Metodología

La metodología a seguir es la del estudio de los microorganismos presentes en

el ambiente cercano a los depósitos de basura antes como después de la
colocación de las tapas de material impermeable.
En la primera etapa se deberá hacer el preparado de los medios de cultivo para
recolectar dichos microorganismos como nos enfocaremos en bacterias se requirió
seguir con el método estándar para dicho seguimiento .el cual da las siguientes
pautas:
Preparación de los medios de cultivo: “Agar nutritivo”
1. Lo primero que se debe hacer es descontaminar de microorganismos
presentes en las placas Petri y tubos de ensayo que contendrán los medios de
cultivo, para ello se tuvo que dejar el mismo en el horno durante1:30 horas.
2. Una vez esterilizados los recipientes del cultivo se pasara a pesar el agar
nutritivo (con un papel kraft) de acuerdo con las especificaciones del frasco,
que eran 28gr/lt en experimento se requerían de 100ml por lo que se pesaron
2.8gr.
3. En una probeta se verterán 100ml de agua destilada con el uso de una piseta.
Una vez medido el volumen de agua destilada en la probeta se verterá en un
vaso de precipitado. Los 2.8gr de Agar Nutritivo se disolverán en este vaso.
4. El vaso de precipitado con la disolución de Agar nutritivo se pone en la cocina
eléctrica, se debe calentar de manera uniforme por eso es que se usa una
bagueta, hasta una temperatura entre 60-80°C para ello se emplea un
termómetro de mercurio. Los guantes de asbesto se usan por tratarse de la
manipulación de un líquido caliente.
5. Por último se verterá la disolución caliente en las placas Petri y se deja enfriar.

Tomas de muestra del ambiente

1. Se debe exponer la placa Petri con el agar nutritivo al ambiente a estudiar y
dejar ahí durante un lapso de 15 minutos.
2. Se recomienda tomar la medida de la temperatura y el flujo de personas si es
que se requiere un estudio detallado.
Cultivo de los microorganismos
1. Se deberá colocar la placa Petri invertida en la estufa con una temperatura de
37°C durante el periodo de al menos de 2 días para poder presenciar la
aparición de colonias definidas
Conteo de colonias
1. Se deberá utilizar un equipo llamado contador de colonias el cual consiste en
un aparto de iluminación y anexado a este una lupa con movimiento frontal
para regular la amplificación de la colonia a observar.
2. Se deberá tener en cuenta de que el agar nutritivo puede verse afectado por el
calor emitido por la luz que incide en la placa Petri por tal motivo las
observaciones deben ser realizadas por cierto intervalo de tiempo para que el
agar no se derrita.
3. Las vistas morfológicas de la colonia como diámetro de la colonia,carácter
optico, color y contornos son claramente definidas con el uso de este equipo,
sin embargo la elevación de la colonia se podrá apreciar de mejor manera si es
vista a contra luz.
4. Se requerirá de un contador digital para llevar la cantidad de colonias
distribuidas en los 4 sectores que ofrece el contador de colonias; cada sector
 se encuentra grillado y es de mucha ayuda para evitar confusiones al momento
de hacer el conteo.
5. Una vez obtenida el número total de colonias solo basta con dividirla entre el
área total del contador de colonias para tener una densidad de unidades
formadora de colonias por centímetro cuadrado UFC /cm2

Lo de abajo podría
ayudarte a la
invension de datos
 I. RESULTADOS:
Al procesar los datos de acuerdo con principios o leyes establecidas se obtienen los
resultados que deben presentarse preferiblemente en tablas.

DATOS DE LABORATORIO
a) Datos del Grupo 01:

Tabla 1
Grupo Placa N°1 Placa N°2 Placa Placa N°4
N°3
Estéril Estéril NO Estéril
Estéril

1 Ambiente baño Sector A Sector B Sector Sector D NO abrir NO abrir

varones FIA C
Pelo Huella I. NO
(2do piso) I. estéril
Estéril

N° de 12 4 35 1 1 3 2
Colonias

Tamaño X=6mm , x=1mm Diámetro X=0.8m X1=2 X1=1mm X1=1mm X1=1mm(2)

1mm m(33) mm (3)
X=3mm, x=1mm
X=3mm
X=2.8mm, x=2mm (2)
X=4mm, x=1.4mm
X=1mm, x=2mm
X=2mm, x=1.5mm

Margen o Liso Liso Liso Liso Liso Liso Liso

borde

Elevación 9 convexas Todas son Todas plana plana plana plana

planas son
3 planas planas
 Pigmentación Todas de color Todos son Todos crema Crema Blanco Blanco
crema de color son de
blancos color
crema

C. Óptico opacas opacas opacas opaca opaca Opacas 1 translucido

1 opaco

Fuente: Grupo 1

Tabla 2

Ambiente Baño de hombres 1 piso

Características del ambiente El piso se encontraba húmedo al
momento de exposición de la placa.
Flujo constante de personas en el
baño, específicamente 10 personas
mientras estuvo la placa.
Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días 15minutos / 2 días
expuestos
Tipo de Agar Agar Nutritivo
Cantidad de personas Flujo constante de personas
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
Fuente: Grupo 1
Tabla 3

b) Datos del Grupo 03:

Tabla 7

GRUPO 3 Placa 1 Placa 2

Laboratorio
de S- A S-B S-C S-D
microbiología pelo huella inoculador inoculador
estéril no estéril

Número de 52 53 24 2 6
colonias
 Tamaño X=1mm(31) X=1mm(16) X=1mm(4) X=2mm(2) X=1mm(1)
X=2mm(14) X=0.5mm(37) X=0.5mm X=2mm(5)
(20)
X=3mm(7)

Margen o Liso(26) Lisas (53) Liso Ondulantes(2) Ondulantes(6)

borde lobular(13) circular(3)
ondulante(13)
Ondulantes
(21)

Elevación Todas planas Planas (53) Planas (24) Planas (2) Planas (4)
Convexas(2)

Pigmentación Blancas(36) Todas son Todas son Blanco (2) Blancas(6)

Amarillas(14) blancas blancas
Naranjas(2)

Características Opacas Opacas(17) Opacas(24) Opaca(1) Opaca(2)

ópticas Traslucidas Traslucidas(36)
Traslucida(1) Traslucida(4)

Fuente: Propia elaboración

Tabla 8

Grupo Número Tamaño Margen o Elevación Pigmentación Características

3 de borde ópticas
colonias

Placa 29 X=1mm(8) Liso(21) Planas(22) Blancas(29) Opacas(26)

3 lobular(16) Convexas(7) Traslucidas (3)
X=2mm(14)
ondulante(9)
Estéril
X=3mm(3)
X=4mm(4)

Placa 39 X=1mm(10) Lisas Planas Blancas(37) Opacas

 4 X=2mm(20) Lobular Convexas Traslucidas
No X=3mm(7) Ondulantes
estéril
X=4mm(2)

Para la placa 1
Tiempo de exposición 15 minutos desde la 1:00pm a 1:15pm.
días de incubación:2dias del martes 20 al 27 de marzo
Días de exposición del martes 20 al jueves 22 de marzo.
Número total de personas en el laboratorio:32
Presencia de algunos mosquitos
Temperatura:25°C
ventilación escasa (puerta permaneció cerrada durante la exposición)
Ubicación: Cuadriculo rojo sobre la mesa
ENTRADA AL LABORATORIO

II. CONCLUSIONES:
Tipos de microorganismos encontrados
 Bacterias
 Levadura
 Penicillium
 Levaduras

 Las bacterias planas y de borde liso predominan en el ambiente del baño de

varones del primer piso.
 La placa 3 del grupo 3 fue la placa estéril con mayor formación de colonias
bacterianas, 29 en total.
 De la comparación del número de bacterias halladas del grupo 1 con el grupo 3
se desprende que existe una mayor cantidad de bacterias en el laboratorio de
microbiología las cuales fueron 52 contra las 12 halladas en el baño de varones
del primer piso de la FIA.
 Se concluye que el laboratorio de microbiología está más contaminado
bacteriológicamente que el baño de varones del primer piso.

III. RECOMENDACIONES:
 El tiempo de esterilización de placas Petri debe de ser de una hora y media.
 Es importante que al momento de manipular las placas Petri con el medio de
cultivo se tenga proximidad al mechero pues este genera un campo aséptico
en el cual se trabajara de mejor manera.
  El dato de elevación de una colonia es uno en los que se debería tener cuidado
pues no siempre se obtiene a la primera vista.(se ve mejor con la placa Petri de
cara a la luz)
 Los materiales como las bombillas de succión deben ser manipuladas con
cuidado pues al succionar se generan pequeñas burbujas de aire y guardar
gotitas de un líquido contaminado de un proceso anterior que pueden contener
microorganismos y ser depositados por descuido en un medio que debería ser
estéril en teoría.
 No abrir las placas Petri al momento de contar el número de colonias.
 Es importante en el conteo de colonias en placas Petri anotar a todos los
microorganismo de forma individual de modo que al analizar el tamaño,
pigmentación, elevación y caracteres ópticos tengamos un listado ordenado.
Recomendaciones para la preparación de medios de cultivo
(no es el objetivo del experimento pero podría influir en los resultados ya que es
donde se formaran las colonias)
 La preparación de los medios debe tener las cantidades exactas de gramos
sugeridas en las especificaciones de los frascos, para que de esta manera se
pueda contar con medios de cultivo con mayor calidad. Y de esta manera los
microorganismos tengan mayor cantidad de nutrientes para su crecimiento.
 Los gramos de los medios de cultivo tienen que ser extraídos de sus
recipientes con diferentes espátulas esterilizadas.
 El uso de los guantes de asbesto es una medida de precaución al preparar los
medios de cultivo pues en los 3 casos las disoluciones se calentaron a
temperaturas entre 60-80°C.

Placa 1:
Contenido:
Agar nutritivo expuesto al ambiente del
laboratorio de microbiología
Placa 2:
Contenido: agar nutritivo
Placa dividida en 4 regiones:
Sección A: Cabello
Sección B: Huella dactilar
Sección C: Placa estéril
Sección D: Placa no estéril

Placa 3:
Contenido: agar nutritivo
Placa estéril

Placa 4:
Contenido: agar nutritivo
Placa estéril