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Las Proteínas Son macromoléculas compuestas por unidades de alfa –aminoácidos que se
unen entre sí mediante enlaces peptídicos y que alcanzan un peso molecular igual o
superior a 5000 D.El enlace peptídico,característico de estos compuestos, resulta de la
reacción del grupo carboxilo de un aminoácido con el grupo amino del otro aminoácido, lo
cual da lugar a un enlace covalente de tipo carbamida .
REACCIÓN XANTOPROTEICA:La reacción xantoproteica es un método que se puede
utilizar para determinar la cantidad de proteína soluble en una solución . La prueba da
resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos,
especialmenteen presencia detirosina.Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un
álcali, se torna color amarillo oscuro o naranja.
El REACCIÓN DE BIURET: Es aquel que detecta la presencia de proteínas,péptidos cortos
y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición
desconocida.Está hecho de KOH y sulfato cúprico(CuSO4). El reactivo, de color azul,
cambia a violeta en presencia de proteínas,y vira a rosa cuando se combina con
polipéptidos de cadena corta.
La clara del huevo está constituida principalmente por proteínas (albúminas y globulinas).
La Albúmina de la clara del huevo es la ovomucina. Agitándose la clara del huevo con agua
se consigue separar la ovalbumina (soluble en agua) de la ovomucina (poco soluble en
agua).
Objetivos:
- Reconocer la presencia de algunos aminoácidos en las proteínas.
- Conocer algunas propiedades de las proteínas.
- Conocer la reacción xantoproteica y de biuret.
- Presenciar cómo reacciona la albúmina ante los reactivos respectivos.
A. Reacción de la Ninhidrina
La ninhidrina es específica para aminoácidos y proteínas, para diferenciar entre
carbohidratos, aminoácidos y proteínas. Reacciona con todos los α-aminoácidos contenidos
en la proteína dando lugar a la formación de un complejo color púrpura cuyo pH se
encuentra entre 4 y 8, a excepción de la prolina e hidroxiprolina que dan lugar a complejos
de color amarillo. Este complejo colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se estabiliza por
resonancia, el cual es independiente de la coloración original del aminoácido y/o proteína.
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos.
B. Reacción de Millon
Este reactivo está formado por una mezcla de nitrito y nitrato mercúrico disuelto en ácido
nítrico. Esta reacción se lleva a cabo con residuos fenólicos, es decir, proteínas que
contienen tirosina para la formación de nitrotirosina. Las proteínas se precipitan por acción
de los ácidos inorgánicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve
gradualmente rojo al calentar por formación de una sal mercúrica.
C. Prueba de Nitroprusiato
Es específico para aminoácidos o proteínas que contienen azufre, -SH (cisteína y cistina) da
un color rojo-púrpura llamado “prueba de Mörner”.
D. Prueba de Sakaguchi
Esta prueba es específica para Arginina o proteínas que la contienen. Es positiva para el
aminoácido que contiene el grupo guanidina en la Arginina. El grupo guanidina presente en
el aminoácido reacciona con α-naftol e hipobromito alcalino para dar un complejo de color
rojo.