04 de Octubre de 2016, San Juan de Pasto, Nariño-Colombia

INFORME DE LABORATORIO 5

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Universidad Mariana, Facultad de Ingeniería, Programa de Ingeniería de Procesos, cuarto Semestre
Coral. David (dcoral43@gmail.com), Madroñero. David (davmadronero@umariana.edu.co), Ramírez.
Gina (giramirez@umariana.edu.co).

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RESUMEN:

En esta práctica se realizó la identificación de los diferentes carbohidratos, la soluciones a estudiar fueron 4 muestras biológicas: leche,
huevo, miel y gaseosa en las cuales se utilizaron diferentes pruebas que se basan en la reactividad de los grupos funcionales carbonilo e
hidroxilo que hacen parte de estos y les confieren la base para la mayoría de las reacciones usadas para su identificación y su respectivo
análisis, en cada demostración se obtuvo resultados positivos y en otros negativos, se tuvo en cuenta algunas propiedades fisicoquímicas
y según esto se determina la reacción para la determinación de los carbohidratos. En si se logró reconocer los carbohidratos por medio
de reacciones coloreadas de carácter cualitativo y así diferenciar Hexosas de pentosas, aldosas de cetosas e identificar azucares
reductores y no reductores con la respectiva prueba.

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Palabras clave: Carbohidratos, Grupos funcionales, Muestras biológicas.

ESTRUCRAS DE LOS CARBOHIDRATOS

INTRODUCCIÓN: FIGURA 1: GLUCOSA FIGURA 2: SACAROSA

Los carbohidratos ‘’son compuestos que contienen cantidades

grandes de grupos hidroxilo. Los carbohidratos más simples
contienen una molécula de aldehído a estos se los llama
polihidroxialdehidos o una cetona (polihidroxicetonas). Todos FIGURA 3: FRUCTOSA FIGURA 4: MALTOSA
los carbohidratos pueden ser como monosacáridos,
oligosacáridos o polisacáridos’’ (GONZALES & ARIAS,
2012,p.2)

Los carbohidratos ‘’se pueden clasificar como aldosas y cetosas,

según posean la función aldehído (‒CHO) o cetona (‒CO); FIURA 5: GALACTOSA FIGURA 6: LACTOSA
además en su estructura poseen grupos hidroxilo (‒OH) ’’
(ESPINOSA, 2013,p.21).

De acuerdo con lo anterior por medio de este informe se

pretende identificar los carbohidratos por los cambios que se FIGURA 7: ARABINOSA FIGURA 8 DEXTRINA
dieron en las sustancias al ser mezcladas almidón, fructosa, y
sacarosa, haciendo referencia a estos como fuentes de
carbohidratos, para luego al aplicarles los reactivos como el
lugol y el fehling a y b que permitieron identificar y comprobar
los principales tipos de carbohidratos al que pertenecían cada FIGURA 9: ALMIDON FIGURA 10: XILOSA
una de las mezclas, si fueron monosacáridos, disacáridos o
polisacáridos, y así verificar si fueron positivos o negativos
teniendo en cuenta los colores que se adquirieron en cada una
de las sustancias y cuando fueron expuestas al calor con el baño
maría. Existen muchos tipos de carbohidratos ‘’ se encuentran
principalmente en los alimentos tipo almidón, como el pan, ESTRUCTURAS BIOLOGICAS
fideos y arroz, así como en algunas bebidas endulzadas con
azúcares. La principal función es proporcionar energía, también
desempeñan una función importante para la estructura y el FIGURA 11: LECHE
funcionamiento de las células, tejidos y órganos’’
(JARAMILLO, BORBOR, GARCIA, & JOHN GONGORA,
2013,p.2).

FIGURA 12: MIEL

 esperados debido a que para esta prueba el reactivo utilizado no
era concentrado como la práctica lo requería sino que tenía una
concentración del 10% y estaba recién preparado.|

FIGURA13: GASEOSA, está compuesta por la sacarosa ENSAYO 3 PRUEBA DE MOLISCH PARA
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
que es un azúcar es un disacárido formado por alfa-
glucopiranosa y beta-fructofuranosa. TABLA N° 3 Resultado prueba de Molisch.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
ENSAYO 1
FUENTE: ESTA INVESTIGACION
Tabla1. Composición muestras biológicas
Muestra biológica Composición Esta prueba es un ensayo para reconocimiento general de
carbohidratos la cual permite detectar la presencia de hidratos
Leche Lactosa, galactosa,
de carbono en una muestra; está basada en la formación de
glucosa.
furfural o derivados de éste (originado por los ácidos
miel Fructosa, glucosa, concentrados que provocan una deshidratación de los azúcares)
sacarosa. a partir de los carbohidratos para obtener el furfural que se
Gaseosa Fructosa, sacarosa. combina con el -naftol sulfonato originando un complejo
Clara de huevo Glucosa. púrpura. También sirve para el reconocimiento general de
FUENTE: ESTA INVESTIGACION carbohidratos donde polisacáridos y disacáridos se hidrolizan
formando monosacáridos formando un color púrpura
ENSAYO 2: PRUBA DEL ACIDO MUSICO PARA EL violeta.(Díaz et al., 2009)
RECONOCIMIENTO DE LA LACTOSA
Todos los glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado
TABLA N° 2 Resultado con ácido músico se deshidratan formando compuestos furfúricos (las pentosas
dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos
furfurales se condensan con el reactivo de Molisch (solución
alcohólica de alfa-naftol), dando un producto violeta.

En las pruebas bilógicas se pueden identificar carbohidratos

como en el huevo se encuentra presente la glucosa, la leche en
FUENTE: ESTA INVESTIGACION su mayoría por lactosa, la miel como la gaseosa tienen
carbohidratos como la glucosa, fructosa, galactosa entre otros.
Como se puede observar en la tabla 2 los resultados en todos
los tubos de ensayo fueron negativos pero debido a que ENSAYO 4 PRUEBA DE OSAZONAS PARA
teóricamente el ácido músico, C6H10O8, se obtiene por la RECONOCIMIENTOS DE AZUCARES
oxidación del azúcar de la leche (lactosa), la dulcita, la
galactosa, la quercita y la mayoría de las variedades de goma TABLA N° 4 Resultados prueba de osazonas
natural que incorporan ácido nítrico(Fallis, 2013),
determinamos que por ello que tanto la leche, miel, galactosa y
lactosa debieron dar una respuesta positiva a la prueba de ácido
músico, lo cual se evidenciaría debido a que en los tubos que las
contenían, la solución resultante era transparente, confirmando
la presencia de ácido músico. Esta prueba permite diferenciar la
galactosa o los azúcares que la contienen, de las demás
aldohexosas por formación de un ácido sacárido que es el ácido FUENTE: ESTA INVESTIGACION
músico. El ácido sacárido cristalino es insoluble en ácido nítrico
diluido. El ácido nítrico concentrado oxida los dos carbonos En este ensayo únicamente aldosas y monosacáridos reaccionan
terminales de las aldohexosas formando los correspondientes con fenilhidrazina formando fenilhidrozonas.
ácidos sacáridos. En general, los ácidos sacáridos son solubles
en ácido nítrico diluido, pero el ácido músico es insoluble en Como este reactivo es para aldosas y monosacáridos en la leche
estas condiciones, por lo que precipita como cristales y en la clara de huevo dio positivo debido a que estas en su
transparentes si la solución se enfría rápidamente. Concluimos composición contienen glucosa la cual está formado por un
que en la prueba de laboratorio no se obtuvo los resultados grupo aldehído por lo que reaccionan con la fenilhidrazina.
La fructosa, sacarosa y galactosa no reaccionaron debido a que
estas contienen grupos cetonas (Figura 2, 3,5).
La miel y la gaseosa tampoco reaccionaron por lo que estas están
compuestas de fructuosas, sacarosas y galactosas que como se
dijo anteriormente estas compuestos por grupos cetonas.
ENSAYO 5 PRUEBA PARA AZÚCARES REDUCTORES
CON REACTIVO DE FEHLING
TABLA N°5 Resultado reconocimiento prueba de
azucares
FUENTE: ESTA INVESTIGACION
Todos los tubos reaccionaron ya que contiene cantidades de
glucosa así sea en pequeñas cantidades; el tubo 3 que pertenece
a la clara de huevo se formó un precipitado rojo y según (Paola
and Acuña, 2011) ‘’esto se debe al poder reductor del grupo
carbonilo de los aldehídos, el cual se oxida a ácido y reduce la
sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre’’.
Para el tubo 5 la glucosa es un azúcar reductor ya que como se
puede ver en la figura 1 contiene grupo aldehído la cual reduce
al reactivo de fehling a óxido de cobre rojizo.
El reactivo al reaccionar con un monosacárido la reacción se
volvió verdosa (tabla 5), y al reaccionar con un disacárido se
tornó amarillo ladrillo y anaranjado.
El almidón reacciono pero dio un anaranjado muy claro y esto
es porque el almidón tiene muy poca presencia de OH
hemiacétalicos, aunque lo bueno del almidón es que puede
hidrolizarse rápidamente en soluciones acuosas.
ENSAYO 6 PRUEBA PARA AZÚCARES
REDUCTORES CONREACTIVO DE BENEDICT.
TABLA N°6 Resultados prueba de benedict
FUENTE: ESTA INVESTIGACION
En este ensayo además de reconocer azucares reductores
también se conocerá la reacción con carbonos anoméricos
libres.
Todos los tubos reaccionaron ya que a partir del análisis de todas
las estructuras de los carbohidratos utilizados nos damos cuenta
de que la glucosa como la fructosa están presente en los
materiales biológicos y en el almidón utilizado por lo que
podemos decir que estos son azucares reductores por lo que son
monosacáridos.
Un error que se produjo fue con la sacarosa, la cual tenía que
dar negativo porque esta es en un disacárido como podemos ver
en la figura 2 la cual está compuesta de glucosa y fructosa que
están unidas por sus carbonos anoméricos impidiendo que
reaccionen con el reactivo; de pronto esta reacción dio positiva
por lo que los carbohidratos estaban recién preparados.
El precipitado formado corresponde al oxido cuproso (C𝑢2 o) el
cual resulta de la reducción del C𝑢2+ gracias al grupo aldehído
de la azúcar (CHO) a una forma Cu.(Problema)
ENSAYO 7 Prueba de Barfoed
TABLA N°7 Resultado de la prueba barfoed para la
identificación de monosacáridos y disacáridos
FUENTE: ESTA INVESTIGACION
En este ensayo se determinó que la miel, gaseosa, glucosa y
fructosa son monosacáridos debido a que reaccionaron en un
menor tiempo reduciendo el cobre de manera más rápida
formando así óxido cuproso presentando un precipitado rojo.
La leche, maltosa y lactosa son disacáridos debido a que son la
unión de dos monosacáridos a partir de en laces o-glucosídicos.
El precipitado corresponde al cobre y esto se debe porque el
reactivo de Barfoed está compuesto de acetato cúprico y ácido
acético y estos en presencia de un monosacárido su ion C𝑢2+ se
reduce a un ion C𝑢1+ (oxido cuproso).(Problema)
ENSAYO 8 PRUEBA CON REACTIVO DE
SELIWANOFF
TABLA N°8 Resultado de la prueba para el
reconocimiento de cetonas
FIGURA: ESTA INVESTIGACION
En este ensayo se distinguieron aldosas y cetohexosas en el que
daba un color rojo intenso aquellos que contenían un grupo
cetona reconociéndose como cetohexosas y un rojo claro para
aquellos que contienen un grupo aldehído reconociéndose como
aldosa.
A partir de las estructuras se pudo corroborar que la miel,
gaseosa, fructosa y sacarosa contienen un grupo aldehído en el
cual el carbono secundario se encuentra libre y por eso su
coloración al reaccionar.
Los reactivos que contienen fructosa darán positivo debido a
que esta reacciona con el HCl que contiene el reactivo el cual al
agregarle calor se produce una hidrolisis del
compuesto(Informe, 2012), es por esto que analizando cada una
de las estructuras de los carbohidratos podemos ver que los
positivos están constituidos por fructosa, aunque la clara de
huevo también contiene, esta dio una coloración rosado y esto
se debe a que la cantidad de fructosa es muy baja.
ENSAYO 9 PRUEBA DE BIAL
TABLA N°9 Reconocimiento de pentosas con la prueba de bial
estructura de éstos da una coloración característica; si el
polisacárido es lineal se obtendrá una coloración azul pero si es
ramificada la coloración obtenida va del púrpura al rojo(Díaz et
al., 2009), particularmente el almidón por la formación de una
coloración azul-violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas
por formación de coloración roja, esto es debido a que se forma
un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por
presentar distintos colores según las ramificaciones que
presente la molécula de polisacárido por ejemplo en el almidón
el yodo se introduce en las espiras de la molécula del almidona,
por lo cual este toma una coloración oscura. El almidón es
coloreado de azul
en presencia de Lugol, debido a una adsorción o fijación del I-
3 sobre las unidades de glucosa de la amilosa.
REACCIONES DE LAS PRUEBAS PARA LA
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

1) PRUEBA DE ACIDO MUSICO

FUENTE: ESTA INVESTIGACION

El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual

forma complejos de coloración sólo con las pentosas. FUGURA 14 REACION CON GALACTOSA

Esta prueba se basa en la formación de furfural, al hacer 2) PRUEBA MOLISCH

reaccionar pentosas con HCl y posteriormente con orcinol. El
furfural es un aldehído electrofilico, en presencia de ácido,
adiciona fenoles (con pérdida de agua) produciendo sustancias
altamente coloreadas, las pentosas originan una coloración azul-
verde(Morales, 2005). Los monosacáridos se subdividen en
pentosas y en hexosas razón por la cual la xilosa y arabinosa que
hacen parte del grupo de pentosas dan resultado positivo en el FIGURA 15 REACION DE MOLISCH CON GALACTOSA
ensayo y tanto las pruebas biológicas como también la glucosa
dieron negativo, en las pruebas biológicas presentan 3) PRUEA DE OSAZONAS
monosacáridos que se encuentran en el grupo de las hexosas.

En los resultados obtenidos al agregar el reactivo bial no se

obtuvo la coloración azul verdosa sino amarilla debido a que el
reactivo estaba recién preparado aunque después se le agrego
HCL para que se lograra dar la reacción no cambio de color pero FIGURA 16 REACCION CON LA FRUCTOSA
teóricamente este cambio de color nos demuestra la presencia
de pentosas. 4) PRUEBA CON REACTIVO FEHLING

ENSAYO 10 PRUEBA CON REACTIVO DE

LUGOL
TABLA N°10 Reconocimiento de polisacáridos con el
reactivo de lugol.
FIGURA 17 REACCION CON LA GLUCOSA

5) PRUEBA DE BENEDICT

FIGURA 18 REACCION CON GALACTOSA

FUENTE: ESTA INVESTIGACION 6) PRUEBA DE BARFOED

El reactivo de Lugol contiene una mezcla de yodo y yoduro, el
yodo es atrapado por los polisacáridos y dependiendo de la
 GONZALES , S., & ARIAS, Y. V. (9 de oct de 2012). Scribd.
Recuperado el 4 de octubre de 2016, de
https://es.scribd.com/doc/109443780/Informe-de-practica-de-
laboratorio-sobre-caracterizacion-e-identificacion-
carbohidratos
FIGURA 19 REACCION CON FRUCTOSA
7) PRUEBA DE SELEWANOFF JARAMILLO, C., BORBOR, A., GARCIA, A., & JOHN
GONGORA. (2013). Slisdeshare. Recuperado el 4 de octubre
de 2016, de http://es.slideshare.net/sextobtres/informe-de-
extraccion-e-identificacin-de-carbohidratos

Díaz, N. A.; Jorrín, J. V; Bárcena, J. a. Determinación

FIURA 20 REACCION CON FRUCTOSA Cualitativa De Azúcares . 2009, 6, 1–9.
8) PRUEBA BIAL
Fallis, A. . Identificación Y Cuantificación de Azucares. J.
Chem. Inf. Model. 2013, 53 (9), 1689–1699.
Informe, N. ESTUDIO DE LAS PROPIEDADES Y
REACCIONES DE LOS CARBOHIDRATOS. 2012.
Morales, F. Reconocimiento de Los Monosacáridos,
FIGURA 21 REACCION DE BIAL Disacáridos Y de Los Polisacáridos. Univ. Nac. Callao 2005, 3,
9) PRUEBA CON LUGOL 1–17.
Paola, K.; Acuña, T. No Title. 2011.
Problema, I. Departamento de Ciencias Básicas Pág. No 1/7.
No. 7, 1–7.

FIGURA 22 REACCION CON ALMIDON

CONCLUSIONES
• Mediante la reacción de benedict pudimos identificar azucares
reductores y comprobar que la reducción que se lleva a cabo es
por la presencia del grupo aldehído.

• Se debe tener muy clara las estructuras de los carbohidratos y

la función de cada uno de los reactivos para poder saber cuál
reaccionara y cual no; como en el caso de la sacarosa con el
reactivo de benedict que arrojó un resultado positivo pero que
teóricamente y mirando su estructura daba negativo ya que esta
carece de carbonos anoméricos libres.

• Gracias a esta práctica se logró comprender e identificar de

manera cualitativa los comportamientos de cada carbohidrato y
la manera cómo reaccionan, las pruebas de Acción reductora
nos ayudaron a seleccionar los carbohidratos reductores a partir
de la coloración rojiza que obtuvieron.

 Se concluye que el reactivo de barfoed no solo identifica

azúcares monosacáridos sino que también ayuda a diferenciar
entre monosacáridos o disacáridos, la glucosa que es un
monosacárido reaccionó rápidamente, y la maltosa es un
disacárido ya que tuvimos que esperar más de 5 minutos para
empezar a observar la formación del precipitado.

Bibliografía

ESPINOSA, H. N. (2013). ACADEMIA. Recuperado el 4 de

OCTUBRE de 2016, de
https://classroom.google.com/u/2/c/MTYxNjA4Njk0OVpa