“Año internacional de los Arrecifes de Coral”

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y

MATEMÁTICA
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
“PRÁCTICA DE LABORATORIO”
“Coloración compuesta: Observación de bacterias
procariontes y elementos formes de la sangre eucariontes”
 ÍNDICE

1.TÍTULO …………………

2. MARCO TEÓRICO …………………

2.1 INTRODUCCIÓN
2.2 OBJETIVOS
.
3. MATERIAL Y MÉTODOS ………………...

3.1. MATERIAL
3.1.2. MATERIAL BIOLÓGICO

3.2. MÉTODOS
3.2.1.DISEÑO EXPERIMENTAL (observación y
…..comparación)

4. RESULTADOS ………………….

5. CONCLUSIÓN Y DISCUSIÓN ………………….

6. CUESTIONARIO ………………….

7. FUENTES DE INFORMACIÓN …………………

8. ANEXOS ………………….

1.TÍTULO
 “COLORACIÓN COMPUESTA: OBSERVACIÓN DE
BACTERIAS PROCARIONTES Y ELEMENTOS
FORMES DE LA SANGRE EUCARIONTES”

2.MARCO TEÓRICO
2.1 INTRODUCCIÓN
Se puede encontrar millones de bacterias en distintos ambientes en la
Tierra. Uno inusual es en nuestra boca, precisamente en el sarro
dentario y cumpliendo roles diferentes positivos y negativos.
Debido a la naturaleza química de la célula bacteriana, su afinidad por
los colorantes, su propiedad ha sido aprovechada para estudiar los
diferentes tipos morfológicos y estructuras (cápsulas, esporas, flagelos)
que ayudan a la identificación de una especie o grupo en particular. Los
colorantes de mayor aplicación son: cristal violeta, violeta de genciana,
fucsina básica, safranina, azul de metileno y verde de malaquita. Actúan
mejor mediante la adición de mordientes, porque aumentan la
permeabilidad de la pared celular y membrana citoplasmática.

2.2.OBJETIVOS
- Observar a las bacterias que se encuentran en el sarro dentario a
través del microscopio con ayuda del tinte.
- Reconocer los componentes del tejido sanguíneo en el
microscopio.
3.MATERIAL Y MÉTODOS
3.1.MATERIAL
3.1.1.MATERIAL DE LABORATORIO
- Microscopio compuesto.
- Kits de colorantes para la coloración Gram.
- Colorante Wright o Leishman.
- Lámina porta-objeto.
- Lanceta hematológica.
- Mechero.
- Algodón.
- Algodón yodado.
- Papel lente.
- Agua destilada.
3.1.2 MATERIAL BIOLÓGICO
- Sarro dentario.
- Sangre.
3.2.MÉTODO
3.2.1.DISEÑO EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO N°1
❏ Hacer una extensión de la muestra en estudio
sobre una lámina portaobjetos.
❏ Fijar el preparado a la llama de un mechero.
❏ Cubrir con la solución cristal de violeta por un
minuto.
❏ Lavar con agua corriente.
❏ Cubrir la preparación con lugol durante un minuto.
❏ Lavar con alcohol hasta que éste no arrastre
colorante.
❏ Lavar con agua corriente.
❏ Agregar safranina por un minuto.
❏ Secar al ambiente o con un mechero.
 ❏ Colocar un gota de aceite de inmersión y observar
al microscopio con la lente de inmersión.

EXPERIMENTO N°2
❖ Limpiar con alcohol yodado el dedo anular del cual
se extraerá la sangre requerida para realizar el
experimento.
❖ Se procede a pinchar el dedo anular del alumno
con una lanceta hematológica para la extracción de
sangre.
❖ Extraer cuidadosamente la cantidad necesaria de
sangre para realizar el trabajo de práctica.
❖ Realizar el frotis en posición inclinada y de una sola
pasada.
❖ Secar o fijar la muestra con ayuda de un mechero o
al aire libre.
❖ Se le añade el Wright y se deja en reposo durante 2
minutos.
❖ Se le agrega agua destilada y se deja en reposo
nuevamente durante 10 minutos.
❖ Desechar el colorante y lavar con agua el exceso.
❖ Por último se lleva la muestra al microscopio para
su observación.
4.RESULTADOS
EXPERIMENTO N°1

Sarro dentario
 Observación

EXPERIMENTO N°2

Sangre
5.CONCLUSIÓN Y DISCUSIÓN
5.1.CONCLUSIÓN
★ En la observación del frotis de sangre a través del
microscopio pudimos apreciar glóbulos rojos
(hematíes o eritrocitos), leucocitos (de diferente
tipo), plaquetas e inclusive el plasma.
★ Los glóbulos rojos, al ser células sin núcleo, se
diferenciaba una estructura sencilla y de color
violáceo de un tamaño menor al de los glóbulos
blancos.
★ Los hematíes no se reproducen, debido a que es
imposible por la carencia de núcleo y que nacen del
proceso denominado eritropoyesis.
★ Entre los leucocitos solo se pudieron diferenciar
algunos como los monocitos linfocitos y neutrófilos
aunque en escasa cantidad.
5.2.DISCUSIÓN

6.CUESTIONARIO
PROCARIONTES
➢ ¿Que es una célula procarionte de ejemplos?
Es un organismo unicelular sin núcleo cuyo material
genético se encuentra disperso en el citoplasma.
ejm:
SEGÚN SU MORFOLOGÍA
➔COCO:Tiene una forma esférica

➔BACILO:Tiene forma de bastón

➔VIBRIO

➔FLAGELADAS:Tiene forma helicoidal o de

espiral
➢ ¿Por qué se dice coloración compuesta?
Por que esta tinción requiere de más de un tipo de
colorante; primero un colorante primario, el cual se
utiliza para teñir a todas las células de tinción;
después se procede a la decoloración, el cual
remueve el colorante solo de ciertos tipos de
células y finalmente un colorante de contraste; este
tiñe las células que se decoloraron.

➢ ¿Con qué lente se observan las bacterias y por

que?
Con un lente de 40x ya se distinguen bacilos,cocos
y espirilos. Porque comúnmente tienden a medir 1-
2 um de diámetro. Si se utiliza el lente de 100x
debe usarse el aceite de inmersión.
 clostridium tetani a
40 x
➢ ¿Cual es la diferencia entre Gram(+) y Gram(-)?
GRAM (+)
❖ Membrana citoplasmática
❖ Capa gruesa de peptidoglicano
❖ Ácidos teicoicos y lipoteicoicos, que
sirven como agentes quelantes
❖ Polisacáridos de la cápsula
❖ Los flagelos contiene 2 anillos como
soporte
EUCARIONTES
bacteria a 100 x
GRAM (-)
❖ Membrana citoplasmática
❖ Capa delgada de peptidoglicano
❖ Entre la membrana interna y
externa se localiza un espacio
periplásmico, relleno de una
sustancia llamada periplasma la
cual contiene enzimas importantes
para su nutrición
❖ Menciones los componentes del plasma y sus
respectivos porcentajes e indique la función
que cumple c/u de ellas.
El plasma es la fracción líquida y acelular de la
sangre.

COMPONENTES
❏ AGUA 90%
❏ PROTEÍNAS 7%

Función Oncótica Mantener el volumen

plasmático
Función Tampón Estabilidad del pH
sanguíneo
Función Reológica Viscosidad de la
sangre
Función Equilibrio
Electroquímica electroquímica de
concentración de
iones
 ❏ grasa,glucosa,vitaminas,hormonas,oxígeno,dió
xido de carbono y nitrógeno 3%
❖ Establezca la diferencia que existe entre plasma
y suero.

PLASMA SUERO SANGUÍNEO O

El plasma es salado, arenoso y de
color amarillento traslúcido.
Mantiene diferentes sustancias en
solución productos del metabolismo
celular.
HEMÁTICO
Es el componente de la sangre
resultante tras permitir la
coagulación de ésta y eliminar el
coágulo importante. Este ya no
contiene las proteínas de
coagulación (fibrinógeno).

❖ Explique que sucede cuando hay aumento y

disminución de hematíes y diga que es una
anemia.

POLICITEMIA
Es un trastorno en el cual aumenta
el hematocrito osea la proporción de
glóbulos rojos por volumen
sanguíneo.
ANEMIA
Cantidad disminuida de glóbulos
rojos. La anemia no es una
enfermedad, sino un signo clínico y
la deficiencia de hierro es la causa
principal.
 SÍNTOMAS SÍNTOMAS
➔ Dolores de cabeza y vértigos ➔ Cansancio y Mareos
➔ Forma anormal del brazo y/o ➔ Disnea (debilidad)
del hígado ➔ Palidez de las mucosas
➔ Hipertensión ➔ Taquicardia
➔ Irritabilidad, desinterés,
tristeza y abatimiento

❖ Hemoglobina: describa la función

Es una proteína de la sangre, que transporta el
oxígeno, desde los órganos respiratorios hasta los
tejidos; el dióxido de carbono, desde los tejidos
hasta los pulmones que lo eliminan y también
participa en la regulación de pH de la sangre, en
vertebrados y algunos invertebrados.
7.FUENTES DE INFORMACIÓN
● https://jugandoconpipetas.wordpress.com/2016/12/
03/preparacion-de-un-frotis-sarro-dental/
● http://labmicrofarmaciaulat.blogspot.com/p/observa
cion-de-bacterias.html
● https://laboratoriodemicrobiologia.weebly.com/tincio
acuten-de-gram--tincioacuten-diferencial.html

8.ANEXOS

gram positiva y negativa

100x
 glóbulos rojos

linfocitos y plaquetas

Se observa bacterias del sarro dentario (cocos)