FACULTAD DE INGENIERÍA

CURSO:

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TÍTULO:

DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS AMBIENTALES

DOCENTE:

WILBERTO EFFIO QUEZADA

INTEGRANTES:

• ARCE DIAZ LUIS FELIPE

AÑO:

2019 - 1
 DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS AMBIENTALES
DEL AIRE MEDIANTE LA TECNICA DE RECUENTO EN PLACA

I. INTRODUCCION.
Los microorganismos (bacteria, virus, hongos, protozoarios, y algunas algas)
se pueden encontrar virtualmente en todo el medio ambiente. Se encuentran
en el aire, agua, suelo, alimentos, petróleo, en la materia orgánica en
descomposición y en las superficies del cuerpo. Estos organismos son
extremadamente importantes para la salud humana y el medio ambiente
además en los avances en inmunología, virología, genética y biología
molecular.
Los microorganismos pueden ser transportados rápidamente, en forma de
bioaerosoles, a través de grandes distancias con el movimiento del aire que
representa el mejor camino de dispersión. Algunos han creado adaptaciones
especializadas que favorecen su supervivencia y su dispersión en la
atmósfera. El transporte se realiza sobre partículas de polvo, fragmentos de
hojas secas, piel, fibras de la ropa, en gotas de agua o en gotas de saliva
eliminadas al toser, estornudar o hablar. Los microorganismos dispersados
en el aire tienen una considerable importancia biológica y económica.
Numerosas enfermedades de plantas son causadas por hongos y algunas
por virus y bacterias que se trasmiten por el aire, produciendo graves
pérdidas en las cosechas, Varias enfermedades del hombre y los animales,
víricas, bacterianas y fúngicas se transmiten por la atmósfera y a menudo se
producen brotes epidémicos. Los microorganismos presentes en el aire
también pueden contaminar los alimentos y materiales orgánicos (cuero,
textiles, papel) produciendo su alteración. (De la Rosa & Mosso, 2002)
Los microorganismos tienen una influencia muy significativa en los sistemas
biológicos y biotecnológicos. En este sentido, la diversidad microbiana es
también un recurso para elaborar tecnologías novedosas que generen
riqueza y bienestar para el país. Entre estas podría contemplarse usar a los
microorganismos en tecnologías ecológicas y ambientales que permitan
ayudar a la conservación o recuperación de la biodiversidad. Por su utilidad
biotecnológica (por ejemplo, en la elaboración de fármacos, productos
alimenticios y hasta armamento biológico) los microorganismos también son
punto clave de bioseguridad en los países, por ello es indispensable
conocerlos lo más posible y al mismo tiempo reglamentar su uso. (Montaño,
Sandoval, Camargo , & Sánchez , 2010)
II. OBJETIVOS.
a. Objetivo General:
 Determinar Microorganismos Ambientales del aire mediante la
técnica de recuento en placa.
b. Objetivos Específicos:
 Evaluar la eficiencia de la técnica de recuento en placa distribuido en
ascensor, cafetín y biblioteca de la UPN para la determinación de
microorganismos ambientales del aire.
 Contabilizar y Comparar mediante gráficos y cuadros los
microorganismos ambientales del aire distribuidas en placas en la
UPN.

III. EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO.

3.1. Materiales.
 Probeta
 Luna de reloj
 Piseta
 Botellas
 Espátula de laboratorio
3.2. Equipos.
 Autoclave: dispositivo utilizado para esterilizar material de laboratorio
mediante el vapor de agua a alta presión y temperatura. (Custodio,
2009)
 Estufa: cámara de temperatura controlada para cultivo de
microorganismos. Se utiliza para facilitar el desarrollo de los
microorganismos a su temperatura óptima de crecimiento. (Creswell,
2002)
 Balanza: usada para pesar colorante, componentes de medio de
cultivo, animales, etc. (Rivas, 2013)
 Cocina: pequeño aparato de sobremesa, portátil y autónomo, que
posee uno o más elementos de calefacción eléctrica, y que se emplea
para calentar recipientes con líquidos, de forma controlada. (Rivas,
2013)
 3.3. Medios de cultivos.

PCA: Esta formulación está especificada en Standard Methods para

el examen del agua y las aguas residuales. En el PCA (Plate Count
Agar), la Triptona y el Extracto de Levadura suministran las fuentes de
nitrógeno y de vitaminas, que requieren para el crecimiento una vasta
variedad de microorganismos, la glucosa actúa como fuente de
energía. Se prepara según la fórmula de la USP y recomendaciones
de la APHA (American Public Health Association). (Soria, 2009)

 RBC: La peptona micológica o el digerido papaico de la harina de

soja proporcionan nutrientes esenciales para el crecimiento. La
dextrosa es fermentable carbohidrato. El cloranfenicol tiene una
acción inhibidora sobre bacterias gram negativas. El tinte rosa de
Bengala suprime el desarrollo de bacterias y reduce la propagación
de mohos, controla el tamaño y la altura de las colonias de moho,
como las especies de Rhizopus El medio tiene un pH neutro, que con
los antibióticos ha demostrado ser ventajoso. Rose bengal es
absorbida por las colonias de hongos y levaduras ayudan a la
enumeración.

IV. PROCEDIMIENTO.
4.1. Preparación de medios de cultivos.
Se agrega 4.7g de PCA a 200ml de agua destilada y 6.32g de RBC a
200 ml de agua destilada en un frasco para ser mezclados cada uno
de ellos, luego se calienta mientras agita en la cocina eléctrica hasta
que comience a burbujear, después se lleva los medios de cultivo al
autoclave para ser esterilizados a una temperatura de 121°C por 15
minutos, para finalizar se hace la repartición de los medios de cultivo
en las placas Petri.
4.2. Exposición de placas servidas. (Técnica de sedimentación)
Utilizando la Técnica de Sedimentación se abren las placas Petri que
contienen los medios de cultivo PCA Y RBC y se deja unos 15 minutos
en el área de la biblioteca, cafetín y ascensor, para que los
microorganismos que se encuentran en el aire se asienten.

4.3. Incubación de medios de cultivos.

 Se colocan los medios de cultivo expuestos a los microorganismos del
aire en las áreas de la biblioteca, cafetín y ascensor en la estufa
incubadora a unos 37°C por 43 horas el PCA y el RBC a unos 28°C
por 5 a 7 días.
4.4. Recuento de placas.
Se coloca las placas Petri con los medios que fueron expuestos en las
áreas de la biblioteca, cafetín y ascensor en el Contador de Colonias
para determinar el número de microorganismos encontrados.

V. ESQUEMA.

Mezclar 200 ml de agua Calentar y agitar con la

destilada con 6.32g de Agitar las mezclas cocina eléctrica hasta que
DRBC y para el PCA 4.7g. comience a burbujear

PCA y DRBC : 121°C

por 15 minutos
Distribuir los medios minutosminutos Esterilizar
en placas Petri
Placas petri a
170°C por 1.5 h.

Siembra por técnica

Enfriamiento de 5 a 10 minutos de Sedimentación

Incubar Exponer las placas con los

medios en las áreas de cafetín,
ascensor y biblioteca por 15
minutos.

PCA: 37°C por 43 horas

RBC: 28°C por 5 a 7 días

Hacer el recuento con

 VI. RESULTADOS.

Tabla 1: Microorganismos hallados en diferentes puntos dentro de la

Universidad Privada del Norte – 2019-1

Ubicación Punto de recoleccion

MEDIOS DE CULTIVO
Sala de star Recepcion Area de computadoras Area de libros
BIBLIOTECA - - 2 colonias 4 colonias RBC
10 colonias 10 colonias - - PCA
Entrada cafeteria Salida de cafeteria

CAFETERIA 9 colonias 10 colonias RBC

16 colonias 26 colonias PCA

Ascensor 1 Ascensor 2
Ascensores 12 colonias 5 colonias RBC
167 colonias 15 colonias PCA
Fuente: Elaboración Propia

VII. DISCUSIÓN.
A partir de los resultados obtenidos en la práctica de cultivo de
microorganismos como las bacterias y los hongos realizados en diferentes
partes de la UPN, se obtiene como resultado que en nuestras placas no se
observan muchas bacterias ni muchos hongos, en cambio en las placas de
cultivo de otro grupo puestas en otro lugar designado por el profesor, se da
a conocer que existe una mayor la concentración de microorganismos
Por ende, el resultado que se obtiene en las concentraciones de
microorganismos es por la ubicación de las placas ya existe lugares donde
se encuentran mayor concentración de bacterias, hongos y levaduras.

VIII. CONCLUSIONES.
 Las muestras obtenidas, nos permite hacer una tabla de
comparación para obtener qué lugar tiene mayor contaminación de
microorganismos.
 Se obtiene diferentes resultados de bacterias y hongos en los
lugares que se hizo la muestra.
 En comparación con las otras muestras de placa, la biblioteca es el
lugar con poca contaminación de microorganismos.
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. ANEXOS.

Creswell, M. (Agosto de 2002). Seguridad Biológica. Obtenido de

http://apps.who.int/medicinedocs/documents/s16575s/s16575s.pdf

Custodio, J. (2009). Slideshare. Obtenido de https://es.slideshare.net/jcustodio91/guia-

ii

De la Rosa, M. C., & Mosso, M. (2002). El aire: hábitat y medio de transmisión.

Obtenido de Observatorio Medioambiental :
http://www.divulgameteo.es/uploads/Aire-microorganismos.pdf

Montaño, N., Sandoval, A., Camargo , S., & Sánchez , J. (2010). Los microorganismos:
pequeños gigantes. Puebla: CIENCIA Y CULTURA: Elementos.

Rivas, R. (24 de Septiembre de 2013). Reglamento para el laboratorio de

microbiología. Obtenido de https://es.slideshare.net/ronal1800/instrumentos-de-
laboratorio-de-microbiologia

Soria, D. (Septiembre de 2009). Diego Francisco Soria Melguizo, S.A. Obtenido de

http://f-
soria.es/Inform_soria/Difco%20Fichas%20tecnicas/PLACAS%20DIFCO%20Y
%20CROMOGENICAS%20BD/FT%20PLATE%20COUNT%20AGAR.pdf

X. ANEXOS.

Figura 1. Resultados RBC Figura 2. Resultados PCA