Artículo de Biología Celular y Molecular N°1.

Presentado el 12 de Octubre de 2016 – Grupo 03A

ACCIÓN ENZIMÁTICA. PRÁCTICA #6

José Javier Doria, Amalfi Peralta, José Paternina

Universidad de Córdoba
Facultad de Ciencias Agrícolas
Ingeniería Agronómica
Montería
2016

Presentado a: Gabriel Montes Fuentes *

Docente Biología Celular y Molecular. Universidad de Córdoba

RESUMEN: Durante la práctica se trató de poner de manifiesto alguno de los factores que
afectan la actividad enzimática.

Palabras Clave: Proteínas, enzimas, sustratos, reactivos, temperatura, catalasa.

1. OBJETIVOS Durante la práctica se tratará de poner de

• Interpretar con claridad los mecanismos
subyacentes de la acción enzimática sobre
sustratos específicos.
• Analizar los mecanismos subyacentes de
la actividad de la catalasa en tejido animal
y vegetal.
2. INTRODUCCIÓN
Las enzimas son proteínas globulares
formadas por una o más cadenas
polipeptídicas. Aceleran la velocidad de
las reacciones químicas, participando en
su mecanismo pero sin sufrir un cambio
químico permanente. También influyen
sobre el rendimiento, ya que aseguran que
todo el reactivo se transforme en producto
y que no aparezcan productos
secundarios. Las enzimas actúan sobre
sustancias llamadas sustratos, que es la
molécula que se va a transformar, son
altamente específicas, variando su
actividad con la modificación del pH, la
temperatura, concentraciones de enzima y
sustrato; estas pueden ser inhibidas por
sustancias llamadas venenos enzimáticos.
manifiesto alguno de los factores que
afectan la actividad enzimática.
3. MARCO TEÓRICO
Las enzimas son moléculas de proteínas que
tienen la capacidad de facilitar y acelerar las
reacciones químicas que tienen lugar en los
tejidos vivos, disminuyendo el nivel de la
"energía de activación" propia de la reacción. A
diferencia de los catalizadores químicos, las
enzimas actúan en condiciones muy suaves, a
temperaturas por debajo de los 70°C, a un PH
alrededor de 7 y a una presión de una atmosfera.
Las enzimas son generalmente proteínas
globulares que pueden presentar tamaños muy
variables, desde 62 aminoácidos como en el caso
del monómero dela 4-oxalocrotonato
tautomerasa, hasta los 2.500 presentes en la
sintasa de ácidos grasos. Las actividades de las
enzimas vienen determinadas por su estructura
tridimensional, la cual viene a su vez determinada
por la secuencia de aminoácidos
4. MATERIALES Y METODOS
Materiales:
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• Tubos de ensayo • Gotero

• Pinzas para tubos de ensayo • Pipetas de 5 ml
• Solución de almidón al 1% • Pera de succión
• Saliva • Guantes quirúrgicos
• Solución de lugol • Cinta de enmascarar
• Reactivo de Benedict • Papa
• Pastillas de cuajo (renina) •Agua oxigenada (peróxido de hidrogeno)
• Ácido clorhídrico al 10% y concentrado • Trozo de hígado
• 30 ml de leche • Hojas de afeitar
• Zanahoria

Métodos +
Calentar x 3 min.
Actividad de la Amilasa

a) Acción de la Renina

2 ml de saliva

5ml de leche 5ml de leche

+ +
2 gotas 10 gotas 2 gotas de lugol 10 gotas de renina
+
10 gotas de renina

4ml de Almidón 4ml de Almidón

+ + Acción de la Catalasa
6 gotas de Benedict 2 gotas de lugol
+
Calentar x 3 minutos Papa
Zanahoria
Hígado
b)

2ml de saliva + 5 gotas de Hcl 5. DATOS OBTENIDOS

Prueba a los
5minutos
Tubo N° Enzima lugol benedict
2 gotas 10 gotas (amilasa)
1 Activa positivo
2 negativo
3 Inactiva positivo
4ml de Almidón 4ml de Almidón 4 positivo
+ +
6 gotas de Benedict 2 gotas de lugol
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Descripción de
Tubo N° observaciones
1(leche + renina) La reacción fue
más rápida y más
intensa que la del
tubo 2
2(leche + renina + La reacción fue
HCL al 100%) más lenta menos
intensa que la del
tubo 1
6. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE
RESULTADO.
6.1.¿En qué tubo se muestra la
actividad de la enzima de la saliva?
¿Cómo lo has demostrado?
En el tubo 2, donde la saliva a pesar de
ser combinada con el reactivo de lugol
sigue teniendo un control dominante
sobre esta sustancia.
6.2.¿en qué tubo se ha inactivado la
enzima? ¿por qué no ha actuado?
En el tubo N°4 donde la coloración fue
más intensa dando un color positivo de
color más oscuro al agregarle el reactivo
de Benedict.
6.3. ¿Por qué se hace necesario esperar
cinco minutos para observar los
resultados?
Se debe esperar 5 minutos para que el
reactivo surja efecto en la reacción.
6.4. Cuál es la función del HCL en esta
reacción.
Es muy corrosivo y ácido. Se emplea
comúnmente como reactivo químico y se
trata de un ácido fuerte que se disocia
completamente en disolución acuosa. Una
disolución concentrada de ácido
clorhídrico tiene un pH de menos de 1;
una disolución de HCl 1 M da un pH de
0.
El clorhídrico se utiliza sobre todo como
ácido barato fuerte y volátil. El uso más
conocido es el de desincrustante para
eliminar residuos de caliza (carbonato
cálcico: CaCO3). En esta aplicación se
transforma el carbonato cálcico en cloruro
cálcico más soluble y se liberan dióxido
de carbono (CO2) y agua
6.5. ¿Cuál es el efecto del ácido
clorhídrico sobre la catalasa?
Al aplicar el ácido clorhídrico en la
catalasa, hubo una disminución de
velocidad de las reacciones.
6.6. Al cocinar los alimentos demasiado
¿Cómo influye en la actividad de las
enzimas?
La temperatura influye mucho en la
desnaturalización de proteínas (enzimas).
En las enzimas un aumento de
temperatura provoca un aumento en la
velocidad de reacción hasta una cierta
temperatura óptima. Cada enzima tiene un
intervalo óptimo de temperatura en el cual
se logra mayor actividad enzimática, la
mayoría de las enzimas tiene su
temperatura óptima entre 30 y 45° y se
inactiva a mayor de los 55°C.
Así que cuando calientas demasiado los
alimentos puede que la enzima inactive, o
puede que acelere aumente la velocidad
de reacción.
Cuando mayor es la temperatura mayor es
la velocidad de reacción y la actividad
enzimática. La velocidad de reacción
aumenta debido a que hay más moléculas
con la energía suficiente para entrar al
estado de transición.
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6.7. Cuando el H2O2 es agregado a

heridas produce burbujas ¿Qué
indica esto?

El peróxido de hidrogeno, H2O2, Es un

líquido oxidante, que al entrar en contacto
con materia orgánica, se reduce a agua
común liberando oxígeno, que es lo que
mata a las bacterias.

7. PREGUNTAS
COMPLEMENTARIAS.

7.1 ¿Qué cambios puede sufrir, en

relación a la estructura químicas y
el número inicial de moléculas, de
sustrato y la enzima en una
reacción química?
R: // El sustrato tiende a disminuir su
concentración ya que es modificado por la
enzima, esta suele permanecer constante
ya que solo actúa como catalizador. El
número de enzimas permanece igual, lo
que hace que la enzima es acelerar la
velocidad en la que el sustrato se vuelve
producto, así que el sustrato disminuye
hasta llegar a un equilibrio

7.2 Relacione los siguientes conceptos

en un párrafo de no más de diez
renglones: enzima alostérica,
interacción alostérica y efector
alostérico.

La interacción alostérica consiste en el

cambio estructural de una proteína, es
decir, sus receptores cambian las enzimas
alostéricas poseen dos sitios activos en el
primero se unirá un sustrato determinado,
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mientras que en el segundo también
conocido como sitio alostérico, se une un
factor el cual produce un cambio en la
proteína, llevándolos a una regulación de
actividad de estos. Los factores pueden
ser tanto negativos como positivos. En
caso de los positivos, favorecen la entrada
de sustrato, en cambio el factor negativo
modifica la estructura de la proteína, de la
forma que el sustrato no pueda unirse al
sitio activo de este.
7.3 Cite cinco ejemplos de enzimas con
sus sustratos respectivos.
1. Maltasa hidroliza la maltosa (sustrato)
en dos unidades de glucosa (producto)
Hidrolizar: romper enlaces con
participación del agua
Por lo tanto la Maltasa es una hidrolasa,
se encuentra en el intestino delgado.
2. Amilasa (hidrolasa): la alfa amilasa
actúa sobre los enlaces de las unidades de
glucosa que componen el almidón.
Sustrato el almidón -------> unidades
libres de glucosa
3. Catalasa es una oxidasa
descompone el peróxido de hidrógeno en
agua y oxígeno
2 H2O2 ----------> 2H2O + O2
Se encuentra en los glóbulos rojos
4. Fosforilasas enzimas que agregan
grupos fosfato a una molécula
ADP + Pi + energía -------> ATP
5. Lipasas rompen enlaces ésteres
grasas --------> ácidos grasos + glicerol
8 CONCLUSIÓN
Del análisis de los resultados de
laboratorio se pudo determinar que la
temperatura es un factor determinante en
las reacciones enzimáticas, porque acelera
o retarda la acción de las enzimas, lo que
se evidencia con la producción de
burbujas. Por otra parte la catalasa
funciona correctamente, debe tener un pH
neutro y a temperatura ambiente, sin
embargo, al disminuir la temperatura, los
choques entre las moléculas disminuyen
también.
8. BIBLIOGRAFIA
Lehninger. Principios de bioquímica
(2006) David L. Nelson; Michael M. Cox.
4ª Edición. Ediciones Omega. Principios
de Bioquímica (2001) Albert L.
Lehninger, David L. Nelson; Michael M.
Cox. (1997) (2ª y 3ª edición). Ediciones
Omega.
Matthew C.K., Van Holde K.E. y Ahern,
K.G. (2002) Bioquímica 3ª edición. Ed.
Addison Wesley. Bioquímica (1989)
Rawn, J.D. Interamericana McGraw-Hill
(1º y 2º volúmenes)
Stryer, L. (2002 3ª edición. Ed. Reverté.
Fersht, A. (1985) Enzyme structure and
Mechanism. W. H. Freeman and
Company, New York.
Jenks, W.P. (1987) Catalysis in
Chemistry and Enzymology. Dover
Publications Inc. New York. Christensen,
H.N. y Palmer, G.A. (1980) Cinética
enzimática. Ed. Reverté. Barcelona.