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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO
INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA S ALUD

ÁREA ACADÉMICA DE MEDICINA
PROGRAMA EDUCATIVO
LICENCIATURA EN MÉDICO CIRUJANO
MANUAL DE PRÁCTICAS DE
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
3ER SEMESTRE
PROGRAMA EDUCATIVO DE LA LICENCIATURA EN MÉDICO CIRUJANO
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
FECHA DE APROBACIÓN DEL MANUAL DE PRÁCTICAS, POR LA ACADEMIA DE

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA.
30 DE MAYO DEL 2016
NOMBRE DE QUIENES PARTICIPARON EN LA ELABORACIÓN:

NOMBRE FIRMA
DR. MARCO ANTONIO BECERRIL FLORES
DRA. CLAUDIA ESPÍNOLA SAMPERIO
DR. JOSÉ LUIS IMBERT PALAFOX

MTRA. ARELI CRUZ CASTAÑEDA
VO. BO. DEL PRESIDENTE Y SECRETARIO DE LA ACADEMIA:

NOMBRE FIRMA
PDTE. DR. MARCO ANTONIO BECERRIL FLORES
SRIO. DR. HORACIO DORANTES PEÑA
VO. BO. DEL JEFE DEL ÁREA ACADÉMICA DE MEDICINA:

NOMBRE FIRMA
MÉDICO CIRUJANO ESPECIALISTA LUIS CARLOS ROMERO
QUEZADA
FECHA DE LA ÚLTIMA REVISIÓN Y/O ACTUALIZACIÓN:

30 DE MAYO DEL 2016
DIRECTORIO
HUMBERTO AUGUSTO VERAS GODOY
2
RECTOR DE LA UAEH
ADOLFO PONTIGO LOYOLA

SECRETARIO GENERAL DE LA UAEH
JOSÉ MARÍA BUSTO VILLARREAL

DIRECTOR DEL ICSA
ARTURO FLORES ÁLVAREZ

DIRECTOR GENERAL DE SERVICIOS ACADÉMICOS
OMAR ARTURO DOMÍNGUEZ RAMÍREZ

DIRECTOR DE LABORATORIOS Y TALLERES
JORGE CASTELÁN MELÉNDEZ

SECRETARIO DEL ICSA
LUIS CARLOS ROMERO QUEZADA

JEFE DEL ÁREA ACADÉMICA DE MEDICINA
ÍNDICE
A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRÁCTICAS. ............................................................................ 5
1.- Introducción. .................................................................................................................................. 5
3
2.- Competencias. ................................................................................................................................ 5

3.- Programa del Sistema de Prácticas y Actividades Extramuros. ...................................................... 7
B.- NORMAS DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS, LINEAMIENTOS Y MANUALES. ....................... 9
1.- Reglamento de Laboratorios. ......................................................................................................... 9
2.- Medidas de Seguridad en Laboratorios, Talleres, Clínicas y Actividades Extramuros. ................. 14
3.- Lineamientos de Seguridad para Trabajar en Laboratorios, Clínicas, Talleres y Actividades
Extramuros. ....................................................................................................................................... 15
4.- Lineamientos de Seguridad del Área Académica de Farmacia. .................................................... 16
C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA PRÁCTICA. .................................................. 19
a.- Cuadro de Normas y Referencias de Seguridad de la Práctica. .................................................... 19
b.- Politica Ambiental Universitaria y Cuadro de Disposición de Residuos. ....................................... 23
D.- CONTENIDO DE CADA PRÁCTICA EN PARTICULAR. .............................................................. 6
Práctica No. 1: Esterilización y muerte celular .................................................................................. 26
Práctica No. 2: Aislamiento de microorganismos .............................................................................. 32
Práctica No. 3: Identificación microbiana mediante morfología macro- y microscópica ................. 37
Práctica No. 4: Identificación microbiana mediante pruebas bioquímicas y antibiograma……………41
Práctica No. 5: Diagnóstico Serológico .............................................................................................. 51
Práctica No. 6: Exámenes coproparasitoscópicos y observación de amebas .................................... 56
Práctica No. 7: Identificación de protozoarios flagelados, ciliados y apicomplexa ............................ 61
Práctica No. 8: Observación de Céstodos y Tremátodos .................................................................. 65
Práctica No. 9: Nemátodos intestinales y extraintestinales .............................................................. 69
Práctica No. 10: Artrópodos de importancia médica......................................................................... 73
Práctica No. 11 Identificación de hongos .......................................................................................... 76
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A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRÁCTICAS.
1.- Introducción.
Las prácticas de Microbiología permiten al alumno reforzar los conocimientos

que se estudian en teoría de forma más clara ya que la observación de los
microorganismos y las técnicas de laboratorio para el diagnóstico y su
investigación a través de la realización de experimentos ayudan al estudiante
de la licenciatura de Médico Cirujano a desarrollar las competencias tanto
genéricas como específicas que cumplen con el perfil de egreso de la carrera.
2.- Competencias
El desarrollo de las siguientes competencias en el estudiante de la licenciatura
de Médico Cirujano permitirá cumplir con los objetivos establecidos de la
carrera.
Competencias Genéricas
a) Comunicación. Desarrollar en los estudiantes la capacidad de la

comunicación en español y en inglés interactuando entre ellos con el trabajo
en equipo pues se formarán equipos de trabajo. Indicador 3 del nivel 3 de
aprendizaje: Se comunican de manera crítica para realizar análisis,
diagnóstico, diseño, planeación, ejecución y evaluación.
b) De Formación: Integrar los contenidos para la solución de problemas a
través del empleo de métodos y estrategias centradas en el aprendizaje
(aprendizaje basado en problemas, cooperativo, colaborativo, significativo y
proyectos, entre otros) con autonomía y con valores que se expresen en
convicciones, así como su compromiso con la calidad en su modo de
actuación de acuerdo a los estándares establecidos. Con el indicador 3 del
nivel 3 de aprendizaje: Integran y aplican los métodos de estudio o
investigación y procedimientos (convencionalismos, tendencias, secuencias,
clasificaciones, criterios, metodología en técnicas, métodos y
procedimientos).
c) Pensamiento crítico: Aplicar el pensamiento crítico y autocrítico para
identificar, plantear y resolver problemas por medio de los procesos de
abstracción, análisis y síntesis, procesando la información procedente de
5
diversas fuentes que permitan un aprendizaje significativo y una

actualización permanente. Con los indicadores 4 del nivel 2 (Integran en el
pensamiento un conjunto de abstracciones.) y el 1 del nivel 3 (Generalizan
la solución de problemas).
d) Competencia de Creatividad: Aplicar la creatividad para detectar, formular
y solucionar problemas de forma original e innovadora, a través de la
integración de contenidos y mediante el uso de estrategias didácticas que
generen el pensamiento divergente, problémico, investigativo, cooperativo,
innovador, entre otras. Los alumnos desarrollan un proyecto de investigación
donde desarrollan esta competencia con los indicadores 2 del nivel 1
(Generan ideas con facilidad); y el 6 del 1 (Identifican nuevas alternativas de
solución); así como el indicador 1 del nivel 3 (Solucionan problemas
utilizando ideas originales e innovadoras).
e) Liderazgo colaborativo: Aplicar el liderazgo colaborativo para identificar y
desarrollar ideas y/o proyectos del campo profesional y social por medio de
los procesos de planificación y toma de decisiones, asegurando el trabajo
en equipo, la motivación y la conducción hacia metas comunes. Con los
indicadores 3 del nivel 2 (Estructuran la división del trabajo). Indicador 3 del
nivel 3 (Generan en el equipo de trabajo un estado de ánimo de superación
y logro de metas, y detectan las fortalezas y debilidades de los miembros de
su equipo para lograr un alto desempeño).
f) Competencia de Uso de la tecnología: Aplicar las tecnologías de la
información y la comunicación como herramienta de apoyo para la solución
de problemas del campo profesional y social a través del uso apropiado de
recursos y metodologías para el desarrollo del aprendizaje, la comunicación,
la formación disciplinar y la investigación logrando una eficiencia en la
búsqueda y procesamiento de la información y la comunicación. Con el
indicador 1 del 2 Desarrollan apropiadamente las aplicaciones específicas
del aprendizaje, la comunicación, el área disciplinar y la investigación como
herramientas de apoyo.
Específicas:
Solo se desarrollara la Competencia “Bases científicas de la Medicina:
1. Proporcionar los conocimientos y principios básicos y tecnológicos de la
medicina que le permitan al alumno comprender el proceso salud enfermedad.
Con los indicadores, 2 del nivel 1 (Analiza los mecanismos moleculares,
celulares, bioquímicos y fisiológicos que mantiene la homeostasis corporal en
escenarios áulicos y reales; el indicador 2 del 2 (Identifica las anormalidades en
estructura y función y respuesta corporal que ocurren en las enfermedades en
escenarios áulicos y reales).
6
3.- Programa del Sistema de Prácticas y Actividades Extramuros.

PROGRAMACIÓN
UNIDAD NOMBRE ÁMBITO
NÚM. DE LA
PROGRAMÁTIC SESIONES DE LA DE
DE PRÁCTICA PRÁCTICA
A PRÁCTICA DESARROLLO
(SEMANA)
Esterilización y muerte Laboratorio de
1 I 1 Microbiología y 3
celular
Parasitología
Aislamiento de Laboratorio de
2 I 2 Microbiología y 4y5
microorganismos
Parasitología
Identificación Laboratorio de
microbiana mediante Microbiología y
3 II 1 Parasitología 5y6
morfología macro- y
microscópica
Pruebas bioquímicas y Laboratorio de
4 II 2 Microbiología y 7y8
antibiograma
Parasitología
Laboratorio de
5 III 1 Diagnóstico Serológico Microbiología y 9
Parasitología
Aislamiento de ADN de Laboratorio de
6 IV 1 Microbiología y 10
Microorganismos
Parasitología
Exámenes Laboratorio de
coproparasitoscópicos Microbiología y
6 IV 1 Parasitología 11
y observación de
amebas
Identificación de Laboratorio de
protozoarios flagelados.
Parasitología
Identificación de Laboratorio de
ciliados y apicomplexa
Parasitología
Laboratorio de
9 IV 1 Céstodos y Tremátodos Microbiología y 14
Parasitología
Nemátodos intestinales Laboratorio de
y extraintestinales
Parasitología
7
Artrópodos de Laboratorio de
importancia médica
Parasitología
Laboratorio de
Identificación de
12 V 1 Microbiología y 17
hongos
Parasitología
8
B.- NORMAS DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS, LINEAMIENTOS Y MANUALES.

1.- Reglamento de Laboratorios.
CAPÍTULO III
De los usuarios
Artículo 18. Se consideran corno usuarios de los laboratorios:
I. Los alumnos de la Universidad que, conforme a los planes y programas
de estudio de los diferentes niveles educativos, requieran de este apoyo.
II. El personal académico de la Universidad que requiera apoyo de los
laboratorios.
III. Los estudiantes o pasantes que se encuentren realizando tesis o
prácticas profesionales, prestatarios de servicio social o colaborando en
actividades académicas.
IV. Los profesores visitantes que requieran de la utilización o Servicios de
los laboratorios de acuerdo a convenios establecidos.
V. Las personas que, por causa académica justificada, autorice el Director
de la Unidad Académica.
Artículo 19. Los usuarios alumnos de la Universidad deberán acreditar esta calidad
así como el derecho a cursar la asignatura con la que se relaciona la práctica y/ó
proyecto a realizar, de acuerdo a los programas educativos vigentes.
Artículo 20. Tratándose de prácticas de asignatura de los planes y programas de
estudio vigentes en que deba asistir el grupo, éste quedará a cargo del profesor titular
del mismo, quien lo controlará y asesorará. En caso de que el profesor no asista, la
práctica no podrá realizarse.
Artículo 21. Los usuarios académicos de la Universidad deberán acreditar esta calidad
ante el Responsable de Laboratorios, así como tener aprobados los proyectos de
investigación.
Artículo 22. Los usuarios estudiantes a que se refiere la fracción III del artículo 18 de
este reglamento podrán hacer uso del laboratorio, clínica o taller de que se trate, con
la acreditación respectiva y cuando cuenten con la asesoría del director de tesis o del
investigador responsable del proyecto en el que participan, previo registro ante el Jefe
de Laboratorios, del protocolo de investigación aprobado y con el visto bueno del
Director de la Unidad Académica.
Artículo 23. Los profesores visitantes nacionales o extranjeros deberán acreditar su
pertenencia a la institución que representan, así como los programas y convenios con
los que se relaciona la actividad por realizar y tener aprobados los proyectos de
investigación.
9
CAPÍTULO IV
De la operación y uso
Artículo 24. Los laboratorios permanecerán abiertos en el horario definido por cada
Unidad Académica. Cualquier uso fuera del horario de operación, deberá ser
autorizado por el director de la Unidad Académica.
Artículo 25. Durante el tiempo de operación de los laboratorios, solamente tendrán
acceso para su uso, en los horarios previamente establecidos:
I. El personal adscrito a los mismos.
II. Los usuarios a quienes se refiere el artículo 18 de este reglamento.
Artículo 27. Tras la adquisición o pérdida de algún equipo o mobiliario de laboratorio,
el Jefe de Laboratorio tiene la obligación de notificar inmediatamente su alta o baja
dentro del inventario. En caso de pérdida, se procederá a levantar un acta informativa
y se seguirá el procedimiento legal que corresponda.
Artículo 28. Cada laboratorio deberá contar con un archivo general, manuales de
prácticas y de operación, una bitácora actualizada de servicios prestados, prácticas o
proyectos realizados, otra bitácora por cada equipo que así lo requiera, y una copia
del inventario interno actualizado, que serán resguardados por el Responsable del
Laboratorio.
Artículo 29. Las llaves de las puertas de acceso al laboratorio y de las demás áreas
físicas del mismo, estarán en poder del Responsable, y se contará con un duplicado
en la dirección de la Unidad Académica.
Artículo 30. Las mesas de trabajo de cualquier laboratorio, clínica y taller, serán
usadas mientras dure la práctica, por lo que no se podrá dejar material en ellas por
mayor tiempo del autorizado. En el caso de tratarse de procesos continuos que no se
puedan interrumpir, se comunicará al Responsable.
Artículo 31. Los espacios físicos destinados a cubículos u oficinas dentro de los
laboratorios, así como el mobiliario, equipo y materiales para el mismo fin, sólo podrán
ser utilizados por el personal adscrito al laboratorio.
Artículo 32. Durante su estancia en los laboratorios, toda persona se abstendrá de
fumar, de consumir alimentos, del uso de teléfono celular y radiolocalizador. La no
observancia a esta disposición causará la suspensión del derecho al uso de los
laboratorios.
Artículo 33. Los equipos, herramientas, reactivos y materiales del laboratorio, que se
empleen durante una práctica o prestación de servicios, quedarán bajo la
responsabilidad directa del usuario que los solicitó. El solo hecho de hacer el vale
correspondiente no da derecho al usuario a sustraerlo de la Unidad, ni a conservarlo
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en uso exclusivo más del tiempo autorizado; salvo autorización especial y por escrito
del director de la Unidad Académica.
Artículo 34. Todo material y equipo solicitados deberán ser devueltos al Responsable
del Laboratorio, quien tiene la obligación de revisar que estén completos y en buen
estado. En caso contrario, registrará este hecho en la bitácora del laboratorio, o del
equipo específico, notificando inmediatamente al Jefe de Laboratorios, quien hará un
convenio con el o los alumnos para fincar la responsabilidad y acordar la modalidad
de la reparación de la pérdida o daño, lo cual será informado a la dirección de la Unidad
Académica.
Artículo 35. Toda pérdida o daño al equipo o del material causados por el usuario serán
repuestos o reparados por él mismo, en especie o pagos, a través de depósito bancario
o directo en la Coordinación de Administración y Finanzas, en un lapso no mayor de
quince días hábiles, contados a partir de la fecha del incidente. De no cumplir lo
anterior, se le suspenderá el permiso para utilizar los laboratorios, clínicas o talleres y
se sujetará a lo dispuesto por la legislación universitaria.
Artículo 36. La persona que haga mal uso del equipo, materiales o instalaciones, o que
presente un comportamiento indisciplinado, será amonestada o se le suspenderá
temporal o definitivamente el permiso de uso de los laboratorios, clínica o taller, según
la gravedad o frecuencia con que dicha acción se realice, y de acuerdo a lo establecido
en el reglamento interno de la Unidad Académica correspondiente.
Artículo 37. Es obligación del Responsable del Laboratorio, supervisar el cumplimiento
de las reglas de seguridad, contar con carteles, cuadros u otros señalamientos. Será
su responsabilidad revisar y actualizarlos periódicamente.
Artículo 38. Todo usuario alumno que no utilice o que haga mal uso de los materiales
de protección diseñados para trabajar en el área o que ponga en peligro a otros
usuarios a través de su comportamiento inadecuado, se hará acreedor a las siguientes
sanciones:
I. Será amonestado verbalmente. De no corregir de inmediato su actitud, le
será suspendida la autorización para seguir trabajando ese día.
II. En caso de reincidir, será suspendido por el resto del semestre.
Artículo 39. El director de la Unidad Académica aplicará las sanciones referidas en el
artículo 38, según la gravedad de la falta.
Artículo 40. Respecto a los usuarios académicos de la Universidad y a los profesores
visitantes que infrinjan las normas de seguridad y disposiciones de este reglamento, la
Dirección de la Unidad Académica comunicará a la Secretaría General las faltas
cometidas para que, en su caso, se apliquen las sanciones que procedan.
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Artículo 41. Ningún equipo, accesorio, material, reactivo o mobiliario podrá ser
sustraído de los laboratorios, sin la autorización de la dirección de la Unidad
Académica, debiendo el Jefe de laboratorios, vigilar y registrar, de acuerdo a los
procedimientos establecidos por la Dirección de Recursos Materiales cualquier
mudanza autorizada, fuera o dentro de la unidad académica.
Artículo 43. El manejo de reactivos y materiales dentro de los laboratorios deberá
sujetarse a las normas nacionales e internacionales que en materia de seguridad e
higiene estén establecidas.
Artículo 44. Toda información técnica perteneciente a los equipos y accesorios de un
Laboratorio es parte integral del mismo, y deberá estar disponible para su consulta en
el lugar al que pertenecen.
Artículo 45. Cada equipo mayor deberá contar con una bitácora de operación propia,
la cual será un libro de pasta dura, con hojas foliadas y resistentes, y se ubicará
permanentemente junto al equipo correspondiente; cada vez que sea utilizado un
equipo, el usuario deberá registrar en ella:
I. Nombre y firma;
II. Fecha;
III. Proyecto, práctica o servicio al que corresponde el uso;
IV. Hora de inicio del uso del equipo;
V. Hora de terminación del uso del equipo;
VI. Número de muestras y material usados;
VII. Unidad académica o dependencia externa de adscripción; y
VIII. Observaciones generales.
CAPÍTULO V
De los servicios
Artículo 47. Se consideran servicios prestados por los laboratorios: a toda actividad en
apoyo a la docencia e investigación, así como asesoría, capacitación, análisis,
fabricación y preparación de muestras, evaluación técnica de procedimientos
experimentales, de control, medición o calibración que se prestan a la comunidad
universitaria o a los sectores externos a la misma.
Artículo 48. Los servicios de los laboratorios serán de dos tipos: internos y externos.
Artículo 49. Los servicios internos serán gratuitos, y son aquellos servicios prestados
a usuarios internos que tengan por objeto cumplir con alguna de las funciones
sustantivas de la Universidad, siempre y cuando no represente un gasto no autorizado
previamente.
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Artículo 50. Tratándose de los servicios a los usuarios a que se refiere la fracción III
del artículo 18 del presente reglamento, los laboratorios, clínicas y talleres, les
proporcionarán aquellos que son de carácter general; en tanto que el costo de
reactivos o materiales específicos relacionados con las tesis de titulación, los cubrirá
la Universidad, siempre y cuando se tenga la autorización previa del presupuesto
respectivo.
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2.- Medidas de Seguridad en los Laboratorios, Talleres, Clínicas y

Actividades Extramuros.
Cuando se trabaja en un Laboratorio o Taller, siempre existe el peligro potencial de
sufrir un accidente durante el manejo de las sustancias, materiales y/o maquinaria
que se utilizan, EL LABORATORIO O TALLER ES UN LUGAR PARA TRABAJAR
CON SERIEDAD, TODOS DEBEMOS TOMAR CONCIENCIA DE LA IMPORTANCIA
DE CONDUCIRNOS CON SEGURIDAD. RECUERDA QUE:
Materiales y maquinaria + Descuido= ¡ACCIDENTE!
Por lo que deberás considerar las siguientes recomendaciones:
1. Es obligatorio el uso de bata de algodón y lentes de seguridad
2. Tu lugar de trabajo siempre debe estar LIMPIO y ORDENADO.
3. Siempre se debe trabajar en un lugar bien ventilado y con iluminación suficiente
4. Todo el material que vayas a emplear debe estar perfectamente limpio, y en buenas
condiciones tanto al principio como al final del experimento, con el propósito de
evitar incidentes durante la práctica
5. Si tu cabello es largo, deberá estar recogido para evitar accidentes, especialmente
cuando se trabaja con mechero y/o maquinaria, asimismo los zapatos deben ser
cómodos y no tener descubiertos los pies
6. NO se debe COMER ni FUMAR EN EL LABORATORIO y/o TALLER
7. QUEDA PROHIBIDA LA VISITA DE PERSONAS AJENAS A LAS SESIONES DE
LABORATORIO y/o TALLER
8. Deberá leer cuidadosamente su práctica, antes de cada sesión de laboratorio/o
Taller, así aprovecharás mejor tu tiempo y evitarás errores
9. Para cada práctica deberá revisar cuidadosamente las medidas de seguridad
específicas, sobre el manejo DE LOS MATERIALES Y LA MAQUINARIA A
UTILIZAR, así como la toxicidad de los reactivos a utilizar
10. Cuando trabaje con DISOLVENTES ORGÁNICOS, deberá tener cuidado de
hacerlo en lugares ventilados y nunca cerca de la flama, ya que éstos son volátiles
e inflamables.
11. En caso de cualquier quemadura con ácido, base o fuego, deberá poner la parte
afectada durante quince minutos aproximadamente bajo el chorro de agua fría,
neutralizar y acudir a la enfermería si lo considera necesario
12. Deberá envasar los residuos de la práctica en los recipientes respectivos y tener
cuidado de ¡NO MEZCLARLOS!
13. En caso de que ocurra alguna intoxicación deberá informar al médico los datos que
se tengan del reactivo causante de la intoxicación.
14. En caso de ocurrir algún accidente por mínimo que sea, deberá comunicárselo al
profesor y al laboratorista auxiliar
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15. Cuando trabaje en el taller, siempre deberá ser en presencia del asesor o del
laboratorista auxiliar pero con el Vo. Bo. del asesor.
3.- Lineamientos de seguridad para trabajar en laboratorios, clínicas,

talleres y actividades extramuros.
I. Todos los usuarios deberán respetar la Normatividad Universitaria vigente.
II. Los usuarios sólo podrán trabajar y permanecer en el laboratorio y/o taller, bajo
la supervisión directa del catedrático, de acuerdo al Artículo 20 del Reglamento
de Laboratorios. En ningún caso el auxiliar o responsable de laboratorio, podrá
suplir al catedrático ó investigador en su función.
III. Para asistir a sesiones de laboratorio, clínica ó taller, es requisito indispensable
que los usuarios se presenten con manual de prácticas, guía de trabajo y/o de
investigación, con los materiales específicos por adquisición personal,
necesarios para el trabajo a realizar en los laboratorios y/o taller y portar
adecuadamente su equipo de seguridad según aplique, a indicación del
catedrático:
• Laboratorios, clínica y/o taller: Bata reglamentaria de color blanco de
manga larga, de tela de algodón, filipina o bien uniforme que corresponda
y como lo haya indicado el catedrático; la bata debe estar bordada con el
logo de la Licenciatura en Enfermería y el nombre personal de cada
estudiante, NO se permitirá que el alumno porte una bata que no le
corresponda; pelo recogido, sin adornos, uñas cortas y sin portar alhajas.
Asimismo deberá portar zapato y/o bota antiderrapantes. Si el catedrático
considera alguna otra, favor de indicarla previamente a los alumnos para
que estén en posibilidad de cumplirla estrictamente.
IV. En todo momento deberá conducirse en el laboratorio, clínica y/o taller, con
respeto y responsabilidad hacia el catedrático y a sus compañeros, tomando en
cuenta que la seguridad y preservación de este espacio depende de todos y
cada uno de los usuarios.
V. El laboratorio, clínica y/o taller NO proporcionará manuales de prácticas a los
usuarios, ya que éstos serán proporcionados por el catedrático de la asignatura
correspondiente.
VI. La entrada al laboratorio, clínica y/o taller será a la hora exacta de acuerdo a lo
programado.
VII. El usuario solicitará el equipo, utensilios, herramienta, material y reactivos
descritos correctamente, de acuerdo a las especificaciones del manual de
prácticas, mediante el vale de préstamo debidamente requisitado. Formato
DLA-009, y su identificación oficial de la U.A.E.H.
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VIII. El usuario deberá revisar el mobiliario, equipo, herramienta y material que se

les proporcione, verificando que esté limpio, ordenado, completo y funcionando,
éste quedará a responsabilidad del usuario(s), durante el tiempo que dure la
práctica y después de su uso, y deberá ser entregado en las mismas
condiciones en las que fue proporcionado.
IX. El usuario que solicite y reciba el material, herramienta y/o equipo deberá ser
quien a la vez, haga la entrega del mismo, al final de la práctica.
X. Si el usuario no conoce el funcionamiento del equipo o máquina alguna, puede
provocar que ésta sea averiada o bien provocar algún accidente al tratar de
utilizarla, para evitar lo anterior, por favor ¡solicite asesoría a su catedrático!.
XI. Al devolver el mobiliario, equipo y material, el usuario deberá solicitar el vale de
laboratorio Formato DLA-009 y su identificación oficial de la U.A.E.H.
XII. Cuando el material quede bajo la responsabilidad del usuario, el vale de
laboratorio Formato DLA-009 y su identificación oficial de la U.A.E.H., será
retenido por el auxiliar o responsable hasta la devolución del material.
XIII. El usuario de laboratorio, clínica o taller, debe conocer la ubicación y el uso de
los extintores, las puertas de emergencia, y la circulación correcta del lugar así
como las rutas de evacuación, para que de emergencia, proceda
correctamente.
XIV. Todo frasco, bolsa, caja o contenedor, deberán ser etiquetados. Por lo tanto
cualquier sustancia con recipiente no etiquetado será desechada, conforme a
lo que indica el “Manual de Procedimientos. Departamento Control del Medio
Ambiente” DLA-MO-7.2-01.6.
XV. En caso de pérdida, ruptura o desperfecto del equipo o material de laboratorio,
el usuario solicitará al auxiliar el vale de adeudo Formato DLA-010 y anotará en
éste el nombre y número de cuenta de todos los integrantes del equipo y será
respaldado con la identificación oficial de la U.A.E.H., debidamente requisitada
en este vale. El adeudo se repondrá en un plazo no mayor a 15 días hábiles.
En este procedimiento se retendrá únicamente el vale de adeudo.
XVI. Si el material adeudado no es repuesto en el plazo fijado, el o los usuarios
responsables, no podrán continuar con la realización de las prácticas
correspondientes. Control de adeudo Formato DLA-011.
XVII. En caso de no cumplir con la reposición del material en el plazo establecido, el
usuario(s), serán dados de alta, en la aplicación del Sistema Institucional de
Control de Adeudos en Laboratorios, Clínicas y Talleres, implementado en la
Dirección de Laboratorios y Talleres de la U.A.E.H.
XVIII. La acreditación de cada una de las prácticas que se realicen, estará sujeta a la
evaluación que aplique el catedrático.
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XIX. El usuario que realice práctica de recuperación deberá cumplir con todo lo
estipulado en el presente.
XX. Los usuarios que por indisciplina o negligencia pongan en peligro su integridad,
la de sus compañeros, la del mobiliario, material, utensilios o la de las
instalaciones, serán sujetos a la sanción correspondiente prevista en el
Reglamento de Laboratorios Artículo 36 y 38.
XXI. Por la naturaleza de los materiales, reactivos y/o equipo, que existen en el
laboratorio, clínica y/o taller debes mantenerte alerta y sin distracciones y
además NO corras, NO ingieras alimentos, NO se permite el uso de equipos de
sonido personales y NO SE PERMITEN VISITAS DURANTE TU ESTANCIA
EN LABORATORIO, CLÍNICA O TALLER ALGUNO.
XXII. El usuario que incurra en alguna falta académica será sancionado de acuerdo
a la Normatividad Universitaria vigente.
XXIII. Queda estrictamente prohibido realizar cualquier tipo de actividad ajena al
desarrollo de las tareas propias del laboratorio, clínica y/o taller.
XXIV. Todo usuario deberá entrar y salir por los accesos autorizados, en orden y
cuidando su integridad y la de sus compañeros. (Manual de Higiene, Seguridad
y Ecología, Capitulo 1).
XXV. Los usuarios deben reportar cualquier anomalía o maltrato por parte del
catedrático y del personal de laboratorio, al jefe de los mismos o en su caso a
la Dirección de la escuela.
XXVI. Al concluir la práctica, deben dejar limpia el área de trabajo, así como el
mobiliario, material y equipos utilizados. NO TIRES PAPELES Y/O BASURA A
LAS TARJAS, MESAS Y EN EQUIPOS.
XXVII. Al concluir la licenciatura, maestría o doctorado y realice su trámite de titulación
el usuario solicitará su constancia de no adeudo de material, herramienta y/o
equipo de laboratorios, clínicas y talleres, para obtenerla hará una donación en
especie (material que se usa en los, clínicas, laboratorios y talleres) de acuerdo
al Formato DLA-043, la cantidad de la donación será entre tres y cuatro salarios
mínimos vigente en el estado de Hidalgo para ello es necesario entregar la nota
y escribir en el formato el material donado, posteriormente el documento que se
extienda se entregará a la Dirección de Laboratorios y Talleres donde se
elabora y entrega la constancia de no adeudo.
XXVIII. Las situaciones no previstas en este lineamiento serán resueltos por la
Dirección correspondiente y la Dirección de Laboratorios de acuerdo a la
legislación universitaria aplicable.
XXIX. En los laboratorios, clínicas y/o talleres se toma en cuenta la regla de cortesía
la cual marca que por ningún motivo o circunstancia las personas que se
encuentren dentro de las instalaciones del laboratorio, clínica y/o taller deberán
17
de nombrarse con apodos, malas palabras o faltarse al respeto de cualquier

connotación sexual, racial o social. En caso contrario la Dirección
correspondiente y la Dirección de Laboratorios aplicarán lo conducente de
acuerdo a la legislación universitaria aplicable.
C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA PRÁCTICA.

a.- Cuadro de normas y referencias de seguridad de la práctica.
COMO PROCEDER EN CASO DE
TIPO DE RIESGO COMO EVITARLO
UN ACCIDENTE…
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▪ No provoque el vómito.
▪ Llame al médico
▪ Usar perillas de seguridad para
inmediatamente.
transferir líquidos, con pipeta.
▪ Si la víctima presente
▪ Evitar ingerir alimentos y
vómito, póngala boca
Envenenamient bebidas en el laboratorio.
abajo y con la cabeza en
o por ingestión ▪ Evitar preparar alimentos en
un nivel más bajo que la
utensilios de laboratorio.
cintura. Esto previene que
▪ Nunca probar las sustancias
el vómito pase a los
químicas.
pulmones, lo que podría
causar mayor daño.
▪ No percibir el olor de la
sustancias directamente,
abanicar dirigiendo los vapores
hacia la nariz. ▪ Lleve o arrastre a la víctima
▪ Usar mascarillas al manipular (no deje que camine)
sustancias volátiles o inmediatamente a un sitio
pulverulentos. con aire fresco.
▪ Tapar perfectamente los frascos ▪ Llame al médico.
que contengan sustancias ▪ Mantenga a la víctima
volátiles. cubierta y abrigada.
Envenenamient
▪ Estudiar las necesidades de ▪ Mantenga al paciente lo
o por inhalación
ventilación y con base en ello, más tranquilo que pueda.
implantar un sistema de ▪ Nunca le dé alcohol en
ventilación adecuado. ninguna forma.
▪ No utilizar material de ▪ No se exponga usted al
laboratorio en mal estado, para mismo veneno. Trate de
evitar que se rompa protegerse a sí mismo.
▪ Los cilindros que contengan
gases a presión, deben
revisarse continuamente para
evitar fugas.
19

UN ACCIDENTE…
▪ Lave inmediatamente con

agua corriente la superficie
▪ Al efectuar reacciones
quemada. Deje que corra
exotérmicas o de
bastante agua.
calentamiento, pueden
▪ Aplique hielo o compresa
generarse explosiones. Evitar si
helada.
se utilizan mezclando
▪ Aplique la corriente de agua
lentamente pequeñas
sobre el área quemada
cantidades de reactivos y si el
mientras remueve la ropa.
sistema debe calentarse
▪ Cualquier material que se
hacerlo con moderación.
ponga sobre la herida debe
▪ Poner atención si una sustancia
estar sumamente limpio.
ha de calentarse, ya que
▪ Si la quemadura extensa,
pueden proyectarse cuando se
mantenga a la víctima
hace sin el control adecuado.
acostada y que la cabeza
▪ Cuando se maneja material
esté más baja que los
metálico o de vidrio calientes,
hombros. (Levante
deben utilizarse guantes de
Quemaduras ligeramente las piernas si
asbesto pinzas, paño, etc.
es posible)
▪ Debe ponerse atención al
▪ Si el paciente está
trabajo que se realiza para
consciente y puede pasar
evitar todo tipo de accidentes.
líquidos, debe tomar
▪ Evitar transportar sustancias en
bebidas sin alcohol.
el laboratorio, a menos que sea
▪ Todas las quemaduras,
necesario.
excepto las muy pequeñas,
▪ Caminar en el laboratorio, no
deben ser vistas por el
correr.
médico.
▪ Lavar inmediatamente con agua
▪ Quemaduras por
los frascos que presentan
substancias químicas en
escurrimiento de reactivos.
áreas especiales como en
▪ Tapar correctamente los
los ojos, pueden necesitar
recipientes de sustancias
un tratamiento especial.
químicas y desechar los rotos,
▪ No ponga grasas, aceite,
estrellados o sin tapa.
bicarbonato de sodio u
▪ La mejor protección se logra
otras substancias sobre las
mediante el uso de gafas,
quemaduras.
caretas, etc. y que a su vez
20
permiten perfecta visibilidad

para trabajar.

UN ACCIDENTE…
▪ Desechar el material de vidrio o

porcelana roto o estrellado.
▪ Al insertar tubería, varilla e
vidrio o termómetro en el tapón ▪ En el cuidado de pequeñas
de hule, el material de vidrio heridas que pueden
debe cubrirse con aceite o suceder, es importante
vaselina, e introducirlo sin evitar la infección.
forzarlo con movimiento de ▪ Nunca ponga su boca en
rotación. Siempre sujetarlo con contacto con una herida. En
un paño. la boca hay muchas
▪ Limpiar el lugar donde se ha bacterias que pueden
roto material de vidrio con contaminar la herida.
brocha o algodón, pero nunca ▪ No permita que se usen
con toalla. pañuelos, trapos o dedos
▪ Colocar el material que se sucios en el tratamiento de
Heridas
rueda fácilmente en un ángulo una herida.
recto, con respecto a la orilla de ▪ No ponga antiséptico sobre
la mesa para evitar que caiga al la herida.
suelo. ▪ Lave inmediatamente la
▪ Al cortar vidrio, se debe marcar herida y áreas cercanas
perfectamente con una segueta con agua y jabón.
el corte que se realizará, cubrir ▪ Sostenga firmemente sobre
esta zona con un trapo y la herida un apósito
presionar con los dedos esterilizado que deje de
pulgares de ambas manos, en sangrar. Luego ponga un
sentido contrario al movimiento apósito nuevo y aplique un
de las mismas. vendaje suave.
▪ Evitar someter material de vidrio
o cambios bruscos de
temperatura.
▪ Colocar los objetivos punzantes
en el lugar adecuado a visible.
21
22
Política Ambiental del Sistema Institucional de Gestión Ambiental de la UAEH
Política Ambiental
Es compromiso de la comunidad universitaria la

preservación del medio ambiente, el cumplimiento de la
normatividad vigente aplicable, así como con los
requisitos e iniciativas que la institución emita para
mitigar el impacto ambiental y propiciar el desarrollo
sostenible.
___________________________________________________________________________________________
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo
Objetivos Medioambientales de la UAEH

✓ Tratamiento de aguas residuales.
✓ La difusión de la cultura de ambiental
✓ Reforestación.
✓ Manejo de residuos.
23
2.- Cuadro de disposición de residuos.

Manual de Procedimientos del Departamento de Control del Medio Ambiente. Plan de
Manejo de los Residuos C R E T I y el “Manual de Procedimientos del Departamento
de Control del Medio Ambiente. Plan de Manejo de los Residuos R P B I”
a).- RPBI: Residuos Peligrosos Biológicos Infecciosos
ESTADO
TIPO DE RESIDUOS ENVASADO TIPO DE CONTENEDOR
FÍSICO
Sangre Recipiente
(sangre LIQUIDA vertida del tubo u otro Líquido hermético CON
material que la haya contenido) ROSCA
Rojo
Cultivos y cepas de agentes

Bolsa de
infecciosos Sólido
polietileno
(cultivos biológicos)
Rojo
Bolsa de
Anatómicos (patológicos) Sólido
polietileno
Bolsa Amarilla: Cadáveres y órganos
infectados resultado de la investigación Amarillo
o experimento
Recipiente Amarillo: Líquido resultado
del cadáver.
Recipiente
Líquido
hermético
Amarillo
Residuos no anatómicos (Torundas,

gasas, abate lenguas, hisopos, puntillas Bolsa de
Sólido
de micro pipeta que han tenido contacto polietileno
son sangre o saliva)
Rojo
Objetos punzo-cortantes (Lancetas,
Recipientes
agujas, pipetas de vidrio quebradas,
rígidos de
capilares de vidrio, etc., que han tenido Sólido
polipropileno CON
contacto son sangre, suero, plasma o
DOS ORIFICIOS
saliva)
Rojo
NOTA: El sobrante de orina y excremento utilizado en diversos estudios, análisis e investigación serán
desinfectados con hipoclorito de sodio del 4-7% con un tiempo de contacto de 30minutos; al término de este
tiempo verterlos al drenaje
24
PROGRAMA EDUCATIVO DE LA LICENCIATURA EN MÉDICO CIRUJANO MANUAL DE
PRÁCTICAS DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
b).- Residuos CRETI: Corrosivo, Reactivos, Explosivos, Tóxicos, Inflamable.

La eliminación de residuos químicos producto de los ensayos de prácticas de docencia
y de trabajos de investigación se realiza vertiendo al respectivo recipiente según
corresponda e indique en las etiquetas que se tienen en los garrafones colocados en
cada uno de los laboratorios, como se indica:
CORROSIVAS ALCALINAS DISOLVENTES ORGÁNICOS

• Amoniaco
• Alcohol Etílico
• Hidróxido de Calcio • Alcohol Amílico
• Hidróxido de Sodio • Iso-Butanol
• Hidróxido de Berilio • Propanol
• Hidróxido de Amonio • Éter Etílico
• Hidróxido de Litio • Acetaldehído
• Aluminado de Sodio • Benzaldehído
• Oxido de Calcio • Furfural
• Oxido de Bario • Anilina
• Oxido de Sodio • Etilendiamina
• • Acetato de Etilo
DISOLVENTES CORROSIVAS ÁCIDAS

ORGANOHALOGENADOS INORGÁNICAS
• Bromuro de Acetilo • Ácido Clorhídrico

• Cloruro de Alilo
• Ácido Yodhídrico
• Cloruro de Amilo
• Ácido Bromhídrico
• Cloruro de Benzoico
• Ácido Fosfórico
• Bromo acetileno
• Tetra cloruro de Carbono • Ácido Nítrico
• Dicloroetano • Ácido Per-Yódico
• Clorobenceno • Ácido Per- Clórico
• Di cloro propano • Ácido Sulfúrico
•
1. Identificación.
25
NOMBRE DE LA
Esterilización y muerte celular
PRÁCTICA:
No. DE PRÁCTICA: 1 No. DE SESIONES: 1
No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 5
2. Introducción.
Evitar, prevenir o controlar contagios, infecciones y/o contaminaciones
accidentales es una actitud que debemos realizar todos aquellos que estamos
expuesto a materiales que nos puedan hacer daño. En el laboratorio de Microbiología
así como en hospitales, clínicas y consultorios es necesario saber de qué manera se
puede controlar la diseminación y el crecimiento de microorganismos sobre todo
cuando se desarrolla en pacientes hospitalizados, o que pueden ser infectados en los
ambientes clínico-hospitalarios. De igual manera en la investigación, cuando se
trabaja con cierto tipo de microorganismo, es importante evitar que lleguen a
contaminarse por otros no deseables que produzcan resultados erróneos. El
conocimiento de las técnicas de esterilización y antisepsia, permiten el control de los
microorganismos, permiten manejar el momento en que se desea crecer el
microorganismo o evitar su crecimiento, y también interpretar como curar o tratar a
pacientes infectados administrando los medicamento necesarios para matar o
eliminar a los microorganismo.
Existen tres medios generales para matar o controlar el crecimiento de
microorganismos: por medios físicos, químicos y biológicos. Por medios físicos se
emplea el calor que puede ser seco o húmedo, las radiaciones y las filtraciones.
Algunos microorganismos cuando se encuentran a temperaturas superiores a 80°C
mueren o se eliminan, no obstante algunas bacterias esporulan y pueden sobrevivir
a 100°C. Es necesario aumentar la temperatura y emplear el calor húmedo por 15
min. Cuando se quiere un medio de cultivo estéril sin que altere su composición la
temperatura, se emplean filtros con membranas cuyos poros tienen un diámetro
inferior al diámetro de los microorganismos de manera que no permitan su paso.
Dentro de las radiaciones, la luz ultravioleta (U.V.) es el medio físico más eficaz, pues
en unos cuantos minutos es capaz de eliminar los microorganismos. Las sustancias
químicas como alcoholes, fenoles, halógenos, aldehídos etc. son eficaces como
desinfectantes de superficies contaminadas. En un paciente infectado se emplean
26
sustancias químicas y biológicas que eliminan al microorganismo, dentro de las

primeras podemos citar etanol, benzal y yodo; dentro de las segundas se encuentran
los antibióticos.
3. Objetivo General.
Demostrar que mediante procedimientos físicos y químicos se pueden tener
materiales estériles.
4. Objetivos Específicos.
* Esterilizar un cultivo microbiano mediante los tres tipos de medios.
* Esterilizar un cultivo microbiano mediante el empleo de sustancias químicas.
5. Reactivos/insumos, materiales/utensilios y equipos.
a) REACTIVOS/INSUMOS
CANTIDAD DESCRIPCIÓN ESPECIFICACIONES OBSERVACIONES
1 Un cultivo de microorganismos El cultivo lo
inocuos pero de especie y proporciona el
características conocidas. profesor.
b) MATERIALES/UTENSILIOS
1 Frasco solución de etanol al
70%, otro con yodo y otro con
hipoclorito de sodio al 1.5%.
Frasco con solución salina
isotónica.
1 *Autoclave (*) 1 *Autoclave (*)

1 *Campana de flujo laminar con 1 *Campana de
lámpara de luz U.V. (*) flujo laminar con
*Asa bacteriológica lámpara de luz
1 *Hisopos 1 U.V. (*)
1 *Un trozo de papel aluminio. 1 *Asa
1 *Cajas de petri con medio de 1 bacteriológica
cultivo agar nutritivo. *Hisopos
1 *Mechero Fisher o de Bunsen. 1 *Un trozo de
*Gradilla para el tubo con cultivo papel aluminio.
bacteriano. *Cajas de petri
1 *Jeringa de 5 mL. 1 con medio de
27
*Filtro con membrana de 0.22 cultivo agar

1 m. 1 nutritivo.
1 *Tubo estéril de 13X100 mm. *Mechero Fisher
1 o de Bunsen.
1 *Gradilla para el
tubo con cultivo
1 bacteriano.
*Jeringa de 5
mL.
*Filtro con
membrana de
0.22 m.
*Tubo estéril de
13X100 mm.
c) EQUIPOS/INSTRUMENTOS
1 *Asa bacteriológica 1 Asa
1 *Hisopos bacteriológica
*Un trozo de papel aluminio. *Hisopos
*cajas de petri con medio de *Un trozo de
1 cultivo agar nutritivo. 1 papel aluminio.
1 *Mechero Fisher o de Bunsen. 1 *Cajas de petri
1 *Gradilla para el tubo con cultivo 1 con medio de
bacteriano. cultivo agar
1 *Jeringa de 5 mL. 1 nutritivo.
*Filtro con membrana de 0.22 *Un mechero
m. Fisher o de
1 *Tubo estéril de 13X100 mm. 1 Bunsen.
*Gradilla para el
1 tubo con cultivo
bacteriano.
1 *Jeringa de 5
1 mL.
*Filtro con
1 membrana de
0.22 m.
*Tubo estéril de
13X100 mm.
28
1 * Autoclave (*) 1 * Autoclave (*)

1 *Campana de flujo laminar con 1 *Campana de
lámpara de luz U.V. (*) flujo laminar con
lámpara de luz
U.V. (*)
6. Desarrollo de la Actividad Práctica.
Cada equipo comenzará a trabajar con un tubo de cultivo bacteriano en medio

líquido y a partir de éste realizará todas las técnicas.
ESTERILIZACIÓN CON CALOR HÚMEDO

• A partir de un cultivo bacteriano y mediante un asa pasar a dos tubos de
13X100mm conteniendo 5 mL de caldo nutritivo en cada tubo. Una vez
sembrados ambos tubos, solo uno de ellos se tratará en el autoclave, pero
enseguida del sometimiento en autoclave ambos tubos se incubarán a 37°C
durante 24 h. Los alumnos, en actividad extraclase sacarán sus cultivos de la
incubadora y los colocarán en refrigeración para la siguiente sesión práctica.
ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN:

• A partir del cultivo bacteriano se sembrarán de nuevo otros dos tubos
conteniendo 5 mL de caldo nutritivo. Enseguida, solo uno de los dos se filtrará
a través de membrana de 0.22 m, y después ambos se incubarán a 24 h
durante 37°C. De nuevo se sacarán ambos tubos y se refrigerarán para la
segunda sesión de la práctica.
ESTERILIZACIÓN POR LUZ U.V.

• A partir del cultivo de bacterias en medio líquido sembrar por estría y
agotamiento en una caja de petri y marcarla por debajo de la caja en cuatro
cuadrantes a los que se etiquetará como 15’’, 30’’ y 60’’ y el último cuadrante
sin etiquetar.
Un pedazo de papel aluminio del tamaño de la caja sin un cuadrante se colocará
sobre la caja y se introducirá en la campana de flujo laminar y se aplicará la luz U.V.
durante el tiempo indicado.
29
7. Cuestionario.
1.- ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor seco y húmedo y cuál
es la diferencia?
2. ¿Por qué el etanol elimina a los microorganismos?
3. ¿Por qué los halógenos evitan el crecimiento de los microorganismos?
4. ¿Por qué la luz U.V. afecta a los microorganismos?
5. ¿Por qué la membrana no permite el crecimiento de los microorganismos?
8. Bibliografía.
• Murray F. (2009). Microbiología médica. Editorial Elsevier. 2ª ed.

• Daniel L. (2008). Microbiology. WCB. McGraw Hill 2ª ed.
• Prescott, H.K. (2011). Microbiology. Ed. McGraw Hill. 5th ed.
9. Formato y especificación del reporte de práctica.

Señalar si se presentó crecimiento en los medios que recibieron los siguientes
tratamientos:
Tratamiento Crecimiento
1. Calor húmedo
30
2. Calor seco
3. Filtración
4. Hipoclorito de sodio
5. Etanol
6. Yodo
7. Luz U.V. 15”
8. Luz U.V. 30”
9. Luz U.V. 60”
Sin Luz U.V.
31
32
33
34
35
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Aislamiento de microorganismos
PRÁCTICA:
2. Introducción.
Para realizar un correcto estudio de los microorganismos infecciosos, ya sea para

establecer un diagnóstico preciso de la enfermedad, o para investigar tanto al
microorganismo como a los procesos que intervienen durante la infección humana,
es necesario aislar al microorganismo causal. Para ello es muy importante obtener
una muestra biológica del paciente la cual depende de la región anatómica infectada;
por ejemplo, si la infección es intestinal la muestra puede ser heces, contenido
gástrico, intestinal, etc. Si se sospecha de infección respiratoria será de exudado
nasal, faríngeo, esputo, lavado bronquial, etc. Otro aspecto importante es la
recolección de la muestra que puede realizarse con asa bacteriológica, hisopo,
material de aspiración, jeringa, etc. El tercer punto que debe considerarse es el medio
de cultivo para favorecer el desarrollo del microorganismo a investigar. Los medios
de cultivo se clasifican por su naturaleza física en sólidos, semisólidos y líquidos. De
acuerdo a su exigencia para aislar o identificar microorganismos se clasifican en
enriquecidos, diferenciales y selectivos. Para un primoaislamiento se recomienda un
medio enriquecido para favorecer una gran cantidad de microorganismos; entre los
utilizados se encuentran el agar nutritivo, agar BHI, agar tripticaseína, entre otros. Los
medios diferenciales permiten identificar microorganismos pues en el medio se
pueden observar cambios de su color y aspecto que servirán para discernir entre
diferentes tipos de microorganismos.
36
Obtener microorganismos aislados y puros a partir de una muestra biológica de

personas voluntarias y de una mezcla artificial de varias especies bacterianas.
• A partir de una muestra biológica de un compañero voluntario del mismo equipo

aislar microorganismos de la flora habitual.
• A partir de una muestra artificial compuesta por más de un microorganismo y
elaborada por el profesor logar un aislamiento puro.
El siguiente material será por equipos, seis equipos en total.
(PIEZAS)
2 Hisopo estéril
1 Jeringa de 3 mL. Desechable y Solo para un

estéril equipo en todo
el grupo, al que
designe el
profesor.
2 Abatelenguas estéril
2 Caja de Petri con diferentes Puede ser agar Solo un tipo de

medios de cultivo BHI, agar medio de cultivo
nutritivo o agar
tripticaseína
1 Mechero bunsen Por equipo
37
1 Asa bacateriológica Por equipo

1 Pizeta con agua corriente no estéril
Limpios y
2 Portaobjetos
desengrasados
2 Microscopios compuestos funcionales

1. Aislamiento de microorganismos a partir de muestra de mezcla de
microorganismos.
• Con campo de esterilidad mediante mechero de bunsen tomar con asa
bacteriológica una pequeña muestra y sembrar por estrí y agotamiento en una
caja de petri con medio enriquecido. Tapar e incubar a 37°C durante 24 h.
• Después de 24 h y ante la presencia de colonias guardar en refrigeración hasta
la siguiente sesión práctica.
• En la segunda sesión, describir la morfología de las distintas colonias que se
presentaron y de cada una realizar una tinción de Gram. Observar al
microscopio a 100X y describir la morfología microscópica.
2. Aislamiento de microorganismos a partir de una muestra biológica.

• Los alumnos seleccionarán voluntariamente a uno de sus compañeros y
propondrán la obtención de una muestra biológica la cual puede ser sangre,
orina, esputo, heces, exudado faríngeo o nasal (se tomarán las medidas
preventivas e higiene correctas para la toma de muestra en presencia y bajo
supervisión del profesor).
La muestra se sembrará con ayuda de hisopo sobre una caja de petri con medio
enriquecido y se incubará durante 48 h a 37°C. A la observación de colonias se
guardarán en refrigeración hasta la siguiente práctica de igual manera que el punto
no. 1.
En la siguiente sesión se observará la presencia de colonias y se describirán en una

tabla, el tamaño, coloración, elevación y bordes de las diferentes colonias que se
hayan obtenido.
Con ayuda del asa bacteriológica se tomará una de las diferentes tipos de colonia
aisladas y se extenderá sobre un portaobjetos para fijarla mediante calor ayudándose
del mechero de bunsen. Se guardará la preparación fija para la siguiente práctica de
laboratorio.
38
7. Cuestionario.
1. ¿Cuántos microorganismos lograste aislar?
2. ¿Cuál fue el criterio que empleaste para saber que se trataba de uno o
dos microorganismos?
3. ¿Cómo sabes si el microorganismo aislado del voluntario, es de flora

habitual o patógeno?
4. ¿Qué características macroscópicas los diferenciaron?
5. ¿Qué utilidad tiene para el médico saber cómo aislar un microorganismo?
8. Bibliografía.
39

Describir las características morfológicas de los microorganismos aislados de cada
muestra trabajada.
1. Muestra biológica artificial: __________No. Microorganismos distintos

aislados:______________________________________________________
______________________________________________________________
______________________________________________________________
_____.
2. Muestra biológica del voluntario:_______ No. Microorganismos distintos
aislados:______________________________________________________
______________________________________________________________
____________________________________________________________.
40
41
42
43
44
1. Identificación.
NOMBRE DE LA Identificación Microbiana Mediante Morfología

PRÁCTICA: Macro y Microscópica
2. Introducción.
En el campo de la Microbiología médica es de suma importancia la identificación de

del agente causal de la enfermedad de pacientes infectados pues de ello dependerá
el tratamiento preciso y eficaz del paciente así como las medidas de control de la
infección en una comunidad evitando brotes de infección o la expansión de
enfermedades en una comunidad. Es por ello que se deben conocer las
características morfológicas y de agrupación de los microorganismos. En el caso de
microorganismos ultramicroscópicos como lo son virus, priones y nanobacterias, solo
se observan al emplear el microscopio electrónico; clamidias, mycoplasmas y
ricketsias son procariotas intracelulares que se identifican mediante cultivos celulares
pues son intracelulares obligados y no obstante que se pueden observar mediante
microscópico de luz es necesario el cultivo artificial con líneas celulares. Las bacterias
extracelulares, quienes forman la mayor parte de los procariotas de importancia
médica, nos dan la facilidad de identificarlas mediante la observación de su
morfología microscópica y macroscópica. Para el primer caso se emplean diferentes
técnicas de tinción, la más utilizada es la tinción de Gram pues divide a dos enormes
grupos, los grampositivos y los gramnegativos. Una vez que la muestra se fija al calor
se realizan diferentes pasos: baño con colorante cristal violeta, baño con lugol,
decoloración con alcohol-acetona y baño con safranina. Las bacterias grampositivas
se observan color azul o moradas y las gramnegativas color rojo.
45
Identificar la morfología microscópica y macroscópica de microorganismos a partir de

un cultivo conocido.
• Identificar las características microscópicas de un cultivo bacteriano

mediante el empleo de la técnica de Gram.
• Describir las características macroscópicas del cultivo bacteriano.
• Mediante exposición al grupo y empleando material multimedia ilustrar las
diferentes formas que pueden tener los microorganismos procariotas.
El material será proporcionado para cada equipo
1frasco
Solución fisiológica
gotero
1frasco gotero Cristal violeta
1frasco gotero Solución de lugol
1frasco gotero Alcohol-acetona
1frasco gotero Safranina
2 piezas Caja de Petri con cultivo
bacteriano desarrollado en
la práctica no.2.
1 pieza Mechero de Bunsen
2 piezas Asa bacteriológica
1 pieza Pizeta con agua corriente
2 piezas Portaobjetos
2 piezas Microscopio compuesto
46

• Cada equipo deberá tener en su mesa de trabajo el material enlistado. El
procedimiento se realizará del modo siguiente: Por observación a simple vista se
describirán las características de las colonias del cultivo confirmando las
observaciones de la práctica anterior.
• Con un asa bacteriológica se tomará una colonia aislada del cultivo y se realizará
la tinción de Gram colocando un pequeña gota de agua sobre un portaobjetos se
colocará una pequeña muestra del cultivo el cual se pasará ligeramente sobre la
flama del mechero encendido hasta sequedad y evitando que se caliente
demasiado el portaobjetos. Una vez fija la muestra se colocará colorante de cristal
violeta cubriendo la muestra durante un minuto. Se enjuagará bajo chorro fino de
agua durante un minuto y enseguida se aplicará lugol durante un minuto;
transcurrido este tiempo se enjuagará con agua y se aplicará alcohol-acetona
enjuagando y finalmente se aplicará safranina durante un minuto. Se enjuagará y
se dejará secar la preparación. Terminado el secado se procederá a observar al
microscopio para lo cual se colocará una gota de aceite de inmersión y se
observará a 100X describiendo si es grampositivo o gramnegativo, la estructura
que presenta pudiendo ser coco, bacilo, cocobacilo, espiroqueta, etc. Y el tipo de
agrupamiento el cual puede ser aislado, en pares, racimos, cadenas, etc.
• Se repetirá el procedimiento para otra colonia crecida en el mismo medio de cultivo
para confirmar el resultad o en su defecto describir a otro microorganismo.
• Se realizarán dibujos o fotografiarán las imágenes observadas de lo que se
describe para el cultivo microscópicamente y a la observación a simple vista.
7. Cuestionario.
1.- ¿Qué estructuras de las bacterias permiten diferenciar entre grampositivo y

gramnegativo?
2.- ¿Cuáles son las características macroscópicas más importantes que se obtuvieron
de las colonias bacterias que describiste?
47
3. ¿Por qué la tinción de Gram no permite la identificación de micoplasmas,

riketsias y clamidias?
4. ¿Para identificar virus mediante observación que herramientas se necesitan?
5. ¿Cuál es la razón de que algunas bacterias se agrupen en racimos o en

cadenas?
8. Bibliografía.
Murray F. (2009). Microbiología médica. Editorial Elsevier. 2ª ed.
Daniel L. (2008). Microbiology. WCB. McGraw Hill 2ª ed.
Prescott, H.K. (2011). Microbiology. Ed. McGraw Hill. 5th ed.

1. Descripción macroscópica
Muestras: 1________________________
Descripción: 1__________________________________
2. Descripción microscópica
Muestra: 1____________________
Aumento: 1________;
48
49
50
51
52
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Pruebas Bioquímicas y antibiograma
PRÁCTICA:
2. Introducción.
En alg En ocasiones el clínico se basa en su experiencia sospechando de una infección

bacteriana para dar el tratamiento a su paciente, escoge un antibiótico que piensa es
el de elección contra el microorganismo del cual sospecha. Sin embargo si no es el
correcto va ocasionar resistencia y por otro lado el paciente recibirá un medicamento
que puede ser tóxico para él sin poder eliminar a la infección. Para establecer un
diagnóstico preciso de una infección bacteriana es importante identificar la especie
del microorganismo causal. En este caso el laboratorio juega un papel importante:
después de realizar una toma de muestra y aislar los microorganismos causantes de
la enfermedad se procede a efectuar la identificación del microorganismo infeccioso.
Para ello se emplean pruebas bioquímicas, en las cuales se aprovecha el
conocimiento de que cada microorganismo emplea diferentes rutas metabólicas
cuyos productos presentes en un medio de cultivo se pueden detectar de manera
colorida. Si en más de un microorganismo se observa el mismo producto entonces
los microorganismos se siembran en varios medios de cultivo en donde se detectan
diferentes productos y de este modo se pueden diferenciar. Otras características que
se detectan son: movilidad, producción de gases y ambiente aerobio o anaerobio.
Los perfiles bioquímicos se determinan observando la reacción de micro-organismos
individuales con cada uno de los sustratos que hay en el sistema de identificación.
Muchos sistemas descansan en los cambios de pH que resultan del empleo de los
sustratos, de reacciones enzimáticas que permiten la liberación de sustancias
cromogénicas o fluorogénicas, de indicadores de la actividad metabólica debida a
diferentes fuentes de carbono, detección de compuestos volátiles debidos a
productos finales del metabolismo o bien al reconocimiento del crecimiento
bacteriano.
53
Por otro lado también es importa saber si las bacterias identificadas han adquirido
resistencia a antibióticos. Una prueba que permite dicho conocimiento es el
Antibiograma, es el estudio de laboratorio que permite determinar el grado de
resistencia o susceptibilidad bacteriana contra antibióticos específicos. Consiste en
sembrar la bacteria aislada del paciente infectado sobre una placa de agar con un
sensidisco, el cual es un dispositivo que contiene varios filtros, cada uno impregnado
con diferente antibiótico; después de 24 h de incubación se observan los halos de
inhibición alrededor de cada antibiótico. Si el halo es mayor de 5 mm de diámetro
entonces indica susceptibilidad de la bacteria a ese antibiótico; de lo contrario indica
resistencia. La aplicación más importante se presenta cuando en un paciente se han
probado varios antibióticos y el paciente infectado no se recupera.
• Identificar el microorganismo que se aisló en la práctica número dos mediante la
descripción de los cambios que ocurran en medios de cultivo selectivos
diferenciales debido a su metabolismo así como identificar el o los antibióticos que
pueden eliminar a una bacteria resistente.
• A partir de las colonias diferenciadas macroscópicamente y por tinción de Gram,

identificarlas mediante el uso de diferentes medios de cultivo para pruebas
bioquímicas.
• Realizar un cultivo de bacterias con sensidisco.
• Identificar los antibióticos a los cuales es resistente y sensible.

1 juego • Juego de cultivos en cajas de Cada equipo
Los medios de
Petri con los siguientes recibirán un juego
cultivo ya
diferentes medios: agar de medios de
deberán estar
McConkey, Agar Hecktoen, cultivo
preparados.
agar EMB, agar sangre, agar
54
kligler, agar TSI, agar SIM, agar

salmonella-shigella, agar
manitol sal y agar s110.
• Componentes de medios de
cultivo: extracto de levadura
• Peptona
• Glucosa
Bilis bovina
1 pieza • Una caja de Petri con Medio 1 por equipo
de cultivo de Muller-Hinton.
1 pieza Es la cepa que
se guardó
• Medio de cultivo con las cepas desde la
previamente sembradas. práctica de
aislamiento
microbiano.
1 Mechero de Bunsen Por equipo
1 Asa bacteriológica Por equipo
1 1 Sensidisco combinado
1 Hisopo estéril
2 Microscopio compuesto Por equipo
1 Incubadora A 37°C

• El profesor dará una explicación acerca de las pruebas bioquímicas, su
importancia médica y sobre el procedimiento que realizarán durante la
práctica.
• A partir del cultivo que han estado desarrollando y en los cuales realizaron la
descripción morfológica después de haberlas aislado, realizarán las pruebas
bioquímicas que junto con el profesor se sugieran de acuerdo al tipo de
microorganismos descrito morfológicamente. Para ello mediante una asa
bacteriológica se sembrará por estría y agotamiento sobre los cultivos para
pruebas bioquímicas.
• Los cultivos se incubarán a 37°C durante 24 a 48 h
55
• Una vez desarrolladas las colonias y de acuerdo a tablas de descripción de

pruebas bioquímicas por los medios de cultivo empleados se registrará el
resultado concluyendo las especies identificadas.
• En caso de trabajar con cocos grampositivos realizar la prueba de la catalasa.
• Para el antibiograma sembrar una caja de Petri que contiene medio de cultivo
Muller-Hinton, cerca de la flama del mechero y de manera masiva con un
hisopo,
• Colocar encima de la siembra un sensidisco combinado cuidando que los
antibióticos queden adheridos al medio de cultivo.
• Tapar la caja y sellar la caja con cinta “Parafilm”.
• Incubar a 37ºC.
• Observar el desarrollo a las 24-48°C.
• Interpretar el antibiograma en un orden decreciente de actividad; para esto
debe medir con una regla, los diámetros de los halos de inhibición, de esta
manera se determina si es sensible, poco sensible o resistente al antibiótico
• Reportar los resultados
7. Cuestionario.
1. ¿Qué tipo de microorganismos se identifican empleando manitol sal agar?

2. ¿Para qué se emplea el medio de McConkey?
3. ¿Cuál es el fundamento de la técnica de Kligler?
4. Si tuvieras una muestra biológica con cocos grampositivos que otras uebas
bioquímicas emplearías para diferenciar entre Staphylococcus y Streptococcus.
5. ¿Qué microorganismos se identifican con la prueba de la catalasa?
6. ¿Cómo supiste que la bacteria estudiada era resistente o sensible?
7. ¿De acuerdo a tus resultados cuál fue el mejor antibiótico que actuará contra el
microorganismo?
8. De los antibióticos que ocasionaron eliminación de la bacteria ¿qué criterio
empleas para decidir cuál indicarías a tus pacientes?
9. ¿Qué pasaría si las bacterias las incubaras por mayor tiempo?
10. ¿En qué casos clínicos recomendarías la aplicación del antibiograma?
8. Bibliografía.
56
Describe la coloración del medio y colonias de acuerdo a los medios o pruebas que
emplearon construyendo una tabla que indique en cada prueba las características de las
colonias.
57
Medio de cultivo o Coloración del Coloración de las Otras

prueba bioquímica medio colonias observaciones
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
De acuerdo a las pruebas bioquímicas la especie identificada es:___________
58
Fotografía tu resultado del antibiograma, imprímelo y pégalo abajo. Discute los

resultados con tu profesor y concluye sobre cuál fue el antibiótico al cual es más sensible
la bacteria que identificaste.
59
60
61
62
63
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Diagnóstico Serológico
PRÁCTICA:
2. Introducción.
Las reacciones serológicas son de valor diagnóstico de muchas enfermedades de

origen bacteriano como fiebre tifoidea, paratifoidea, fiebre de malta, tifo y
enfermedades producidas por rickettsias, así como en las infecciones estreptocócicas
y por sífilis; en general aquellas que requieren un diagnóstico rápido por la gravedad
de la infección, o también para aquellas infecciones en que la muestra es de difícil
manipulación. La base de estas pruebas es el hecho de que cuando el organismo
humano es infectado, el sistema inmune produce una respuesta inmune humoral, en
la que se generan anticuerpos contra aquellos antígenos, los cuales se detectan
enfrentando el suero del paciente con el antígeno y se observan visualmente por una
reacción de aglutinación detectada en cuestión de minutos. Cada prueba recibe un
nombre específico, en el siguiente cuadro se presentan las pruebas más utilizadas.
1.REACCIÓN DE WIDAL Salmonella typhi “o” (somático)

Salmonella typhi “h” (flagelar)
Paratyphi (a) (flagelar)
Paratyphi (b) (flagelar)
2. REACCIÓN DE HUDDLESON Brucella abortus
3. REACCIÓN DE WEILH-FELIX Proteus ox-19
Tifo (rickettsias)
El propósito tradicional ha sido seleccionar casos sospechosos o portadores de

fiebres entéricas de origen desconocido.
64
En el caso de la sífilis se emplea la prueba denominada VDRL (venereal disease

reaction laboratory). Se debe realizar en el segundo período de la infección. Estos
antígenos son de origen no treponémico, detectan anticuerpos de clase IgM e IgG.
Comprender el valor de la prueba serológica para el diagnóstico de infecciones.
• Identificar la serorreactividad de un suero problema a diferentes antígenos

de
origen bacteriano.
• Interpretar la reactividad serológica al antígeno al que fue positivo.
1 juego Para seis
reacciones en un
juego: Salmonella
typhi,
Juego de reacciones febriles Paratyphi (a)
Paratyphi (b)
Brucella abortus
Proteus ox-19
Tifo (rickettsias)
1 pieza Placa de lectura Incluida en el juego
1 pieza De al menos 50 mm
Lupa
de diámetro
1 pieza Lámpara Luz blanca
1 caja Palillos
1 equipo Agitador rotatorio Agitador horizontal
65
MÉTODO RÁPIDO DE AGLUTINACIÓN MACROSCÓPICA EN MICROPLACA.

a) Los antígenos deben estar a temperatura ambiente y agitarse ligeramente antes
de usarse.
b) En una microplaca previamente marcar el lugar de cada antígeno y colocar sobre
cada área una gota del suero problema.
c) Mezclar con un palillo, y agitar la placa durante 2 min.
d) Hacer las lecturas frente a una buena fuente de luz indirecta observando la
aglutinación macroscópica; si es necesario, auxiliarse con una lupa.
e) Valorar los resultados.
f) Interpretar con ayuda del profesor.
7. Cuestionario.
1.- ¿A qué antígenos fue positivo el suero?
2. ¿Es posible que pueda ser positivo a más de un antígeno?
3. ¿Desde el punto de vista infectológico cómo interpretaste el resultado?
4. ¿Cuál es el fundamento de las reacciones febriles?
5. ¿Por qué el antígeno de proteus es para diagnóstico de ricketsiosis?
8. Bibliografía.


Plasma los resultados de aglutinación en la siguiente tabla
Antígeno Observación (+ o -) Reactivo (si o no)
Conclusión ___________________________________________________
66
67
68
69
70
1. Identificación.
P2. Obtención de ADN bacteriano con capacidad

NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
de resistencia a antibióticos
No. DE PRÁCTICA: 6 NO. DE SESIONES: 1
NO. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 6
2. Introducción.
Hay pacientes que presentan infecciones bacterianas y el tratamiento con antibióticos
resulta un fracaso pues no se recuperan, debido a diferentes causas: porque se ha
probado con diferentes antibióticos sin conocer la especie del microorganismo, por el
abuso de antibióticos, porque en hospitales hay materiales contaminados con
microorganismos con capacidad de resistir a los antibióticos más comúnmente
empleados o porque algunas especies mutan haciéndose más resistentes. ¿Pero
cómo adquieren resistencia las bacterias? Por dos mecanismos, la resistencia natural,
por ejemplo la recombinación genética que se lleva a cabo mediante la conjugación,
transformación y transducción. Y la resistencia adquirida que aparece por cambios
puntuales en el ADN (mutación) o por la adquisición de plásmidos y transposones.
Otro mecanismo de resistencia es la inactivación del antibiótico.
Se sabe que los antibióticos, B-lactámicos como penicilina, oxacilina, cefalosporinas,
actúan inhibiendo la enzima D-alanil D-alanin carboxipeptidasa (PBPS) encargada de
la síntesis de la pared celular. La B-lactamasa hidroliza el enlace amida del anillo
penicilánico o cefalosporínico resultando un ácido inactivo. Por lo tanto, para poder
saber si una bacteria adquirió resistencia basta con aislar su ADN y mediante una
electroforesis en gel de agarosa se puede analizar y si presenta una banda con el
tamaño molecular del gen de la -lactamasa se infiere que adquirió la resistencia.
Determinar la presencia del plasmido que tiene el gen de la -lactamasa en bacterias
resistentes a penicilina.
71
Aislar ADN de bacterias de la especie Staphylococcus aureus.
Identificar el gen de -lactamasa mediante electroforesis en gel de agarosa.
Comprobar la resistencia sembrando las bacterias en medio de cultivo selectivo para
S. aureus conteniendo penicilina.

a) REACTIVOS/INSUMOS.
CANTIDAD DESCRIPCIÓN ESPECIFICACIONES OBS.
10 ml Amortiguador TENS (Tris 10 mol/l; EDTA
1.0 mM; NaOH 0.1 N y SDS 0.5%; pH 7.5
50ml Acetato de sodio 3.0 mM pH 7.5
15ml Etanol absoluto frio
3 ml Bacterias en cultivo (E.coli, etc.) con el
plásmido por aislar crecidas en medio Luria
con ampicilina (500 g/ml)
100 ml Solución amortiguadora de Tris-Boratos-
EDTA (TBE)
25ml Gel de agarosa al 1% en TBE con bromuro de
etidio 5 µ/ml
10ml Amortiguador de muestra (azul de
bromofenol 0.1%, glicerol 20%, EDTA 50
mM)
0.010ml Marcadores de pares de bases de 1Kb
b) MATERIALES/UTENSILIOS.
6 pares Guantes desechables
10 Frasco con Pipetas Pasteur Esteriles
4 Tubos de vídrio Esteriles
5 Tubos eppendorff Esteriles
c) EQUIPOS/INSTRUMENTOS.
Unidad Cámara de electroforesis para ADN
unidad Fuente de poder
unidad Transiluminador de UV
unidad Cabina y Cámara para observar
unidad Microcentrifuga
72

Método I, plásmidos bacterianos.
1.- Tomar 5 ml de un cultivo de bacterias y centrifugar 5 minutos a 3000 rpm. Descartar el
sobrenadante.
2.- Resuspender la pastilla en 0.1 ml de agua con un vortex.
3.- Agregar al paquete celular 1 ml de amortiguador TENS y agitar durante 5 segundos
7. Cuestionario.
para no romper el ADN cromosomal. En este paso ocurre la lisis de las células.
4.- Agregar 0.5 ml de acetato de sodio 3M y agitar con fuerza durante 2 segundos.
5.- Centrifugar durante 5 minutos a 3000 rpm para precipitar los restos celulares y el DNA
cromosomal.
8. Bibliografía.
6.- Transferir el sobrenadante (parte superior) a un tubo limpio de centrifuga y agregar 3
ml de etanol frio (para precipitar el ADN plasmidico). Invertir el tubo varias veces y
observar.
7.- Para almacenar el plásmido aislado, centrifugar durante 5 minutos a 3000 rpm. Si no
se alcanza a ver un sedimento (“pellet”) color blanco, volver a centrifugar. Descartar el
sobrenadante con ayuda de una pipeta Pasteur.
8.- Dejar secar a temperatura ambiente el etanol, después resuspender el plásmido con
0.1 ml de agua y finalmente guardar a –20Cº para ser analizado en la siguiente práctica.
Electroforesis en geles de agarosa-
1.- Preparación del gel de agarosa: un gramo de agarosa se disuelve en 100 ml de
amortiguador TBE en ebullición; una vez disuelta, esperar a que la temperatura descienda
a 40-50 Cº aproximadamente y adicionar bromuro de etídio a una concentración final de
0.5 µg. Vaciar la mezcla sobre el molde porta-gel de la cámara. Colocar el peine para
formar los pozos y esperar su gelificación. Una vez solidificado quitar el peine.
2.- Seleccionar las muestras de DNA de cada una y tomar 0.05 ml.
3.- Vaciar estos 0.05 ml a un tubo pequeño y agregarle 0.05 ml de amortiguador de
muestra. Mezclar con cuidado sin hacer burbujas.
4.- Poner el porta-gel en la cámara de electroforesis y agregar el amortiguador TBE hasta
cubrirle completamente.
5.- Colocar 20 microlitros de las muestras en los pozos mediante una pipeta automática y
10 microlitros de los controles por último tapar la cámara de electroforesis.
6.- Conectar los cables de los electrodos a la fuente de poder y encenderla. No debe
tocarse la cámara de electroforesis a partir de este momento.
7.- Realizar la electroforesis a 50 miliamperes durante 30 minutos aproximadamente. El
frente coloreado de azul no debe salir del gel.
8.- Terminada la electroforesis apagar la fuente de poder, desconectar los cables de los
electrodos y retirar el porta-gel de la cámara.
9.- Teñir en gel en solución de Bromuro de etidio. Precaución: el bromuro de etidio es
tóxico, por lo que el manejo del gel que lo contiene debe hacerse con guantes.
10.- Determinar la posición de las bandas observando los geles en una lámpara de 73 luz
ultravioleta, (observar sólo con lentes protectores o pantalla).
a) Introducción (0.5)
b) Objetivo (0.5)
c) Desarrollo de la actividad práctica (3)
d) Resultados (3)
e) Discusión (1.5)
f) Cuestionario (1)
g) Bibliografía (0.5)
REPORTE DE LA PRÁCTICA
1. Pega la fotografía del gel indicando los carriles de marcadores de peso
molecular y las muestras que colocaste.
2.Pega una fotografía de la placa que demuestra resistencia a penicilina
3. Explica tus resultados y escribe tus conclusiones.
BIBLIOGRAFÍA.
• MurrayF., 2a edición. Ed. Elsevier. 2009.
• Daniel Lim. Microbiology. 2ª ed. WCB. McGraw Hill, Florida USA. 1998.
• Perscott, Harley, Klein. Microbiology 5th ed. McGraw Hill.
1. Identificación.
CUESTIONARIO
1.- ¿Cómo supiste que la bacteria que estudiaste es resistente a penicilina?
2. ¿En el gel como identificas la banda cromosomica de la plasmidica ?
NOMBRE DE LA Exámenes coproparasitoscópicos y
3. ¿Cómo sabrías que un paciente está infectado con una bacteria resistente a penicilina?
PRÁCTICA: observación de amebas
4. ¿En qué momento recomendarías como médico hacer un estudio de laboratorio que
confirme infecciones con bacterias resistentes?
5. ¿Cómo
No. DEsabrías si la resistencia
PRÁCTICA: 7 que adquirió una bacteria
No. se debe a conjugación
DE SESIONES: 1 o
transformación?
74
2. Introducción.
En lugares como México, donde la prevalencia y los porcentajes de parasitosis
intestinales, así como la variedad de parásitos que afectan tracto digestivo son
considerables, se requiere del empleo de técnicas eficaces, rápidas, confiables y de
bajo costo el diagnóstico de la infección a partir de muestras de materia fecal del
paciente afectado. El resultado preciso de la parasitosis que afecta al ´paciente
permitirá al médico dar el tratamiento eficaz contra la infección, y por ende la
desaparición de la infección. Dentro de las técnicas que se han empleado para el
diagnóstico de enfermedades parasitarias intestinales se encuentra las cualitativas y
las cuantitativas. Las primeras son las que más frecuentemente se utilizan en la
práctica clínica y de ellas el examen en fresco y la técnica de Faust. La primera
permite la identificación de trofozoítos y quistes, y la segunda solo de quistes. Sin
embargo, en la segunda se aumenta la probabilidad de encontrar parásitos pues se
emplea mayor cantidad de heces a diferencia del examen en fresco en que se utiliza
una pequeña cantidad.
Dentro de los protozoarios que más frecuente causan infecciones al humano se
encuentran las amebas, la más patógena corresponde a Entamoeba histolytica, las
comensales son Entamoeba coli, Endolimax nana y Iodamoeba bütschlii. La primera
es importante de identificar pues causa problemas intestinales, abscesos hepáticos
o diseminación a otros órganos que comprometen la vida del paciente. Las
comensales son indicativas de coprofagia. Es por eso que es importante identificarlas
mediante su morfología para establecer el diagnóstico y así dar el tratamiento preciso.
• Comparar las ventajas y desventajas que tienen las técnicas CPS directa y de
concentración de Faust.
• Identificar morfológicamente y mediante preparaciones fijas las diferentes amebas
de importancia médica.
• Realizar las técnicas CPS directa y de Faust empleando material fecal positiva
contaminada con parásitos de manera que se detecten bajo observación del
microscopio óptico.
• Determinar las ventajas y desventajas de las dos técnicas CPS mediante el conteo
de los parásitos observados en 10 campos de observación así como la detección
de materia orgánica en la preparación.
• Describir las estructuras morfológicas que identifican a Entamoeba histolytica, las
comensales son Entamoeba coli, Endolimax nana y Iodamoeba bütschlii.
75
4 Cubreobjetos limpios 22 mm x 22 mm
Portaobjetos desengrasados
2 25 mm x 75 mm
limpios
2 Pipetas Pasteur con bulbo
1 Asa parasitológica
1 Recipiente de plástico 100 ml
tallo corto y 8 cm
1 Embudo
de diámetro
De fondo cónico
2 Tubos de centrifugación con capacidad
para 15 ml
2 Aplicadores de madera
Materia fecal conteniendo
quistes, trofozoitos, huevos y
larvas de parásitos intestinales
conservada en formol.
50 ml Solución salina isotónica (SSI)
50 ml Solución lugol parasitológico
100 ml Hipoclorito de sodio
50 ml Sulfato de Zinc 1.180°

1 juego Preparaciones fijas de Ya están fijas.
Entamoeba histolytica,
Entamoeba coli, Endolimax nana
y Iodamoeba bütschlii
1 Centrifuga Centrífuga Para todo el
clínica, hasta grupo
3000 rpm.
2 Microscopio de luz Por equipo
76

TÉCNICA CPS DIRECTO EN FRESCO
• A un portaobjetos limpio y desengrasado se colocará en uno de sus extremos
una gota de solución salina isotónica (SSI) y en el otro extremo una gota de
solución de lugol.
• Con un aplicador de madera se tomará una muestra de materia fecal la cual se
colocará sobre el portaobjetos donde se encuentra la gota con SSI y otra
muestra donde está el lugol. Cada muestra homogeneizada con el mismo
aplicador se cubrirá con un cubreobjetos.
• Se observará bajo el microscopio compuesto primero a 10X y luego a 40X.
TECNICA DE FAUST, EXAMEN CPS DE CONCENTRACION POR

CENTRIFUGACION-FLOTACION:
• Colocar dentro del recipiente de plástico para muestra de heces,
aproximadamente 2 g. de heces y 10 ml.de agua corriente.
• Homogeneizar y pasar a través de una gasa sobre un embudo y recibir en un
tubo de 13 X100 mm.
• Centrifugar a 2500 r.p.m. en centrifuga clínica, durante 1 minuto.
• Decantar el agua y resuspender la muestra con agua corriente.
• Centrifugar igual que la vez anterior.
• Decantar el sobrenadante y resuspender el sedimento en 2 o 3 ml de sulfato de
zinc 1.180°.
• Homogeneizar y agregar más sulfato de zinc hasta aproximadamente 1 cm por
debajo de la boca del tubo.
• Centrifugar igual que la vez anterior.
• Con una asa parasitológica tomar 2 ó 3 muestras de la superficie y colocar sobre
un portaobjetos.
• Observar al microscopio a 10X y 40X.
Observar a 40X, 10 campos de cada preparación realizadas con cada una de las
técnicas y contar el número total de parásitos que encontraste:
• Examen microscópico directo:
• Técnica de Faust:
Señala si hubo deformación de los parásitos que observaste en cada una de las
técnicas que empleaste; también indica el tiempo que empleaste en cada una de ellas:
77
• Examen microscópico directo:

• Técnica de Faust:
Para las preparaciones fijas realizar las observaciones a 40X y 100X con aceite de
inmersión esta última.
7. Cuestionario.
1.- ¿Qué técnica CPS realizará si la muestra fuera diarreica y cuál si fuera dura y
por qué?
2.- ¿Por qué generalmente se piden 3 muestras seriadas de heces al paciente para
realizar los exámenes CPS?
3. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de las técnicas CPS cualitativas que
realizaste?
4. ¿Cuáles son las características morfológicas que distinguen a E. histolytica?
5. ¿Cuáles son las características morfológicas que distinguen las diferentes
amebas comensales?
8. Bibliografía.
• Becerril, F.M.A. (2014). Parasitología Médica. Ed. Mc Graw Hill
Interamericana. México, D.F., 4a ed.
• De Haro, A.I., Salazar, S.P.M. y Cabrera, B. M. (1995). Diagnóstico morfológico
de las parasitosis. Méndez Cervantes Editores. México D.F. 2ª ed.
• Perry, J.L., Matthews, J.S., Miller, G.R. (1990). Parasite efficiences of five stool
concentration system. J. Clin Microbiol. 28(6):1094-1097.
Ténica CPS Directo Faust (concentración y

flotación)
No. parásitos contados en
10 campos
Presencia de matera
orgánica (mucha o poca)
Cantidad de materiales
empleados (muchos o
pocos)
78
Tiempo de ejecución de la
técnica
Coloca la imagen de las observaciones de las diferentes amebas y señala las

estructuras que las distingue.
79
80
81
82
83
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Identificación de protozoarios flagelados
PRÁCTICA:
2. Introducción.
Los protozoarios Giardia lamblia, Trichomonas hominis T. vaginalis, Leishmania y
Trypanosoma cruzi son flagelados que afectan al humano; el primero se establece en
intestino delgado y ocasiona dolor abdominal principalmente en epigastrio y
posprandial, náuseas diarrea, anorexia y eructos, mientras que T. hominis causa
dolor abdominal y principalmente diarrea acuosa. El diagnóstico preciso de ambas
infecciones se establece a través de exámenes coproparasitoscópicos en los que es
necesario identificar a los parásitos, lo cual se logra mediante el conocimiento de la
morfología de ambos. Por otro lado, el conocimiento sobre la morfología permite
entender la patogenia de las infecciones ya que, como en el caso de G. lamblia, el
disco suctor sirve para adherirse a los tejidos del huésped y en el caso de T. hominis
los flagelos le sirven al parásito para desplazarse y generar una respuesta
inflamatoria. En muchas ocasiones la identificación de los parásitos a través de la
morfología ha permitido aislarlos para estudiar su virulencia o para ver que fármacos
pueden actuar como antiparasitarios.
Dentro de los flagelados extraintestinales que afectan la salud humana se
encuentran Trichomonas vaginalis, parásitos del género Leishmania y Trypanosoma
cruzi causante de la enfermedad de Chagas. En esta última, el parásito generalmente
es transmitido al humano por las heces de un triatomino el cual es un insecto
hematófago y a través de sus heces transmite al parásito quien afecta células del
sistema retículo endotelial, particularmente las de miocardio, esófago y colon. Si bien
en un paciente, los datos clínicos y epidemiológicos pueden hacer sospechar de la
trypanosomiasis, los exámenes parasitológicos pertinentes confirman la presencia
del agente causal.
Examen de sangre. Las pruebas clásicas para la detección de tripomastigotes, son
el examen directo y los extendidos (delgados o gruesos) teñidos con “Giemsa”; sin
embargo, es recomendable hacer técnicas de concentración de sangre mediante los
84
métodos de “Strout o Woo” (hematócrito). Aislamiento. El cultivo de sangre en

medios y la inoculación en ratones de laboratorio, permiten el aislamiento del parásito
pero el tiempo que requiere (tres a cuatro semanas) limitan su uso para el diagnóstico.
En los tejidos de dichos animales es posible observar nidos de amastigotes.
Xenodiagnóstico. Es un método útil para detectar al parásito durante la fase crónica
de la enfermedad. Se basa en la multiplicación de T. cruzi en el tubo digestivo de
triatóminos y el examen posterior de sus heces durante uno a tres meses.
Existen además, pruebas inmunológicas que de manera indirecta apoyan al
diagnóstico durante la fase crónica y son útiles en estudios epidemiológicos. Las más
usadas son inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación indirecta,
contrainmunoelectroforesis, doble difusión y ELISA.
La reacción de fijación del complemento, fue la primera prueba serológica de uso
general, sin embargo, por dificultades técnicas ha caído en desuso. En los casos de
trypanosomiasis americana congénita, la detección de IgM específica, puede
contribuir a confirmar un diagnóstico.
Por otro lado Leishmania tiene dos especies L. mexicana causante de la úlcera
de los chicleros y L. donovani causante del Kala-azar que es un padecimiento donde
se desarrolla hepatoesplenomegalia. Para diagnosticar la leishmaniasis es
importante realizar una impronta de la úlcera y teñirla bajo el microscopio para
detectar al parásito en fase de amastigote, o bien hacer una pequeña inoculación de
solución isotónica para realizar un enjuague y llevarla a un cultivo axénico y después
de tres semanas observar el cultivo y la presencia de los parásitos. Para
leishmaniasis visceral la prueba serológica en que se detectan anticuerpos es de
utilidad para el diagnóstico.
En caso de Trichomonas vaginalis el exudado vaginal y examen directo pondrá
en evidencia la presencia del parásito el cual se puede observar bajo el microscopio.
Por lo anterior es importante conocer la morfología de los parásitos flagelados.
• Describir la morfología de T. hominis, Giardia lamblia, T. cruzi, Leishmania y
Trichomonas vaginalis mediante el empleo de preparaciones fijas o muestras
frescas.
• Identificar y describir la morfología de quistes o trofozoítos de Giardia lamblia a
partir de preparaciones fijas.
85
• Identificar y describir la morfología de trofozoítos de T. hominis y T. vaginalis.

• Identificar y describir la morfología y movilidad de T. cruzi en cultivo axénico y de
sangre de ratones infectados.
• Identificar las estructuras subcelulares de T. cruzi en preparación fijas.
• Describir la morfología de promastigotes de Leishmania y describir las diferencia
con T. cruzi.
• Describir la morfología de triatóminos transmisores de T. cruzi.
1 Frasco de colorante Giemsa
1 Frasco con metanol grado Q.P.
1 litro Agua destilada.

1 litro Hipoclorito de sodio 2%
Preparación fija de T.
1
hominis.
Preparación fija de Giardia
1
lamblia
1 Una pizeta Volumen 500l
1 Una pizeta Volumen 500l
2 Porta objetos limpios
1 Frasco con triatominos El profesor lo traerá.

1 Ratón con tripanosmas El profesor traerá
sanguíneos en una jaula. este material y solo el
lo manipulará.
2 Microscopios compuestos

86
• Examinar al microscopio las preparaciones fijas con quistes y trofozoítos de

Trichomonas hominis y Giardia lamblia.
• El profesor preparará la muestra de cultivo de la siguiente manera: Con guantes
depositar una gota de cultivo de T. cruzi sobre un portaobjetos limpio colocando
encima un cubreobjetos se observará bajo el microscopio óptico a 40X.
• Con otra gota hará un extendido y se fijara con metanol absoluto durante un
minuto, cubrir con colorante de “Giemsa” 15 minutos. Enjuagar con agua
destilada y dejar secar. Observar al microscopio a 40X y después de enfocar el
campo de observación pasar a 100X.
• Al igual que en el primer punto se colocará una gota de sangre del ratón entre
porta y cubreobjetos para observar bajo el microscopio.
• Se observará bajo el microscopio una preparación fija de Trichomonas vaginalis
y otra de Leishmania bajo el microscopio.
6. Cuestionario.
1. ¿En qué especie, de las que se trabajaron no se observa el quiste?

2.- ¿Qué diferencias morfológicas existen entre los parásitos que estudiaste?
3.- Si después de tres exámenes CPS seriados encuentras resultados negativos
para el diagnóstico de giardiasis, ¿Qué otras alternativas existen en el laboratorio
para asegurarte de que el paciente no está infectado?
4.-¿Qué pruebas de laboratorio se utilizan para el diagnóstico de la enfermedad de
Chagas en la fase aguda y en la crónica?
5. ¿Cuál es la estructura subcelular que identifica a T. cruzi en sangre y lo diferencia
de Leishmania?
6. ¿Qué diferencias morfológicas existen entre Trichomonas, Leishmania y
Trypanosoma cruzi?
7. Bibliografía.
• Tay, Z. J., Lara, A.R.,Velasco, C.O., Gutiérrez, Q.M. (1991). Parasitología
Médica. Ed. Méndez Cervantes, México, D.F. 5ª ed.
87
Dibuja o pega una fotografía observada durante la práctica de los siguientes los
parásitos:
Trypanosma cruzi Leishmania

Descripción Descripción
Trichomonas Giardia lamblia

88
89
90
91
92
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Identificación de ciliados y apicomplexa
PRÁCTICA:
2. Introducción.
El protozoario Balantidium coli es el único parásito ciliado que infecta al ser
humano. Presenta dos fases, el trofozoíto que es ovoide y mide 80 X 15 m y el quiste
de 60 X120 m. Dado que es un parásito que es capaz de ocasionar disentería se
recomienda hacer el diagnóstico preciso, para ello se realiza un examen
coproparasitoscópico directo si la muestra es diarreica y uno de concentración si es
sólida. Sin embargo aunque se realiza la técnica es importante conocer la morfología
del parásito. Por lo que en esta práctica se observará la morfología de B. coli a través
de preparaciones fijas y de videos de preparaciones con trofozoítos.
Desde el punto de vista de salud pública, la Malaria, la toxoplasmosis y la
cryptosporidiosis son tres parásitosis de gran interés e importancia para México. La
primera de puede llegar a ser fatal, anualmente mueren 2.5 millones de personas en
todo el mundo y más de 250 millones se ven afectadas. En México es difícil establecer
un diagnóstico confiable ya que los médicos diagnostican los casos cuando el
paciente se encuentra en el pico febril, en el cual los pacientes, sobre todo niños,
corren el riesgo de morir, principalmente en casos de malaria cerebral. Por otro lado,
las otras dos parasitosis afectan a pacientes inmunocomprometidos, llegando a morir
irremediablemente; en el caso de la toxoplasmosis, también existe otra población en
riesgo, los fetos de madres embarazadas, las cuales si llegan a infectarse con el
parásito durante el embarazo por vía transplacentaria, los taquizoítos infectan al feto,
localizándose preferencialmente en el sistema nervioso central, para ocasionar desde
un aborto hasta malformaciones en niños recién nacidos. Con respecto a la
cryptosporidiosis, el parásito se establece en el yeyuno del huésped y dada su
condición de oportunista produce alteraciones intestinales a las personas
inmunocomprometidas ocasionando generalmente diarreas intestinales de varias
semanas.
93
El diagnóstico de laboratorio es muy importante, pues de él depende el tratamiento

adecuado del paciente. Cuando el parásito es difícil de observar directamente como
en el caso de la toxoplasmosis, se recurre a las pruebas inmunológicas; por ejemplo
para esta enfermedad se realiza un ensayo de “Sabin-Feldman”, ELISA o IF; en la
cryptosporidosis se realiza la técnica CPS de “Sheater” y para Malaria la gota gruesa
y frote sanguíneo.
Describir la morfología de Balantidium coli, Cryptosporidium, cyclospora, Toxoplasma

gondii y Plasmodium a partir de preparaciones fijas.
• Describir la morfología de Balantidium coli a partir de preparaciones fijas.
• Realizar las técnicas de Gota gruesa y frote sanguíneo para diagnóstico de
Malaria.
• Identificar parásitos del género Plasmodium, Toxoplasma y Cryptosporidium a
partir de preparaciones fijas y bajo el microscopio óptico.
1 Aceite de inmersión
1 Gotero con colorante Giemsa 50 mL
1 Preparación fija Preparación de
corte histológico
de intestino
grueso.
1 Preparación fija de cada una de
los siguientes parásitos:
Plasmodium sp, Toxoplasma
gondii y Cryptosporidium
parvum.
3 Portaobjetos Limpios y
desengrasados.
94
2 Microscopios Óptico.

Cada equipo observará la preparación de en B. coli en intestino grueso bajo el
microscopio a 10X y 40X. Describirán la morfología y los organelos que alcancen a
observar.
El profesor proporcionará una preparación fija de Plasmodium vixax, P. malariae,
P. falciparum y describirá mediante observación bajo el microscopio óptico la
morfología y las estructuras que permiten su identificación. De la misma manera se
procede para la observación de las preparaciones fijas de Toxoplasma gondii y
Cryptosporidium sp. Para identificar a Toxoplasma gondii y Cryptosporidium se
procederá de la misma manera.
7. Cuestionario.
1. ¿Qué diferencia hay entre trofozoítos y quistes de B. coli?
2. ¿Qué estructuras permiten la identificación del parásito?
3. ¿En qué momento de la evolución del padecimiento se recomienda hacer un
“extendido sanguíneo” para el diagnostico de plasmodiosis?
4. ¿En qué parasitosis se utiliza la prueba de Sabin-Feldman y de IFI?
5. ¿Qué técnicas se utilizan para diagnosticar Cryptosporidiosis y cyclosporosis?
8. Bibliografía.
• Becerril, F. M. A., Parasitología Médica.2011. Ed. Mc Graw Hill Interamericana.
México, D.F., 2a edición.
• De Haro, A. I.; Salazar, S.P.M. y Cabrera, B. M. Diagnóstico morfológico de las
parasitosis. 1995. Méndez Cervantes Editores. México D.F. 2ª edición.
• Tay, Z. J.; Lara, A.R.; Velasco, C.O.; Gutiérrez, Q.M. Parasitología Médica. 1991.
Ed. Méndez Cervantes, México, D.F. 5ª edición.
95
Dibuja o pega una fotografía observada durante la práctica de los siguientes los
parásitos:
Balantidium coli Cryptosporidium sp.

Toxoplasma gondii Plasmodium sp.

96
97
98
99
100
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Céstodos y tremátodos
PRÁCTICA:
2. Introducción.
La hymenolepiosis es una parasitosis producida por los céstodos que pertenecen

al género Hymenolepis (H): Existen diferentes especies que parasitan el ser humano
como son: H. nana y H. diminuta. En México su frecuencia oscila entre el 14% y
40%, generalmente se encuentra en climas templados; la población más
frecuentemente infectada es la que se encuentra entre los 4 y 12 años. Aunque esta
parasitosis no mata al huésped si afecta la salud, principalmente de los niños,
existen reportes en los que se demuestra enteritis que se manifiesta por dolor
abdominal, hiporexia, cefalea y diarrea, en ocasiones con moco pero sin sangre; el
daño que se presenta dependerá de la intensidad de la parasitosis, por esta razón
es importante que el médico cirujano no solo efectúe el diagnóstico de laboratorio
fidedigno, sino que además evalúe su intensidad para que se adopten las medidas
necesarias para su tratamiento. En caso de que el resultado de 3 CPS salga
negativo, no debe descartarse la posibilidad de que el paciente tenga únicamente
cisticercoides en la mucosa intestinal. Esto se puede comprender si se demuestra,
en el ratón, el ciclo biológico de H. nana que es lo mismo que sucede en el ser
humano. La teniasis es producida por parásitos del género Taenia, la reconicida
comúnmente como “solitaria” el cualdro clínico que ocasiona es intestinal
destacando principalmente la bulimia. Tanto T. solium como T. saginata desarrollan
la fase adulta en el intestino del humano y pueden medir desde 5 a 10 metros pero
en las heces se llegan a arrojar parte del parásito en parte de su estructura llamada
101
estróbilo el cual es un conjunto de proglótidos. La técnica más recomendable para

su identificación es el tamizado de heces y aclaramiento de los proglótidos con
hidróxido de potasio. Es importante diferenciar ambas especies porque T. solium
causa cisticercosis y T. saginata no lo produce.
Otra cestodiasis importante en México es la hidatidosis, cuyo agente causal es la
larva de Echinococcus granulosus que se puede localizar en tejidos como el hígado,
pulmón, huesos, etc. Por tal motivo, es difícil realizar un diagnóstico de certeza en
esta parasitosis y se tiene que recurrir a pruebas de laboratorio como la intra-
dermorreacción de Casoni, la HAI, ELISA, IEF, etc. y exámenes por imagen como los
rayos X, ultrasonido, etc.
La fasciolosis es una infección importante en nuestro país, aunque el número de
casos diagnosticados en México es de 60 los factores epidemiológicos para la
prevalencia de estas parasitosis son frecuentes. El problema no solo radica en el
diagnóstico clínico, en donde el médico, en ocasiones no sospecha de fasciolosis
sino el laboratorio, se puede poner de manifiesto su presencia mediante pruebas
inmunológicas como la CIEF, HAI, ELISA, etc. En fase de estado, cuando el parásito
está en conductos biliares, se detectan huevos del parásito en las heces del paciente,
en las que, por técnicas CPS de sedimentación, se identifican los huevos. También
es importante hacer notar que el hecho de encontrar huevos en las heces de una
persona no quiere decir necesariamente que esté parasitado, ya que podría tratarse
de una pseudoparasitosis en donde la persona pudo comer hígados de res infectada
con F. hepática, o ingerir productos hechos a base de bilis de animales parasitados.
Diferenciar morfológicamente los diferentes céstodos y tremátodos de importancia
médica.
• Describir las estructuras que permiten identificar adultos de Hymenolepis
nana.
• Describir la morfología de proglótidos de Taenia y diferenciar la especie
mediante sus estructuras.
• Describir la morfología de quiste hidatídico de Echinococcus granulosus.
102

1 Preparación fija de Hymenolepis
nana
1 Preparación fija de Taenia
solium o T. saginata
1 Preparación fija de Fasciola
hepática
1 Frasco con ejemplares adultos Contenidos en
de Tenias y/o cisticercos formol
1 Frasco con adultos de Fasciola Contenidos en
hepática formol
Deben tener
2 Miscroscopios compuestos objetivos 4X, 10X
y 40X,

• Los alumnos observarán las preparaciones fijas de H. nana, T. solium, T. saginata
y Fasciola hepática.
• Los alumnos observarán la morfología de adultos de T. solium y T. saginata
contenidos en formol mediante la explicación del profesor.
• Describirán las estructuras que permiten diferenciar entre cada una de las
especies.
• Se destacará los aspectos morfológicos que permiten identificar al quiste
hidatídico.
7. Cuestionario.
1.- ¿Cuántos h.g.h. indican una hymenolepiosis masiva y qué significancia médica
tiene?
2.- ¿Cómo diferenciarías a T. solium de T. saginata?
3.- ¿Cuáles son las diferencias morfológicas entre H. nana y H. diminuta?
4.- ¿Qué estructuras del quiste hidatídico permiten su identificación?
8. Bibliografía.
103

Hymenoleis nana Taenia

Fasciola hepatica
Descripción Quiste hidatídico
Descripción
104
105
106
107
108
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Nemátodos
PRÁCTICA:
2. Introducción.
Dentro de las infecciones por nemátodos, se encuentra las de afección inestinal

como enterobiasis, Trichuriasis y ascariasis, además de las que infectan por larvas
como strongyloidosis y uncinariasis; las extraintestinales son triquinosis,
oncocercosis, gnathostomiasis y toxocariasis. Para diagnosticarlas hay que
considerar si son geohelmintiasis, el ambiente donde se encuentras, los hábitos de la
gente y las técnicas que permiten su identificación. Por ejemplo, el método de
Graham se emplea para la enterobiasis el cual consiste en poner en contacto en la
región perianal del paciente una cinta engomada soportada sobre abatelenguas para
la posterior observación al microscopio. La ascariasis, es importante no solo
diagnosticar la enfermedad, sino valorar la intensidad de la infección ya que de ello
dependerán tanto el pronóstico para el paciente como el tratamiento a seguir; por
ejemplo, si la infección es masiva, no es recomendable dar al paciente un
antiparasitario que ocasione la contracción rígida del parásito, debido a que se puede
provocar obstrucción intestinal, se considera masiva cuando existen más de 50,000
h.g.h. del paciente por cualquier método CPS cuantitativo. La trichuriosis desarrolla
sintomatología grave como en los casos de anemia o de prolapso rectal, en donde
los CPS muestran más de 5,000 h.g.h.
Algunas helmintiasis requieren de la tierra para que los gusanos adquieran la
fase infectante para el humano, a estas se les da el nombre de geohelmintiasis. De
estas, las uncinariasis, cuyos agentes causales son Necator americanus y
Ancylostoma duodenale, desarrollan la fase de tercer estadio llamada filariforme
penetran por la piel cuando un individuo está en contacto con la tierra. En ocasiones
el diagnóstico es difícil de establecer ya que estas parasitosis producen problemas
109
gastrointestinales. Dentro de las técnicas más recomendadas se emplean los

exámenes coproparasitoscópicos, la técnica de Baerman y el cultivo de Harada-Mori.
Cuando el médico revisa a pacientes que presentan mialgias, fiebre, astenia,
cefalea y en ocasiones edema palpebral con eosinofilia con más de 15%, se puede
sospechar en varias enfermedades, entre ellas triquinosis; sin embargo puede llegar
a confundir el diagnóstico clínico con otras etiologías; en estos casos es
indispensable el diagnóstico de laboratorio. Lo más confiable son las pruebas directas
encontrando al parásito, por ejemplo, si se realiza una biopsia de músculo del
deltoides, bíceps, gemelos, se puede detectar al parásito si se coloca la muestra entre
dos portaobjetos, procedimiento llamado compresión o triquinoscopía. Cuando no se
pueden realizar pruebas directas entonces se recurre a las inmunológicas o
indirectas, las más utilizadas por su sensibilidad y confiabilidad son la prueba de
ELISA.
Otra parasitosis es la oncocercosis en donde los principales signos y
síntomas son nodulaciones subcutáneas, principalmente en la cabeza, y lo más grave
es la ceguera que se produce en la mayoría de los casos en pacientes adultos. El
diagnóstico de laboratorio se establece mediante la observación de los parásitos por
medio de la extirpación y disección de los nódulos subcutáneos, biopsia de piel de la
región escapular, examen de sedimento urinario u observación de la cámara anterior
del ojo.
Identificar morfológicamente a los diferentes nematodos de importancia médica
mediante el uso del microscopio.
• Identificar larvas de Uncinarias y Strongyloides stercoralis por observación de
laminillas fijas o muestras en fresco.
• Identificar la morfología de larvas o adultos de T. spiralis y Ochocerca volvulus
mediante preparaciones fijas.
• Identificar larvas de Trichinella spiralis mediante la observación de una biopsia
muscular de ratones infectados.
• Identificar adultos de Ascaris lumbricoides contenidos en formol.
110
1 juego Preparaciones fijas de
Enterobius vermicularis,
estrongilidos, onchocerca
volvulus
1 Ratón infectado con Trichinella
spiralis
1 par Portaobjetos desengrasados y
Por equipo
limpios
1 pieza Rollo de masking tape
2 Microscopio compuesto
1 Estuche de disección

• Mediante el uso del microscopio realizar observaciones de preparaciones fijas
de Enterobius vermicularis, estrongilidos, onchocerca volvulus.
• A un ratón anestesiado se le practicará una biopsia muscular de una de sus
patas posteriores y se colocará sobre seis ortaobjetos, enseguida se colocará
encima otro portaobjetos sujetando con masking-tape en los extremos de
ambos portaobjetos. Se observará la preparación bajo el microscopio.
7. Cuestionario.
1. ¿Cuál el fundamento de las técnicas de Baerman y Harada-Mori?

2. ¿Cuál sería la fuente de infección de Strongyloides stercoralis si el mecanismo
de entrada fuera oral?
111
3.- Si mediante el examen de biopsia de músculo no encontraras larvas de T. spiralis

¿qué otro examen de laboratorio practicarías para confirmar el diagnóstico?
3. ¿Para qué parasitosis se realiza la técnica de Graham?
4. ¿Qué diferencia morfológica existe entre machos y hembras de Ascaris
lumbricoides?
8. Bibliografía.
Enterobius vermicularis Strongilido

Onchocerca volvulus Trichinella spiralis

112
113
114
115
116
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Artrópodos de importancia médica
PRÁCTICA:
2. Introducción.
Los artrópodos son un grupo de organismos que se caracterizan por tener patas
articuladas, dimorfismo sexual, simetría bilateral y están cubiertos de quitina;
desde el punto de vista médico es importante estudiarlos ya que muchos son
transmisores de bacterias y virus así como parásitos como Trypanosoma cruzi,
Plasmodium sp., Leishmania mexicana, etc; otros son causantes de alergias,
algunos más afectan al hombre por la inoculación de sustancias tóxicas. Cuando
se realizan estudios epidemiológicos y campañas de erradicación de parasitosis
en donde el artrópodo juega un papel importante como ectoparásito del ser
humano, se necesita identificarlo con mucha precisión, ya que hay especies muy
parecidas; en estos casos se requiere tener un buen entrenamiento para su
identificación. Las claves de identificación taxonómica permiten su ubicación
rápida entre los ectoparásitos de importancia médica.
• Describir las características principales de los artrópodos de importancia
médica.
• Identificar morfológicamente algunos de los artrópodos más comunes en
México
• Identificar los órganos de los artrópodos que permiten diferenciarlos.
117
1 juego Preparaciones fijas de Por equipo
diferentes artrópodos
2 Microscopios compuestos

• El profesor mostrará a los alumnos características morfológicas principales de
los artrópodos que les permite identificarlos.
• Los alumnos observarán preparaciones fijas con algunos artrópodos de
importancia médica.
7. Cuestionario.
1.- ¿Cómo identificas una araña venenosa de la especie Lactrodectus

mactans?
2.- ¿Cuáles son las fases morfológicas por las que atraviesan los insectos
durante su desarrollo vital?
3.- ¿Cómo desarrollarías la vacuna contra un alacrán?
4.- ¿Cuál es la importancia médica de la Musca domestica?
5. ¿Cuáles son los arácnidos de importancia médica?
8. Bibliografía.

118
Artrópodo observado
Artrópodo observado Descripción
Descripción
Artrópodo observado
Artrópodo observado Descripción
Descripción
119
120
121
122
123
1. Identificación.
NOMBRE DE LA
Identificación de hongos
PRÁCTICA:
2. Introducción.
La Micología Médica se encarga del estudio de las enfermedades humanas

ocasionadas por hongos. Para el Médico Cirujano es importante que clínicamente
distinga una micosis pues de ello depende el éxito de su diagnóstico y al mismo
tiempo que el paciente se recupere. Dos aspectos importantes son la morfología y el
comportamiento de estos microorganismos. Por un lado conocer la morfología
macroscópica permite dar una idea clara sobre la presencia de hongos en una
superficie hasta en su medio de cultivo, mientras que la microscópica permite su
identificación ya que cada especie presenta diferentes características en color, tipo
de colonias, si producen pigmento.
Describir la morfología macroscópica y microscópica de hongos ambientales y

de importancia.
• A partir de una colección de hongos patógenos describir la morfología
macroscópica que presentan.
• Describir la morfología macro y microscópica de hongos ambientales.
124
1 Frasco de colorante azul de
Por equipo
metileno
1 pieza Rollo de cinta engomada Diurex o cinta Para todo el
transparente scotch grupo
2 Limpios y
portaobjetos Por equipo
desengrasados
2 Microscopios compuestos Por equipo

Una semana antes de la práctica el profesor pedirá que los alumnos, por
equipos, obtengan un alimento, preferentemente pan, tortilla, frutas o verduras. Les
pedirá que las encierren en una bolsa de plástico con un poco de agua dejándolas
bajo la sombra y durante una semana a temperatura ambiente; esto favorecerá el
crecimiento de hongos ambientales. Una vez llegando al laboratorio con sus hongos
desarrollados, les pedirá que describan sus características coloniales, color, tipo de
crecimiento y producción de pigmento. Tomarán una pequeña muestra con asa y
colocarán sobre un portaobjetos conteniendo previamente colorante de azul de
metileno; lo cubrirán con cubreobjetos y lo observarán al microscopio para describir
su morfología. A partir de una colección de hongos patógenos del humano tomar un
ejemplar y describir su morfología colonial.
7. Cuestionario.
¿Qué características morfológicas se deben tomar en cuenta en los hongos?
¿Cuáles son las técnicas que más se utilizan para el diagnóstico de hongos
superficiales?
¿Qué diferencia existe en un hongo ambiental y uno de importancia médica?
¿Qué técnica se utiliza para identificar un hongo que ocasiona infección superficial?
¿Cómo identificas una tiña?
125
8. Bibliografía.
• Bonifaz A. 2012. Micología Médica. Ed. Mc Graw Hill Interamericana.
• Arenas 2012. Micología Médica. Ed. Mc Graw Hill Interamericana
126
127
128
129
130

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO

INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA S ALUD

FECHA DE APROBACIÓN DEL MANUAL DE PRÁCTICAS, POR LA ACADEMIA DE

NOMBRE DE QUIENES PARTICIPARON EN LA ELABORACIÓN:

DR. MARCO ANTONIO BECERRIL FLORES

DRA. CLAUDIA ESPÍNOLA SAMPERIO

DR. JOSÉ LUIS IMBERT PALAFOX

VO. BO. DEL PRESIDENTE Y SECRETARIO DE LA ACADEMIA:

VO. BO. DEL JEFE DEL ÁREA ACADÉMICA DE MEDICINA:

FECHA DE LA ÚLTIMA REVISIÓN Y/O ACTUALIZACIÓN:

HUMBERTO AUGUSTO VERAS GODOY

ADOLFO PONTIGO LOYOLA

JOSÉ MARÍA BUSTO VILLARREAL

ARTURO FLORES ÁLVAREZ

OMAR ARTURO DOMÍNGUEZ RAMÍREZ

JORGE CASTELÁN MELÉNDEZ

LUIS CARLOS ROMERO QUEZADA

2.- Competencias. ................................................................................................................................ 5

A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRÁCTICAS.

Las prácticas de Microbiología permiten al alumno reforzar los conocimientos

a) Comunicación. Desarrollar en los estudiantes la capacidad de la

diversas fuentes que permitan un aprendizaje significativo y una

3.- Programa del Sistema de Prácticas y Actividades Extramuros.

B.- NORMAS DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS, LINEAMIENTOS Y MANUALES.

2.- Medidas de Seguridad en los Laboratorios, Talleres, Clínicas y

3.- Lineamientos de seguridad para trabajar en laboratorios, clínicas,

VIII. El usuario deberá revisar el mobiliario, equipo, herramienta y material que se

de nombrarse con apodos, malas palabras o faltarse al respeto de cualquier

C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA PRÁCTICA.

COMO PROCEDER EN CASO DE

▪ Lave inmediatamente con

permiten perfecta visibilidad

COMO PROCEDER EN CASO DE

▪ Desechar el material de vidrio o

Política Ambiental del Sistema Institucional de Gestión Ambiental de la UAEH

Es compromiso de la comunidad universitaria la

Objetivos Medioambientales de la UAEH

2.- Cuadro de disposición de residuos.

Cultivos y cepas de agentes

Residuos no anatómicos (Torundas,

b).- Residuos CRETI: Corrosivo, Reactivos, Explosivos, Tóxicos, Inflamable.

CORROSIVAS ALCALINAS DISOLVENTES ORGÁNICOS

DISOLVENTES CORROSIVAS ÁCIDAS

• Bromuro de Acetilo • Ácido Clorhídrico

No. DE PRÁCTICA: 1 No. DE SESIONES: 1

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 5

sustancias químicas y biológicas que eliminan al microorganismo, dentro de las

5. Reactivos/insumos, materiales/utensilios y equipos.

1 *Autoclave (*) 1 *Autoclave (*)

*Filtro con membrana de 0.22 cultivo agar

1 * Autoclave (*) 1 * Autoclave (*)

6. Desarrollo de la Actividad Práctica.

Cada equipo comenzará a trabajar con un tubo de cultivo bacteriano en medio

ESTERILIZACIÓN CON CALOR HÚMEDO

ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN:

ESTERILIZACIÓN POR LUZ U.V.

2. ¿Por qué el etanol elimina a los microorganismos?

3. ¿Por qué los halógenos evitan el crecimiento de los microorganismos?

4. ¿Por qué la luz U.V. afecta a los microorganismos?

5. ¿Por qué la membrana no permite el crecimiento de los microorganismos?

• Murray F. (2009). Microbiología médica. Editorial Elsevier. 2ª ed.

9. Formato y especificación del reporte de práctica.

No. DE PRÁCTICA: 2 No. DE SESIONES: 2

1 Autoclave () 1 Autoclave ()

1 * Autoclave () 1 Autoclave (*)