Professional Documents
Culture Documents
El Microscopio
Aplicaciones de la microscopia en la histología y la
biología celular
Introducción
La totalidad del conocimiento actual referido a la estructura y la función de los
organismos biológicos tiene su fundamente en los métodos necesarios para la
investigación de las células y los tejidos, En algunos casos, los grandes avances
en las comprensión y el conocimiento fueron consecuencia directa del desarrollo
de una nueva técnica, La creación de la microscopia electrónica, los métodos de
fraccionamiento celular, la inmunohistoquímica y la tecnología de DNA son
ejemplos claros. Es necesario contar con ciertos conocimientos respecto de los
principios fundamentales de los métodos aplicados con mayor frecuencia, para
que el estudio de la histología no sea tan solo un aprendizaje de determinados
hechos sino que además permita adoptar una postura crítica frente a ellos. En
consecuencia, se comenzara el estudio de la histología con un breve análisis de
las generalidades de los métodos histológicos, si bien a menudo será de gran
utilidad revisar alguno de estos métodos relacionados con el estudio especifico de
las células y los tejidos. En general, los métodos histológicos se clasifican en dos
grupos: los que se basan en la observación directa de células y tejidos vivos, y los
que analizan material muerto o inanimado. En un lugar intermedio se ubican las
técnicas de aislamiento de los componentes de células vivas mediante métodos
de centrifugación. En todos los casos se comienza con el análisis microscópico, de
importancia fundamental para todos los métodos histológicos.
Material y métodos
Se asistió al Hospital General de Zona No. 71 del IMSS, localizado en la ciudad de
Veracruz, Ver; para observar los pasos de cómo se desarrolla la prueba de tejidos
y el resultado final visto en un microscopio óptico.
Resultados
Se obtuvo como resultado poder apreciar las partes de los componentes celulares
a través del microscopio óptico y las partes que constituyen estas y el propio
microscopio.
Desarrollo
EL microscopio es el instrumento mas importante en la hitologiam debido al
pequeño tamaño de las estructuras analizadas. Cuando la luz atraviesa un
material biológico, cambian sus características, y estas modificaciones se hacen
visibles mediante los sistemas de lentes. EL ojo puede diferenciar variaciones de
intensidad de la luz y de color. En consecuencia, es necesario modificar la luz,
para que el preparado se observe como formado por elementos mas oscuros y
más claros o de distintos colores.
Microscopio óptico
Está compuesto por partes mecánicas y ópticas. Los componentes ópticos
constan de tres sistemas de lentes: condensador, objetivo y ocular. El
condensador produce un haz de luz que ilumina el objeto estudiado. El objetivo
aumenta el objeto y proyecta la imagen sobre el ocular. El ocular aumenta aun
mas la imagen y la proyecta sobre la retina del ojo del observador. El aumento
total se determina mediante el producto del aumento del objetivo por el aumento
del ocular. El poder de resolución depende de la longitud de onda de la luz
utilizada y de las aperturas numéricas del objetivo y el condensador. EL máximo
poder de resolución que se puede obtener es de 0,2 um, pero con los preparados
rara vez excede de 0,5 um. Para obtener el máximo poder de resolución, de
alrededor de 0,2 um, e requiere un aumento de unas 1,000-1,400 veces. Sobre la
base del microscopio óptico común se han desarrollado varios microscopios
especiales, cada uno de los cuales presenta ventajas y limitaciones.
Se utiliza para analizar partículas pequeñas, que presentan muy escaso contraste
con la microscopia óptica o que se encuentran en el limite del poder de resolución
o por debajo de este. Se emplea un condensador especial, el cual impide que
llegue luz directa al objetivo, de manera que solo incide en este lente la luz
desviada o esparcida por las pequeñas partículas que se desea investigar. Se
observan luminosas sobre un fondo oscuro. En la histología se utiliza a menudo el
campo oscuro para el análisis de preparadoras radioautográficas.
Los tejidos no coloreados producen muy escaso contraste dado que no absorben
cantidades importantes de luz. Sin embargo producen cierto retardo en las
longitudes de onda, de acuerdo con la “densidad óptica” variable de tejidos, es
decir, los distintos índices d refracción. Mediante el microscopio de contraste de
fase es posible transformar estas diferencias de fase no visibles , en diferencias de
amplitud es decir, que las diferencias d refracción entre los componentes del tejido
se transforman en diferencias de intensidad que pueden ser captadas por el ojo
humano. Es posible transformar en visibles componentes de las células vivas.
Microscopio de interferencia
Microscopio de fluorescencia
Con el empleo de luz ultravioleta con longitud de onda de alrededor de 250 nm,
casi la mitad de la luz visible que se utiliza habitualmente en el microscopio óptico,
en principio es posible duplicar el poder de resolución. El microscopio de luz
ultravioleta, permite el paso de la luz, que es invisible.
Microscopio electrónico
Bibliografía
Geneser, F. (1999) Histología. 3° ed. Estados Unidos. Editorial Médica
Panamericana.
Blakiston Divison. (1968). Histology. 2° ed. New York: McGraw Hill Book
Company.
Ham, A.(1975).Tratado de Histología. 7° ed. Editorial Interamericana.
Leeson,R.,Leeson,T.,Paparo,A.(1987).Histología. 5° ed. México, DF.
Editorial interamericana.
Junqueira,L. Caneiro,J. (1982). Histologia Basica. 2° ed. Salvat editores.
Ross. Romrell. Kage. (1998). Histologia. 3°ed. Editorial medica
Panamericana.
Welsch,U. (2009). Histologia. 2° ed. Editorial medica Panamericana.
Fortoul Teresa, Castell Andrés 1° ed. (2010) Mexico, D.F. Editorial McGraw-
Hill Interamericana
Gama, A.(2007) Biología I.3° ed. México. Editorial Pearson Education.
Copenhaver, W.M. Tratado de histología 17ª edición. Mexico, D.F.(1981),
Editorial Interamericana