FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS FISICAS Y AGROPECUARIAS

BIOQUÍMICA BÁSICA 16162

INFORME DE LABORATORIO

ANTIVIDAD ENZIMÁTICA
BARRETO ALEJANDRA1 -
NARANJO CRISTIAN2 -
RUEDA ANDREA3 - 16332015

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA BÁSICA

UNVERSIDAD DE SANTANDER – UDES
28 marzo, 2019.

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RESUMEN

Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estructural, que catalizan

reacciones químicas. Allí las enzimas actúan sobre sustratos dando como resultado
productos. Se llevaron a cabo diversos procesos, logrando determinar en cada uno;
como y frente a que, se da la especificidad enzimática. Uno de estos fue, la labilidad
térmica; donde por medio de la aplicación de la enzima Amilasa (saliva), junto con
solución de Almidón, se someten a diferentes temperaturas por el transcurso de un
tiempo, seguido de esto se aplican dos pruebas; con los reactivos de Lugol y Feling,
con el fin de observar la influencia del cambio de temperatura sobre la actividad de
la enzima, seguido, se empleó la influencia de pH sobre la actividad enzimática;
donde se somete la enzima amilasa a diferentes concentraciones de pH, por
consiguiente se efectúa la Especificidad enzimática en las enzimas amilasa y
sacarasa sobre diferentes sustratos (almidón y sacarosa), determinando de esta
manera en que combinación se presenta reacción quimica y por último se realiza la
determinación de la actividad de la catalasa de la sangre, donde se ejerce la
reacción de la catalasa con el peróxido de hidrogeno obteniendo a su vez H2O + 2
O2 . Los resultados fueron los esperados, efectuando así, una práctica exitosa.

1.INTRODUCCIÓN.
catalizada por una enzima, los efectos que
El termino de cinetica enzimática, implica el pueden tener algunos factores como los
estudio de la velocidad de una reaccion inhibidores, uno de los principales estudios
que se realizan en una enzima es medir el
efecto en la velocidad de la reaccion cuando
se modifican las concentraciones del sustrato,
se mantienen constantes la concentracion de
enzima el ph, la fuerza ionica del medio, la
temperatura, etc.
todas las células incluyendo
microorganismos, organismos superiores
producen enzimas. Su acción está
estrechamente ligada con las reacciones
metabólicas la mayoría de las
transformaciones químicas requeridas para
mantener activas a las células tardarían
mucho tiempo en efectuarse o simplemente
no procederían si no estuvieran presentes las
enzimas.
La enzima es generalmente más grande que el
sustrato la combinación de la enzima el
sustrato depende normalmente de fuerzas
débiles tales como puentes de hidrógeno
fuerzas de van der waals e interacciones
hidrófobicas para unir la enzima con el
sustrato La pequeña parte de la enzima a la
que se une el sustrato se conoce como el sitio
activo de la enzima.
En forma general cada molécula de enzima es
capaz de transformar en cada segundo de 100
a 1000 moléculas de sustrato en productos El
número de estas moléculas transformadas en
producto por molécula de enzima en cada
segundo se conoce como número de
recambios Algunas enzimas se asocian con
estructuras de carácter no proteico'
denominadas cofactores' que son necesarias
para su funcionamiento. Entre ellos
encontramos iones metálicos como el Zn.2 o
el Fe.2 también moléculas orgánicas que se
denominan coenzimas.
FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA
Diferentes factores ambientales pueden
afectar a la actividad enzimática.
Destacaremos dos: el pH y la temperatura.
EFECTO DEL pH:
El pH es otro factor que influye en la actividad
enzimática, debido a que el pH influye en la
ionización de los grupos funcionales de los
aminoácidos que forman la proteína
enzimática. Cada enzima realiza su acción
dentro de un determinado intervalo de pH,
dentro de este intervalo habrá un pH óptimo
donde la actividad enzimática será máxima.
Por debajo del pH mínimo o por encima del
pH máximo el enzima se inactiva ya que se
desnaturaliza. En la mayoría de las enzimas el
pH óptimo está próximo a la neutralidad,
aunque hay excepciones. La mayoría de los
enzimas presentan un pH óptimo para el cual
su actividad es máxima; por encima o por
debajo de ese pH la actividad disminuye
bruscamente. Este efecto se debe a que, al ser
los enzimas de naturaleza proteica, al igual
que otras proteínas, se desnaturalizan y
pierden su actividad si el pH varía más allá de
unos límites estrechos. De ahí la conocida
importancia biológica de los sistemas
tampón.
EFECTO DE LA TEMPERATURA:
Al igual que ocurre con la mayoría de las
reacciones químicas, la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas se
incrementa con la temperatura. La variación
de la actividad enzimática con la temperatura
es diferente de unos enzimas a otros en
función de la barrera de energía de activación
de la reacción catalizada. Sin embargo, a
diferencia de lo que ocurre en otras
reacciones químicas, en las reacciones 2. RESULTADOS.
catalizadas por enzimas se produce un brusco
descenso de la actividad cuando se alcanza
una temperatura crítica. Este efecto no es
más que un reflejo de la desnaturalización
térmica del enzima cuando se alcanza dicha
temperatura. La Temperatura influye en la
actividad enzimática. En general por cada
10ºC que aumente la temperatura la
velocidad de la reacción aumenta de 2 a 4
veces. Esta regla se cumple hasta que la
temperatura alcanza un valor máximo (T°
óptima) donde la actividad es máxima. Esto se
debe a que al aumentar la T° aumenta el
movimiento de las moléculas.

Se evalúa la influencia de estos factores

en la reacción catalizada por enzimas con
la finalidad de determinar los
intermediarios en una reacción y el papel
que juegan en la reacción enzimática, es
decir, para predecir mecanismos de
reacción. Es esencial entender estos
mecanismos para desarrollar nuevas
herramientas moleculares, por ejemplo,
para combatir enfermedades en las que
se conoce a la enzima que la produce.
También es usual medir la actividad
enzimática con diferentes sustratos para
entender su especificidad o bien, medir la
actividad de la enzima de diferentes
tejidos u organismos para entender cómo
las diferencias en actividad están
relacionadas con la función y/o la
fisiología del organismo del que
proceden. El objetivo principal de esta
práctica es analizar y determinar los
principios del análisis cinético y los
factores que pueden afectar dicho
proceso.
3. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE
RESULTADOS.

4. CONCLUSIONES.
5. BIBLIOGRAFIA.