Control de calidad de hoja de boldo Definicin: La hoja de boldo consiste en la hoja desecada, entera o fragmentada, de Peumus Boldus Molina.

La droga entera contiene no menos de 20.0 ml/kg y no ms de 40.0 ml/kg, y la droga fragmentada no menos de 15.0 ml/kg de aceite esencial. Contiene no menos del 0.1 por ciento de alcaloides totales, expresado como boldina (C19H21NO4; Mf 327.4), calculado respecto a la droga anhidra. Caractersticas: La hoja de boldo tiene olor aromtico, especialmente cuando se frota. Presenta las caractersticas macroscpicas y microscpicas decretas en los ensayos de identificacin A y B. Identificacin: A. La hoja oval o elptica, generalmente de 5 cm de largo, con un corto pecolo, un pice obtuso o ligeramente emarginado o mucronado y una base simtrica y redondeada; el borde es entero y ligeramente ondulado y los extremos engrosados estn ms o menos vueltos. El limbo es verde-grisceo, grueso, duro y quebradizo. La cara inferior es finamente pubescente, presenta protuberancias menos marcadas y una nervadura pinnada y prominente. B. Reducir a polvo (355). El polvo es verde-grisceo. Examinar al microscopio, utilizando disolucin de hidrato de cloral R. El polvo muestra fragmentos de la epidermis superior y de la subsiguiente hipodermis, con paredes engrosadas y onduladas, rectas o ligeramente sinuosas; fragmentos de la epidermis inferior con numerosos estomas rodeados por cuatro a siete clulas auxiliares; pelos tectores unicelulares, solidarios, bifurcados o agrupados en forma de estrella, de paredes lignificadas y mas o menos engrosadas; restos del mes filo lagunar, incluyendo un elevado numero de grandes clulas redondeadas con aceite y parnquima que presenta finos cristales aciculares; fibras de pared engrosada y clulas parenquimatosas lignificadas y punteadas asociadas a tejido vascular procedente de la nervadura. C. Examinar por cromatografa en capa fina (2.2.27), utilizando una placa de gel de slice para CCFR. Disolucin problema. Aadir a 0.5 g de droga pulverizada (355) una mezcla de 1 ml de acido clorhdrico diluido R y 20 ml de agua R y calentar en un bao de agua a reflujo durante 10 min. Enfriar y filtrar. Aadir al filtrado 2 ml de amoniaco diluido R1 y extraer dos veces con 20 ml de ter R cada vez, evitando que forme emulsin. Reunir las capas orgnicas y evaporar el disolvente en un bao de agua. Disolver el residuo en 1.0 ml de metanol R. Disolucin de referencia. Disolver 2 mg de boldina R en 5 ml de metanol R. Aplicar a la placa, en bandas, 20 ul de la disolucin problema y 10 ul de la disolucin de referencia. Desarrollar hasta una distancias de 15 cm, utilizando

una mezcla de 10 volmenes de metanol R , 10 volmenes de dietilamina R y 80 volumenes de tolueno R.. Dejar secar la placa al aire. Pulverizar la placa con disolucin de iodobismutato de potasio R2. Dejar secar la placa al aire durante 5 min y despus pulverizarla con disolucin de nitrito de sodio R. Examinar la placa a la luz del da. Los cromato gramas muestran en el tercio inferior la mancha de color pardo a pardo-rojizo de la boldina. El cromato grama obtenido con la disolucin problema muestra varias manchas parduscas por encima y por debajo de la mancha correspondiente a la boldina. Ensayos Elementos extraos (2.8.2). No ms del 4 por ciento de ramitas y del 2 por ciento de otros elementos extraos. Agua (2.2.13). No mas de 100 ml/kg, determinado por destilacin, de 20.0 g de la droga pulverizada (355). Cenizas totales (2.4.16). No ms del 13.0 por ciento. Valoracin Aceite esencial. Realizar la determinacin de aceites esenciales en drogas vegetales (2.8.12). Utilizar 10.0 g de droga recin triturada, un matraz de 1000 ml y 300 ml de agua R como liquido de destilacin. Destilar a una velocidad de 2 ml/min a 3 ml/min durante 3 h. Alcaloides. Examinar por cromatografa de lquidos (2.2.29). Disolucin problema. A 1.000 g (m1) de la droga pulverizada (355), aadir 50 ml de acido clorhdrico diluido R. Agitar en un bao de agua a 80 C durante 30 min. Filtrar y repetir la operacin una vez sobre el residuo obtenido. Filtrar. Reunir los filtrados ya fros y agitar con 100 ml de una mezcla de volmenes iguales de acetato de etilo R y hexano R. Alcalinizar la fase acuosa con amoniaco diluido R1 hasta alcanzar pH 9.5. Agitar, sucesivamente, con 100 ml, 50 ml y 50 ml de cloruro de metileno R y reunir las capas superiores y evaporar a sequedad, a presin reducida. En un matraz aforado de 10.0 ml diluir el residuo hasta 10.0 ml con la fase movil. Disolucin de referencia. En un matraz aforado de 100.0 ml, disolver 12 mg (m2) de boldina R en 100 ml de la fase mvil. Diluir 1.0 ml de esta disolucin hasta 10.0 ml con la fase mvil. La cromatografa se puede llevar a cabo utilizando: Una columna de acero inoxidable de 0.25 m de longitud y 4.6 mm de dimetro interno, rellena de gel de slice octadecilsililada para cromatografa R (5um) Como fase mvil, a un caudal de 1.5 ml/min, una mezcla de 16 volmenes de la disolucin A y 84 volmenes de la disolucin B.

Disolucin A. Mezclar 99.8 ml de acetonitrilo R y 0.2 ml de dietilamina R. Disolucin B. Mezclar 99.8 ml de agua R y 0.2 ml de dietilamina R, ajustando a pH 3, utilizando acido formico R. Como detector, un espectrofotmetro ajustado a 304 nm. Inyectar 20 ul de cada disolucin. Cuando los cromatogramas se registran en las condiciones descritas, los tiempos de retencin con respecto a la boldina son: isoboldina, unos 0.9 min; N-oxido de isocoridina, unos 1.8 min; laurotetanina, unos 2.2 min; isocoridina, unos 2.8 min, y N-metillaurotetanina, unos 3.2 min. Pueden aparecer otros picos adicionales. Calcular el contenido, en tanto por ciento, de alcaloides totales expresado como boldina a partir de la expresin: A1 x m 2 A2 x m1 m1 masa de la sustancia a examinar en gramos m2 masa de boldina R en gramos A1 suma de las areas de los picos debidos a los 6 alcaloides identificados en el cromatograma obtenido con la disolucin problema. A2 rea del pico debido a boldina en el cromatograma obtenido con la disolucin de referencia. Conservacin Protegida de la luz.