Estudio de la formación de suelos mediante técnicas isotópicas

Instituto Peruano de Energía Nuclear
“Estudio de la formación de suelos a

partir del uso de la tierra mediante el
empleo de técnicas isotópicas”
Ing. Gerardo Maghella Seminario
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IPEN : Trabajando en las fronteras de la ciencia
IPEN, 2012
Los Isótopos Estables son uno de los “registradores”

ecológicos naturales.
Lo fundamental para entender cómo la técnica de CSSI

(Compound Specific Stable Isotopes) funciona es a través de:
• Una comprensión básica de qué son isótopos estables
• Los términos usados,
• Cómo los isótopos estables son medidos y
• Cómo los valores medidos son interpretados
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IPEN, 2015
• Los isótopos estables son no radiactivos

• No tienen vida media, no decaen
• No se degradan a otros elementos en el tiempo
• Estos 5 isótopos estables se usan para estudiar temas de
alimentos
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IPEN, 2015
Los isótopos estables usados en la técnica de CSSI están basados en el carbono

Carbono tiene 2 isótopos estables 12C and 13C, + 1 isótopo radiactivo 14C
12 C es carbono elemental (98.9%) y es referido como el isótopo ligero
13 C es carbono elemental con 1 neutrón extra y es el “isótopo pesado”
12C y 13C tienen las mismas propiedades químicas y, en promedio, 1.1% corresponde
al 13C
La diferencia útil importante está en la tasa de reacción: 13C es más lento que el 12C
Esta diferencia permite al 12C pasar a través de una pared celular más rápido que el
13C
Esto origina una mayor concentración de 13 C en el lado inicial y más 12 C en el otro

lado.
Este proceso se llama fraccionamiento.

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IPEN, 2015
La diferencia en las concentraciones de 12C y 13C debido al

fraccionamiento a través de 1 pared celular es menor, alrededor de 1 parte
por 1000 (‰).
Esta diferencia es medida por espectrometría de masas que da como

resultado un cambio en el valor del 13C de 1.1% to 1.1001%.
La notación Delta (δ) se inventó para ver el cambio en la concentración mas

que la concentracion real usando la ecuación:
δ13C = [ (Rmuestra / Rstandard ) – 1 ] x 1000 ‰ (llamada “por mil”)
donde R es la relación del isótopo pesado al liviano i.e., 13C/12C

Los nuevos espectrómetros de masa miden estas relaciones y dan resultados
en la notación delta; i.e. ellos son Espectrómetros de Masa de Relación
isotópica (IRMS)
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IPEN, 2015
• Los Isótopos estables usan la notación Delta o δ
δ13C = [ (Rmuestra / Rstandard ) – 1 ] x 1000 ‰ (llamada “por mil”)
Donde R es la relación molar de isótopo pesado al liviano de la muestra y el

estandard:
Por convención de nomenclatura
Se nombra el valor δ del isótopo pesado.

El isótopo pesado del carbono es el δ13C
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IPEN, 2015
Base de Isotopos Estables
• El fraccionamiento del 13C a través de 1 pared celular o “etapa biológica”

es 1 ‰
• La fuente de inicio de 13C se incrementa o se convierte isotópicamente
enriquecida al 1 ‰ mientras que la fuente de destino decrece o se
convierrte isotópicamente disminuida en 1 ‰.
• Una simple interpretación de los datos de 13C es que el enriquecimiento
al 3 ‰ significa que hubo 3 etapas de fraccionamiento en el proceso.
• Las mediciones de IRMS de δ13C típicamente tienen una precisión de ±
0.1 ‰.
• La técnica de CSSI usa las diferencias en el enriquecimiento isotópico o la
disminución de los átomos de 13C en los compuestos orgánicos
producidos por las plantas.
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IPEN, 2015
Concepto detrás de la técnica de CSSI
• Aparte de los minerales, el suelo contiene carbono en la materia orgánica a

partir de las plantas.
• El uso de la tierra está típicamente descrito por la comunidad de la
vegetación asociada en ella, es decir, pastos, cultivos, bosques, horticultura,
etc.
• La comunidad de la vegetación produce un rango de compuestos orgánicos
que “fugan” dentro del suelo desde las raíces y enlazan a las partículas de
suelo convirtiéndose en “marcadoras” de aquel uso de la tierra.
• Estas marcas no son partes separadas del material de la planta. Son
compuestos químicos que se convierten en parte integral de cada partícula
del suelo.
• Incluso forman parte del Carbono total del suelo.
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IPEN, 2015
• Las Plantas producen un rango de compuestos orgánicos

Carbohidratos Proteínas Lípidos Acidos nucleicos
Celulosa Aminoácidos Ácidos Grasos DNA, RNA

Saturados e
Insaturados
Almidón Enzimas Esteroles Alcoholes
Azúcares Ceras y resinas Glucósidos

Esteroides
Grasas y Aceites Alcaloides
Hormonas Aromáticos
Estos compuestos son producidos por diferentes partes de la planta:

e.g., semillos, frutos, flores, hojas, tallos y raíces
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IPEN, 2015
• La técnica CSSI usa la cadena directa de ácidos grasos del C14 al C24
como biomarcadores
• Cada ácido graso biomarcador tiene una secuencia de átomos de carbono

• Cada átomo de carbono tiene un valor específico de δ13C
• Éste se combina para dar el ácido graso biomarcador y el valor del isótopo
estable del compuesto específico (valor CSSI)
• Este valor CSSI es característico para aquel compuesto tal cual fue
producido por una planta específica.
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IPEN, 2015
• La clave para discriminar entre suelos de tierras de diferente uso es que

diferentes plantas producen estos ácidos grasos en formas ligeramenmte
diferentes.
• Estos cambios en el fraccionamiento isotópico del 13C en cada ácido

graso le da una diferente huella isotópica de δ13C, dependiendo de la
comunidad de la vegetación.
IPEN, 2015
Carbono total Ácidos Grasos (CSSI)

Uso de la  13C Miristico Palmítico Oleico
tierra/Fuentes (o/oo) (C14:0) (C16:0) C18:1)
(o/oo) (o/oo) (o/oo)
Pastura -22.2 -27.0 -24.0 -21.6

Bosque Nativo -27.7 -34.9 -30.4 -28.2
(Nikau)
Bosque Nativo -25.1 -28.9 -25.6 -27.8

(Kauri)
Bosque de -26.2 -40.7 -32.4 -29.5

Pinos (Maduro)
Bosque de -26.5 -32.7 -28.7 -28.2

Pinos (talado)
Pastos marinos -8.0 -11.7 -10.9 -16.9

(estuarios)
IPEN, 2015
• La forma en que la planta usa el CO2 para la fotosíntesis

tiene un gran efecto en el δ13C total
• Las 2 formas de fotosíntesis, C3 and C4, producen diferente
fraccionamiento isotópico.
IPEN, 2015
• Pequeñas diferencias dentro de las formas C3 y C4 en

diferentes plantas producen niveles de fraccionamiento
isotópico, las mismas que producen un rango de valores
isotópicos parta cada ácido graso.
IPEN, 2015
• Los residuos animales pueden afectar los valores

isotópicos del suelo
Dieta cambiada a maíz ensilado
Máximo enriquecimiento
de C4 mantenido después
de 18 días (C4)
Dieta de césped inglés ensilado d13C
IPEN, 2015
Conclusiones
Los isótopos estables pueden:

• Distinguir entre suelos de diferente uso basados en las diferencias en los
ácidos grasos producidos por las comunidades de la vegetación.
• Distinguir entre pastos usados para diferente pastoreo de diferente
animal.
• Distinguir entre prácticas en el uso de la tierra de alimentos importados
para animales.
• Distinguir entre prácticas en el uso de la tierra usando estiercol animal y
fertilizantes artificiales.
• Distinguir entre fuentes de sedimentos de tierra o mar.
Estas diferencias permiten a la técnica de CSSI identificar y prorratear
información de los orígenes del suelo, por el uso de la misma, contribuyendo
a los sedimentos que se deslicen cuesta abajo desde la zona de erosión.
IPEN, 2015
Visión del CSSI para identificar zonas calientes de

degradación de suelos en paisajes
IPEN, 2015
Situación Actual
• 40% del suelo usado para la agricultura alrededor del mundo está
clasificado ya sea como degradado o seriamente degradado.
• La reducción en el secuestramiento del carbon dentro del suelo reduce la
fertilidad del mismo.
Las prácticas de uso de las tierras orientadas a:

• Quema de cultivos,
• sobre arado
• sobrepastoreo
• deforestación
Mientras estas práctiicas de uso de la tierra reducen el secuestramiento del

carbono dentro del suelo, también exponen a la tierra arable potenciando la
erosion por lluvia y viento.
IPEN, 2015
La degradación de suelos a través del

secuestramiento del carbono produce pérdida
de productividad del suelo
IPEN, 2015
CSSI
El uso de la tierra está definido por la comunidad de la
vegetación que crece en la tierra.
Todas las plantas producen un rango de biomarcadores

orgánicos (ácidos grasos)
El rango de éstos son descargados de las raíces de las plantas:
- solubles en agua – se mueven a través del suelo

- altamente polares – se enlazan fuertemente a las
partículas del suelo.
IPEN, 2015
CSSI discrimina entre uso de suelos, incluyendo pastizales para

el pastoreo de animales: reses, ciervo, lechería
IPEN, 2015
La técnica de CSSI tiene 3 etapas básicas:
1.Planificación
2.Muestreo y análisis
3.Interpretacíón
IPEN, 2015
Planificación
Depende de:
- Qué se requiere estudiar
- Sedimento que ingresa al estuario puede dañar la
biodiversidad natural del medio.
Preguntas:
- Origen del sedimento
- De donde viene la captación?
IPEN, 2015
Alta turbidez del estuario interno está en contraste con
Las aguas claras del estuario externo
IPEN, 2015
Muestreo
IPEN, 2015
Se han desarrollado protocolos para

- Cómo deben tomarse las muestras,
- Dónde,
- Cuántas
Por ejemplo, confluencia de un río requiere tres muestras.
IPEN, 2015
• Mezclado, secado y extracción

• El tamizado asegura que la muestra final esté completamente
mezclada
IPEN, 2015
• Secado permite extracción eficiente de los ácidos grasos
IPEN, 2015
Acidos grasos son extraídos del suelo o sedimentos con

solventes
IPEN, 2015
• Analisis de los FAME (Fat Acids Methyl-Ester) emplean un

espectrómetro de masa por combustión por cromatografía de
gases
IPEN, 2015
Para algunos laboratorios, este análisis es uno de los que debe

ser considerado.
Por razones similares, otro análisis que puede ser considerado

es el de medición de huellas de carbono total isotópico en un
flujo continuo, es decir el IRMS
IPEN, 2015
Interpretación y reporte
Las firmas isotópicas de los FAME y del carbono total son los
datos usados en los modelos de mezcla para inducir los
orígenes del suelo en el sitio de deposición de mezcla.
Hay dos modelos de mezcla útiles:
- IsoSource, desarrollado para inducir los estudios del entorno
alimentario
- SIAR, desarrollado a partir del IsoSource con parámetros
estadísticos.
Usando el mismo set de datos, ambos modelos dan los mismos

resultados.
IPEN, 2015
Interpretar los resultados del modelo de mezcla puede ser una

simple declaración de proporciones factibles dadas por el uso
de cada tierra.
Fuente % Contribución % de la captación
Bosque de Pino Exótico 50-54% 12%
Pastos 32-44% 72%
Bosque nativo 6-14% 16%
IPEN, 2015
O puede incluir una evaluación de la fuente para determinar la

causa de la excesiva erosión
El origen fue la pobre práctica

de gestión
IPEN, 2015
Los informes más útiles incluyen:

- La determinación de dónde el exceso de sedimento viene, a
partir del uso de la tierra.
- Las prácticas del uso de la tierra que causan el exceso de
erosión
- Sugerencias para la mitigación del exceso de erosión.
- Presentación de resultados en un resumen visual entendible.
IPEN, 2015
Zona caliente: Silvicultura contribuye 20 veces más con sedimento al

estuario
Causa: Pobres prácticas de gestión durante la cosecha
Mitigación: Detención del transporte de troncos a través del río para proveer
una zona buffer
IPEN, 2015

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“Estudio de la formación de suelos a

Los Isótopos Estables son uno de los “registradores”

Lo fundamental para entender cómo la técnica de CSSI

• Los isótopos estables son no radiactivos

Los isótopos estables usados en la técnica de CSSI están basados en el carbono

13 C es carbono elemental con 1 neutrón extra y es el “isótopo pesado”

Esto origina una mayor concentración de 13 C en el lado inicial y más 12 C en el otro

Este proceso se llama fraccionamiento.

La diferencia en las concentraciones de 12C y 13C debido al

Esta diferencia es medida por espectrometría de masas que da como

La notación Delta (δ) se inventó para ver el cambio en la concentración mas

δ13C = [ (Rmuestra / Rstandard ) – 1 ] x 1000 ‰ (llamada “por mil”)

donde R es la relación del isótopo pesado al liviano i.e., 13C/12C

• Los Isótopos estables usan la notación Delta o δ

δ13C = [ (Rmuestra / Rstandard ) – 1 ] x 1000 ‰ (llamada “por mil”)

Donde R es la relación molar de isótopo pesado al liviano de la muestra y el

Por convención de nomenclatura

Se nombra el valor δ del isótopo pesado.

Base de Isotopos Estables

• El fraccionamiento del 13C a través de 1 pared celular o “etapa biológica”

Concepto detrás de la técnica de CSSI

• Aparte de los minerales, el suelo contiene carbono en la materia orgánica a

• Las Plantas producen un rango de compuestos orgánicos

Celulosa Aminoácidos Ácidos Grasos DNA, RNA

Azúcares Ceras y resinas Glucósidos

Estos compuestos son producidos por diferentes partes de la planta:

• Cada ácido graso biomarcador tiene una secuencia de átomos de carbono

• La clave para discriminar entre suelos de tierras de diferente uso es que

• Estos cambios en el fraccionamiento isotópico del 13C en cada ácido

Carbono total Ácidos Grasos (CSSI)

Pastura -22.2 -27.0 -24.0 -21.6

Bosque Nativo -25.1 -28.9 -25.6 -27.8

Bosque de -26.2 -40.7 -32.4 -29.5

Bosque de -26.5 -32.7 -28.7 -28.2

Pastos marinos -8.0 -11.7 -10.9 -16.9

• La forma en que la planta usa el CO2 para la fotosíntesis

• Pequeñas diferencias dentro de las formas C3 y C4 en

• Los residuos animales pueden afectar los valores

Dieta de césped inglés ensilado d13C

Los isótopos estables pueden:

Visión del CSSI para identificar zonas calientes de

Las prácticas de uso de las tierras orientadas a:

Mientras estas práctiicas de uso de la tierra reducen el secuestramiento del

La degradación de suelos a través del

Todas las plantas producen un rango de biomarcadores

El rango de éstos son descargados de las raíces de las plantas:

- solubles en agua – se mueven a través del suelo

CSSI discrimina entre uso de suelos, incluyendo pastizales para

La técnica de CSSI tiene 3 etapas básicas:

Alta turbidez del estuario interno está en contraste con

Las aguas claras del estuario externo

Se han desarrollado protocolos para

• Mezclado, secado y extracción

• Secado permite extracción eficiente de los ácidos grasos

Acidos grasos son extraídos del suelo o sedimentos con

• Analisis de los FAME (Fat Acids Methyl-Ester) emplean un

Para algunos laboratorios, este análisis es uno de los que debe

Por razones similares, otro análisis que puede ser considerado

Usando el mismo set de datos, ambos modelos dan los mismos

Interpretar los resultados del modelo de mezcla puede ser una

Fuente % Contribución % de la captación

Bosque de Pino Exótico 50-54% 12%