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TOOS
Método Muestras
Test enzimático fotométrico con TOOS (N-etilo-N-(hidroxi- Suero, plasma (heparina o EDTA), orina.
3-sulfopropilo)-m-toluidina). Estabilidad en suero / plasma:
6 meses a -20 °C
Principio
7 días a 4 – 8 °C
El ácido úrico oxida la uricasa en alantoína. El peróxido de 3 días a 20 – 25 °C
hidrógeno que se forma en este proceso reacciona con Estabilidad en orina:
4-aminoantipirina y N-etilo-N-(hidroxi-3-sulfopropilo)-m- 4 días a 20 – 25 °C
toluidina (TOOS) y se convierte en un colorante azul
Diluir la orina con agua destilada en una proporción 1+10 y
violáceo. La ascorbato oxidasa impide interferencias
multiplicar el resultado por 11.
ocasionadas por ácido ascorbínico.
Desechar las muestras contaminadas!
ácido úrico + H2O + O2 uricasa> alantoína + CO2 + H2O2 Esquema de la prueba
POD> Hay disponibles, a petición, aplicaciones para
TOOS + 4-aminoantipirina + 2 H2O2 indamina + 3 H2O
sistemas automáticos.
Reactivos Longitud de onda 550 nm, Hg 546 nm
Grosor de la capa 1 cm
Componentes y concentraciones Temperatura 20 - 25 °C / 37 °C
NOTA: Las concentraciones indicadas se corresponden con Método de medida Comparar con el valor de
las concentraciones de la mezcla de prueba. referencia del reactivo (VRR).
R1: Tampon de fosfato pH 7,0 100 mmol/l Procedimiento del substrato
TOOS 1 mmol/l
VRR Muestra o
Ascorbato oxidasa ≥ 1 kU/l
estándar
R2: Tampon de fosfato pH 7,0 100 mmol/l
Muestra o estándar - 20 µl
4-aminoantipirina 0,3 mmol/l
Reactivo 1 1000 µl 1000 µl
K4[Fe(CN)6] 10 µmol/l
Mezclar, incubar 5 min. y a continuación añadir:
Peroxidasa (POD) ≥ 1 kU/l
Reactivo 2 250 µl 250 µl
Uricasa ≥ 50 U/l
Mezclar, incubar 5 min. a 37 °C o 10 min. a 20 – 25 °C.
Estándar: 6 mg/dl (357 µmol/l) Interpretar la extinción al cabo de 60 min. comparando
con el valor de referencia del reactivo.
Bibliografía
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1a ed.,
Francfort: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. pp.
208-14.
2. Newman DJ, Price CP. Renal function and nitrogen
metabolites. En: Burtis CA, Ashwood ER, editores.
Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3a ed., Filadelfia:
W.B Saunders Company; 1999. pp. 1204-70.
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