Cromatografía de capa fina

Universidad Nacional de Colombia - Facultad de ingeniería

Laboratorio de principios de química orgánica

Resumen
En la práctica experimental se llevó a cabo una cromatografía en capa delgada, con el fin de caracterizar las sustancias
presentes en la muestra 6. El sistema de muestras en las cromatoplacas fue colocado en tres cápsulas con éter de
petróleo, MEK y metanol, al observar que no ocurrió una separación de sustancias exitosa, se procedió a cambiar el
eluyente por una mezcla 9:1 de tolueno y MEK respectivamente. Se obtuvo

1. Metodología b. Desarrollo de las placas:

a. Preparación de la placa y aplicación de la
muestra: Colocar 0,8 cm de altura del
Limpiar y secar el eluyente, sin tocar la línea de origen
portaobjetos de la fase
Hacer marca de
estacionaria
frente del disolvente
Introducir los portaobjetos y
a 1cm
Sumergir por 10 segundos tapar el frasco
los portaobjetos en el
frasco cilíndrico con la fase Llevar a cabo el
estacionaria silicagel desarrollo de las Marcar el frente del solvente, medir las
placas distancias desde la línea de origen

Secar al ambiente y activar

las placas en la estufa Calcular la medida de velocidad del
compuesto o Rf

Trazar línea de origen con

capilar de 1- 1,5 cm Hacer análisis de los eluyentes
con base a la polaridad

Colocar 3 manchas de la
solución a cromatografiar Comparar resultados con otros
grupos que hayan utilizado los
mismos disolventes
Realizar la aplicación con los
capilares 3 veces si la
solución es muy diluida

1
2. Resultados Tiempo vs Altura de aceite
2.5 Hidrodestilacion
Datos de inicio del proceso:

Altura de aceite (cm)

Hidrodestilación
Parámetro Medida ± 0,001 g 1.5
Masa de agua 604,059
Masa de muestra 219,820 1
Masa de hidrodestilado 137,724
Masa de agua en tubo U 10,003 0.5

Parámetro Medida ± 0,01 cm

0
Altura de aceite 1,90
0 20 40 60 80 100 120
Diámetro tubo U 1,00 Tiempo (min)
Tabla 1. Datos de inicio para la hidrodestilación
Grafica 1. Altura de aceite vs Tiempo para la hidrodestilación

Destilación por arrastre de vapor

DESTILACION ARRASTRE CON VAPOR
Parámetro Medida ± 0,001 g
Masa de agua 716,964 Altura del aceite
Tiempo (min)
(cm)
Masa de muestra 140,450
0 0
Masa de hidrodestilado N/R
1,1 0,1
Masa de agua en tubo U 9,736
3 0,3
Parámetro Medida ± 0,01 cm
4 0,4
Altura de aceite 0,70
6,3 0,5
Diámetro tubo U 1,30
8 0,6
Tabla 2. Datos de inicio para la destilación por arrastre con
vapor 12 0,7
Tabla 4. Datos de proceso en la extracción por destilación con
arrastre con vapor
Datos obtenidos durante el proceso:

Tiempo vs Altura de aceite

HIDRODESTILACIÓN
Destilación arrastre con vapor
Altura del aceite 0.8
Tiempo (min)
(cm)
0.7
0 0 0.6
Altura aceite (cm)

20 0,7 0.5
40 1,2 0.4
66 1,5 0.3
76 1,7 0.2
86 1,9 0.1
97 1,9 0
0 5 10 15
Tabla 3. Datos de proceso en la extracción por hidrodestilación Tiempo (min)
Grafica 2. Altura de aceite vs Tiempo para la destilación de
arrastre con vapor

2
 LIMONENO
Datos después del proceso: Formula
Para conocer la masa de aceite esencial que se obtuvo
de la extracción se usa la siguiente formula:
𝑚 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 = 𝜋𝑟 2 ℎ × 𝜌
Donde r es el radio del tubo en u, h la altura del aceite
y ρ la densidad teórica del aceite esencial. Según esto
se tiene:
 Hidrodestilación:
𝑚 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 = 𝜋(0,52 )1,9 × 0,8423

𝑚 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 = 1,2569 𝑔 % p20/4 n20/D

94,9 0,8411 1,4749
Tabla 5.
 Destilación de arrastre con vapor
Propiedades del limoneno
𝑚 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 = 𝜋(0,652 )0,7 × 0,8423
MIRCENO
𝑚 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 = 0,7826 𝑔 𝑔
Formula
Se calculan los rendimientos obtenidos por cada
método y los índices de refracción respectivos para el
aceite esencial:

Arrastre con
Hidrodestilación
vapor
Rendimiento
0,572 0,557
(%)
Índice de
𝑛19,3
𝐷 = 1,4640 𝑛18
𝐷 = 1,4516
refracción

% p20/4 n20/D
Tabla 1,69 0,791 1,465 6.
3. Datos teóricos Propiedades del mirceno

 Componentes del aceite esencial de naranja

Los principales componentes del aceite esencial de
la naranja son 3, limoneno el cual está en mayor
porcentaje y es el más característico, seguido del
linálol y el mircelo.

3
 LINALOL
 Hidrodestilación
Formula

% p20/4 n20/D
1,19 0,8622 1,46238

Imagen 1. Diagrama de bloques de la hidrodestilación

 Destilación arrastre con vapor:

4
 Imagen 2. Diagrama de Bloques de la destilación por arrastre con vapor
ópticamente activo que tiene variedad levógira y
dextrógira, este compuesto es usado como disolvente
4. Discusión de resultados de resinas, pigmentos, tintas y ampliamente usado por
las industrias alimentarias y farmacéutica.[2]
Para el análisis se cortó la cascara en porciones más
pequeñas para que la densidad de carga aumente en el
recipiente del extractor de aceites esenciales y a la vez
para mejorar y facilitar la posterior extracción, este
aceite esencial de naranja se encuentra principalmente
en sacos de forma ovalada en el flavedo o en la porción
anaranjada de la cascara y actúa como una barrera
toxica natural para muchos microorganismos e insectos.
[1]

Se extrajo aceite esencial de la cascara de naranja

mediante dos métodos: destilación por arrastre con
vapor e hidrodestilación con un rendimiento de 0,557%
y de 0,572% respectivamente. Teóricamente el arrastre
con vapor tiene un rendimiento de 0,4% para el arrastre
con vapor y de un 0,42% para la hidrodestilación. [1] Se
observaron muy buenos rendimientos en ambas
destilaciones, sin embargo, estos cambian según la
especie especifica de naranja y el momento de madurez
de la fruta entre otros. El principal componente del A.E
de naranja es el limoneno el cual es un monoterpeno
Imagen 3. Producto de la hidrodestilación
En la imagen 1. Se puede ver la parte aceitosa del
producto de la hidrodestilación y se puede evidenciar
una coloración en la parte acuosa lo que indica presencia
de componentes solubles de la cascara de naranja,
pueden ser los carotenoides son producidos en los
cromoplastos en los flavedos de las células ya que el
aceite esencial de los cítricos en especial el de naranja es

5
muy poco soluble en agua. Otra razón de esta coloración Al comparar los índices de refracción reportados
en el hidrodestilado se debe a que se pude pasar mezcla teóricamente para el aceite esencial de naranja 𝑛𝐷20 =
liquida a través de los tubos del montaje ya que se 1,470 y para el limoneno que es su mayor componente
formaba bastante espuma [3] 𝑛𝐷20 = 1,4727 − 1,4749 se alejan de los encontrados
Como se evidencia en las gráficas 1 y 2 de altura del experimentalmente ya que para la destilación por arrastre
aceite vs tiempo se dio por terminada la extracción con vapor es de𝑛18𝐷 = 1,4516 y para la hidrodestilación
19,3
cuando se evidencio un decrecimiento en la cantidad de 𝑛𝐷 =1,4640 . Esto indica la presencia de impurezas en el
aceite producida por tiempo demostrando que la aceite probablemente por emulsiones formadas por el
materia prima llega a un punto de agotamiento. [4] agua un buen método para solucionarlo es agregar a la
mezcla sulfato de sodio que elimina el agua del AE y
Para el balance de materia es evidente que en el posteriormente por un proceso de filtración puede ser
proceso de destilación por arrastre con vapor el agua se separado. [6]
calienta en un recipiente aparte y el proceso ocurre en
el punto de saturación que a la presión atmosférica de
Bogotá tiene una temperatura de 92°C. Mediante la  Destilación arrastre con vapor
inyección de vapor saturado al recipiente de la materia |1,470 − 1,4516|
% 𝐸𝑟 = ∗ 100 = 1,25%
prima se tiene como objetivo formar una fase inmiscible 1,470
que cederá su calor latente a la mezcla a destilar para  Hidrodestilación
lograr su evaporación y cada uno de los componentes |1,470 − 1,4640|
ejercerá su propia presión. La expresión será: % 𝐸𝑟 = ∗ 100 = 0,41%
1,470
𝑚𝑎𝑔𝑢𝑎 + 𝑚𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎 𝑝𝑟𝑖𝑚𝑎 − 𝑚ℎ𝑖𝑑𝑟𝑜𝑑𝑒𝑠𝑡𝑖𝑙𝑎𝑑𝑜 − 𝑚𝐴𝐶 Por último, se calculó la eficiencia de los diferentes
= 𝑚𝑎𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠 métodos
𝑚𝑎𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑒𝑥𝑡𝑟𝑎𝑖𝑑𝑎
= 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑛𝑜 𝑠𝑒 𝑒𝑣𝑎𝑝𝑜𝑟𝑜 ȵ= ∗ 100
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑎
+ 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎 𝑝𝑟𝑖𝑚𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑔𝑎𝑠𝑡𝑎𝑑𝑎
 Destilación arrastre con vapor
716,964 𝑔 + 140,450 𝑔 − 𝑚ℎ𝑖𝑑𝑟𝑜𝑑𝑒𝑠𝑡𝑖𝑙𝑎𝑑𝑜 − 0,7826 𝑔
= 𝑚𝑎𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠 1,2569 𝑔
ȵ= ∗ 100 = 143%
0,879 𝑔
De forma análoga ocurre para la hidrodestilación, la  Hidrodestilación
masa del tubo en U se tiene en cuenta en la masa del 0,7826 𝑔
hidrodestilado, el hidrolato del método de la ȵ= ∗ 100 = 139%
0,5618 𝑔
hidrodestilación se tiene en el recipiente donde
inicialmente se tiene la materia prima ya que son todos
Se tiene que según los experimentos es más eficiente
los compuestos solubles que el vapor no puede
el método de la hidrodestilación.
arrastrar, mientras que el hidrodestilado es la parte
soluble de los compuestos de naranja que el vapor si
puede arrastrar o los que son de bajo peso molecular [5]

604,059 𝑔 + 219,82 𝑔 − 137,724 𝑔 − 1,2569 𝑔

= 𝑚𝑎𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠

6
5. Cuestionario
 ¿Qué ocurre si al introducir la plancha en la
cámara cromatográfica, el nivel del
eluyente alcanza el sitio de aplicación en la
mancha?
El eluyente disolvería las manchas tanto de la
muestra problema como de los patrones obstruyendo
el proceso de cromatografía y llevando a la obtención
de datos erróneos.
 ¿Cuál es el efecto de la polaridad en la
cromatografía?
La polaridad de los componentes es el factor mas
influyente en la separación, la placa formada
principalmente por silicagel es muy polar y atrae a los
componentes mas polares. Por el contrario, el eluyente
es menos polar y atrae a los compuestos apolares. De
esta manera, los componentes más polares quedarán
más cerca de la línea de origen ya que su velocidad de
desplazamiento es menor debido a que interaccionan
con el soporte.
La polaridad del eluyente permite que el
desplazamiento de los componentes sea rápido o lento.
 ¿Cuáles son las consecuencias de una
columna mal empacada?
Una de las cosas mas importantes para el material
de relleno de las columnas, es el tamaño y distribución
de las partículas. Esto depende de la retención y
volumen de elución al que aparecerán los solutos. Si la
columna esta mal empacada los resultados de la
cromatografía serán erróneos.
 ¿Cuáles son las diferencias entre la
cromatografía liquida y de gases?
La cromatografía de gases es una técnica en donde
la muestra que se volatiliza se inyecta en la cabeza de
una columna cromatográfica. La elución se da por un
gas inerte (fase móvil). En este tipo de cromatografía la
fase móvil no interactúa con las moléculas del analito,
7
su función es transportar el analito por medio de la
columna.
En la cromatografía liquida, la fase móvil es un
líquido que fluye por una columna que contiene a la
fase estacionaria, está cromatografía no está limitada
por la volatilidad o estabilidad térmica de la muestra.
Este procedimiento se puede llevar por columna o
platos.
 Profundización sobre fluorescencia para
sustancias incoloras.
Si las sustancias utilizadas en la cromatografía no son
coloreadas, se utilizan otros métodos para su
localización, normalmente se emplea una lámpara UV
donde sustancias que son incoloras a la luz ordinaria
presentan una fuerte fluorescencia a la luz ultravioleta.
 Parámetros de la cromatografía liquida de
alta eficiencia.
Dentro de los parámetros para este tipo de
cromatografía están:
Diámetro interno: de esta forma se determina la
cantidad de muestra que se puede cargar a la columna
y su sensibilidad. Los diámetros grandes (>10mm) se
utilizan para la purificación de compuestos y los
diámetros pequeños (4-5mm) se utilizan para la
determinación cuantitativa de muestras.
Medida de las partículas: las más pequeñas
presentes en la fase estacionaria ofrecen mayor
superficie y mejor separación, en otras palabras, mejor
resolución de columna. Pero a su vez se aumenta la
presión requerida para tener una velocidad lineal ideal.
Tamaño de poro: Los pequeños dan mayor
superficie mientras que los de mayor medida
proporcionan mayor energía cinética.
Presión del sistema: La presión de las bombas varía
según el modelo, pero el rendimiento se mide en la
habilidad para producir flujo constante.
  En qué orden (de arriba hacia abajo) se
puede esperar encontrar los siguientes
compuestos: naftaleno, ácido butírico y
acetato de fenilo en un gel de placa TCL de
sílice desarrollada con diclorometano.
Ácido butírico, acetato de fenilo (Ester), naftaleno
(hidrocarburo aromático). Este es el orden según la tabla
presente en los anexos.
 De qué manera influye la saturación de la
cámara en el proceso de separación.
Garantiza que la fase móvil cuando se mueve por la
cromatoplaca no se seque y se desplace de manera
adecuada.

 Organice los siguientes compuestos en 6. Conclusiones

orden creciente de Rf empleando silica como
fase estacionaria en cromatografía en capa
delgada: ácido acético, acetaldehído, 2-  Ambos métodos de extracción de aceite esencial
octanona, decano y 1-butanol. dan rendimientos similares sin embargo el método
de hidrodestilación es más eficiente con un 143%.
La medida de la velocidad (Rf) es la relación de la
distancia recorrida por la mancha desde la línea de  El índice de refracción demuestra que los aceites
origen dividido en la distancia recorrida por el eluyente esenciales obtenidos están contaminados
en el punto de aplicación. Teniendo en cuenta la posiblemente con agua y es apropiado eliminar el
polaridad el orden es decano, 2- octanona, agua usando sulfato de sodio.
acetaldehído, 1- butanol y ácido acético.
 Es importante tener en cuenta el tipo de naranja
usada ya que las condiciones de humedad, lugar de
 Qué efecto se produce si se siembra mucha siembra, madurez entre otros condicionan el
muestra en la cromatoplaca. rendimiento de la extracción del aceite esencial
Si la muestra está demasiado concentrada cuando la
fase móvil comienza a arrastrarse, la muestra forma una
estela que dificulta la lectura de la longitud. 7. Bibliografía
[1] CONCEPTOS FUNDAMENTALES DE
 Se observa una mancha con un Rf de 0,62 CROMATOGRAFÍA. (n.d.). Retrieved from
después de desarrollar la cromatoplaca para https://docplayer.es/2396459-Conceptos-
una mezcla de reacción. ¿prueba esto que fundamentales-de-cromatografia.html
usted tiene solo un producto presente?
Explique.
[2]
Para determinar con mayor exactitud se debe
comparar el recorrido de los patrones y de la muestra,
de igual forma se deben realizar ensayos con diferentes [3]
fases móviles para determinar si aparece uno o más
colores. En este caso habría más de una sustancia. No [4]
seria suficiente tener un Rf de 0,62 para determinar que
exista una sola sustancia ya que la fase móvil puede ser
muy fuerte y arrastrar la muestra hasta un punto. [5]

8
[6]

[7]
Anexos