del adulto normal la flora bacteriana de un

residente es de un 96 A 99% son anaerobios (Bacteroides, en especial B. fragilis, especial de fuso
bacterium, Lactobacilos, anaerobios por Es.: Bifidobacterium, Clostridium por Ej.: Clostridium
perfringens. Estreptococos anaerobios, Peptoestreptococcus, enterococos un pequeño número de
1-4 de aerobios facultativos conforme gram negativos, Enterococos, proteus. Pseudomonas,
cándidas y otros después pueden aparecer Enterobacter, otros como: E. coli se encuentra
presente algunos días.

- FLORA DE LA BOCA Y VIAS RESPIRATORIAS SUPERIORES:

Las mucosas de la boca y de la faringe son a menudo estériles en el momento del nacimiento,
aunque puede contaminarse durante el parto a través del conducto vaginal.

En la faringe y en la tráquea se establece una flora similar; en los bronquios normales se

encuentran sólo unas cuantas bacterias. Los bronquiolos y los alvéolos son normalmente estériles.

FLORA BACTERIANA NORMAL O RESIDENTE DE LA BOCA Y VIAS RESPIRATORIAS SUPERIOR:

De 4-12 horas después del nacimiento se estable en Estreptococos viridans, luego Estafilococos,
Diplococos gram negativos (Neisseria Branhamella) Difteroides, en ocasión Lacto-bacilos,
Espiroquetas, al comenzar la dentición anaerobios, bacteroides (en especial B. Malaminogenicus,
en los adultos)., Bacteroides.

FLORA BACTERIANA NORMAL O RESIDENTE DE:

NASOFARINGE:

Cualquier cantidad de las siguientes: Difteroides, especies no patógenas de Neisserias,

Estreptococos alfa hemolíticos, Estaf. Epidermidis, Estreptococos no hemoliticos, Anaerobios
(Demasiadas especies para enumerarlas), cantidades variables de especies de bacteroides, cocos
anaerobios, Difteroides, Especies de fusobacteroirium, etc.

Cantidades menores de los siguientes cuando están acompañadas por los microorganismos antes
en listados: Levaduras, especies de HHaemophillus, neumococos, Estaf. Aureus, bacilos
gramnegativos, Neisserias meningitis, Streptococcus, Peptococcus.

- LA URETRA:

La porción anterior de la Uréter de ambos sexos contiene un pequeño número de los mismos
organismos hallados en piel y Perineo.
- VAGINA:

Lactobacilos, Estreptococos, Hemolíticos grupo B, Estreptococos anaerobios (Peptoestrectococos),

Bacteroides, Clostridios, gardnerella (Haemophillus) vaginales, Ureaplasma ureatyticum, en
ocasiones Listeria, especies de mobiluncus.

- CONJUNTIVA:

Difteroides (Corynebacterium Xerosis), Estaf. epidermidis y Estreptococos no Hemolíticos, también

se observan Neisserias no gonorrea y bacilos gram negativos semejantes a haemophillus (especies
de Moraxella)

- FOSAS NASALES:

Corynebacterias, estafilococos (S. áureos, S. epidermidis) y estreptococos.

- VIAS GASTROINTESTINALES Y RECTO:

Varias enterobacteriáceas, excepto especies de Salmonella, Shiguella. Yersinia, vibrio,

campylobacter, Bacilos gramnegativos que no fermentan dextrosa, Enterococos, S. Epidermidis,
Estreptococos Alfa hemolíticos y no hemolíticos , Difteroides, St. Aureus en cantidades pequeñas,
Levaduras en cantidades pequeñas, Anaerobios en gran número.

- GENITALES:

Cualquier cantidad de las, siguientes especies: Corynebacterium, especies de lactobacillus,

estreptococos alfa hemolíticos y no hemolíticos, especie no patógenas de Neisserias.

Las siguientes cuando están mezcladas y no predominan.. Enterococos en ida y otros Bacilos gram
negativo, S. Epidermidis, cándida albicans y otras levaduras.

Anaerobios (son innumerables) Especies, cuando están en cultivo puro, o predominen:

bacteroides, Clostridium
PRACTICA IX

LOS COLORANTES Y LAS COLORACIONES SE COMBINAN QUÍMICAMENTE CON EL PROTOPLASMA

BACTERIANO:

Aunque la observación microscópica de las bacterias por el método de preparaciones húmedas

(gotas pendientes) es útil, lo habitual es que sean estudiados ya teñidas con soluciones colorantes
apropiadas. Desde luego, las bacterias son observadas muertas debido a que el proceso de tinción
es nocivo y las matas.

UNA SOLUCIÓN COLORANTE:

Es una sustancia que puede transmitir su color a otras sustancias. Tienen por finalidad teñir partes
o la totalidad de la célula bacteriana. mayoría de los colorantes usados en bacteriología son
derivados de las anilinas y químicamente son sales, es decir, compuestos por un ácido y una base.
Esta estructura química ha servido para clasificarlos en:

1-Ácidos,

2-Básicos,

3-Neutros

De acuerdo con la estructura molecular, existen en cada colorante dos químicamente activos: El
grupo auxocrómico, que le da a la molécula su habilidad para reaccionar con el substrato
correspondiente, y el grupo cromófono (en el ion que es coloreado) lugar donde se verifica la
absorción o no absorción de las distintas longitud de ondas luminosas en la producción del color.

El proceso de tinción de una bacteria es, en suma, un proceso de intercambio iónico entre ésta y el
colorante. Los colorantes ácidos (aniónicos) tiñen los componentes básicos en el citoplasma
celular. Se usa poco en bacteriología. Los colorantes básicos (catiónicos) son los empleados
rutinariamente y tiñen los componentes ácidos en la célula bacteriana, como los ácidos nucleicos y
nucleoproteínas.

Los colorantes desde el punto de vista de su integridad química, son disoluciones de la sustancia
fundamental en agua, alcohol, en ambas, en fenol, etc. Muchas de ellas llevan incorporadas
sustancias mordientes mediante bacterianas. las cuales las cuales se fijan mejor substratos
bacterianos.

SOLUCIONES COLORANTES DE USO MAS O MENOS CORRIENTE EN BACTERIOLOGIA:

1- Colorantes ácidos (aniónicos). Azul de anilina, Eosina; Fluoresceína; Fucsina ácida; Orange; etc.

2- Colorantes básicos ( catiónicos)

a) Azules: Azul de metileno; Azul de quinoleína; Azul violeta.

b) Pardos: Vesubina (pardo Bismarck); Fucsina básica; Rojo Neutro; Safranina etc.

c) Verdes: Verde brillante; Verde Malaquita; Verde de Metilo.

d) Violeta: Cristal Violeta; Violeta de Genciana; Violeta de Lauth (tionina) Violeta de Metilo B, etc.

3- Colorantes Neutros: Eosinaazul de metileno, violeta de metileno

METODO DE TINCION:

Las tinciones pueden ser positivas y negativas. La Tinción positiva es aquella en la cual colorante
penetra y tiñe la estructura bacteriana o parte de ella.

Es un proceso severo que mata la bacteria e incluso puede deformarla. Es el método habitual en
bacteriología. En la tinción Negativa: El colorante no penetra ni tiñe la célula, es menos nociva y
nos permite ver ciertas estructuras.

TINCION POSITIVA:

Las tinciones positivas se agrupan en dos métodos.

1- Método de coloración Simple: Las bacterias son teñidas a acción de un colorante únicamente.

2- Método de coloración Compuesta: En ésta para teñir las bacterias empleamos más de un
colorante, podemos usar mordientes y otro medio físico químico: Dentro de las coloraciones
compuestas se incluyen las llamadas coloraciones diferenciales mediante las cuales las bacterias se
tiñen en formas distintas de acuerdo con las diferencias físico-químicas que poseen. Estas
coloraciones han servido de base para la clasificación de grandes grupos microbianos Ej.: método
de coloración de gram, método de coloración de Ziehl Nielseny método de coloración de Albert.
Se denominan propiedades o afinidad tintoriales: A los diferentes comportamientos de las
bacterias frente a una misma técnica de coloración (esto sucede cuando se emplean coloraciones
diferenciales).

FROTIS O EXTENSION:

Consiste en dispersar el material a observar al .microscopio en lámina portaobjetos, con la

finalidad de conocer las características microscópicas de microorganismos. El frotis es uno de los
pasos previos a toda coloración.

- MATERIALES NECESARIOS:

Cepas: Crecimiento bacteriano en medios sólidos.

- Crecimiento bacteriano en caldos.

- Láminas porta-objetos

- Asa bacteriológica

- Diluyentes: Solución salina fisiológica, caldo simple, agua destilada.

Un frotis bien hecho debe ser fino (casi transparente) para poder observar mejor las
características microscópicas del microbio. Cuando el material bacteriológico está suspendido
previamente en líquido (como los cultivos en caldos) basta con tomar una gota del mismo y
proceder en igual forma a lo ya descrito.

SECADO: La preparación está húmeda y es necesario secarla. El secado puede conseguirse dejando
la placa secarse espontáneamente al medio ambiente. La lámina se sostiene por sus extremos y se
debe tener cuidado de no tocar con los dedos la extensión, pues las bacterias están vivas.

FIJACION: Este proceso tiene por objeto fijar con firmeza las bacterias al cristal para que no se
desprendan al agregar las soluciones y al lavarlas. Además, se matan las bacterias sin que su
estructura se altere. Este paso se puede hacer de dos modos.
 CONCLUCION

Podemos decir que en esta practica aprendimos sobre lo que es la flora microbiana normal del
cuerpo humano y que están siempre presentes en las superficies del cuerpo.

Además que los colorantes son una sustancia que puede transmitir su color a otras sustancias.
Tienen por finalidad teñir partes o la totalidad de la célula bacteriana.
 INTRODUCCION

En esta práctica hablaremos sobre de que se trata la coloración de gram sus métodos, las formas
que pueden adoptar fundamentalmente las bacterias.

Relacionar diferentes tipos de bacterias para hablar de su forma, disposición, tamaño y el tipo de
tinción.
Practica X

La coloración de Gram

Esta propiedad tintorial parece ser fundamental, ya que la relación al Gram se correlaciona con
muchas otras propiedad3s morfológicas. Las bacterias se clasifican como Gram positivas o Gram
negativas según la respuesta al procedimiento de tinción de Gram.

Método de coloración de Gram

Fundamento

Muchas bacterias tienen la propiedad de retener colorantes derivados de pararosalinas, se

aterplican un colorante básico: el cristal violeta, luego se aplica una solución de yodo , en este
momento todas las bacterias se tiñen de azul, entonces las células son tratadas con alcohol.

Grupos bacterianos:

Una especie es en realidad una etapa determinada en la evolución de una población de

organismos.

Característica morfológica según la coloración de Gram

En otros campos de la biología las especies se caracterizan por los rasgos morfológicos del
individuo. Esto se aplica también a los hongos, pero en las bacterias los rasgos morfológicos de la
célula bacteriana solo proporcionan una subdivisión primaria de este enorme grupo.

Morfología de las bacterias características observables al microscopio

1-cocos: son bacterias de forma esférica, en las cuales los tres diámetros de la célula son
aproximadamente iguales.

2-bacilos: son bacterias de forma alargada en las cuales predomina la longitud sobre otras
dimensiones ej bacillus a anthracis

3-helicoidal: son bacterias con aspecto de resorte. Borrelia recurrente. Las variedades de forma
incluyen microrganismos bacilos rígidos o flexibles.

4-hongos: pueden presentarse en forma de levadura y filamentos ramificados.

Practica XI

Método para acidorresistente( coloración ziehl neelsen)

este método de coloración fue ideado generalmente por koch y modificado posteriormente por
ERLICH, ZIEHL*NEELSEN, ha prestado un gran beneficio a la enfermedad tuberculosis en el
hombre y los animales.igualmente en las infecciones producidas por integrant6es de genero
nocardia en el hombre y en los animales también.

Fundamento :

Las bacterias pertenecientes al genero myco-bacterium otros microorganismo relacionados con

ellos tenen la propiedad de no aceptar con facilidad los colorantes empleados en los
procedimientos usuales de coloración teniéndose únicamente si son sometidos a la acción de
colorantes energéticos como carbolfisina mediante un tiempo prolongado o ayudado por el calor.
 CONCLUCION

En conclusión hemos aprendido que la tinción de Gram se correlaciona con muchas otras
propiedades morfológicas. Las bacterias se clasifican como Gram positivas o Gram negativas según
la respuesta al procedimiento de tinción de Gram.

Y además Método para acidorresistente un gran beneficio a la enfermedad tuberculosis en el

hombre y los animales. Igualmente en las infecciones producidas por integrant6es de genero
nocaria en el hombre y en los animales también.