10/09/2011

Amostras utilizadas em Imunoensaios

Profa. Alessandra Pardini Disciplina: Imunologia Clnica

INTRODUO - A validao dos imunoensaios feita com base nos parmetros de sensibilidade, especificidade, repetitividade, reprodutibilidade e estabilidade

- Problemas no imunoensaio = nova amostra = problema desaparece

- Os imunoensaios so objeto de padronizao e normatizao - Controle de Qualidade pr analtico

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PREPARO E INSTRUES AO PACIENTE

FATORES

INERENTES AO PACIENTE:

Idade Sexo Etnia Gravidez Perodo Uso

de Ciclo Menstrual medicamentos (anticoncepcional,

de

vitaminas, etc)

JEJUM
No tem

muita importncia para Imunoensaios.

No entanto, concentrao excessiva de lipdios pode interferir em

teste de imunoprecipitao e aglutinao.

Evitar coletar amostras at 2h aps refeio (almoo, janta) ps-

prandial.

Recomendvel jejum padro de 8h se for realizar tambm outros

exames.
Jejum Beber

de 4h, se somente for realizar exames de imunoensaios. gua no invalida o jejum.

Evitar

lcool, fumo (afeta os hormnios)

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GRAVIDEZ

Geralmente

ocorre resultados

falso-positivos devido mudanas hormonais e proticos como aumento de hCG, lactognio, cortisol e hormnios tireoidianos.

Perguntar a data da ltima menstruao e a semana

gestacional, principalmente na determinao de hormnios.

EXERCCIO

Exerccios com perda de gua e suor

alteram a concentrao de parmetros

bioqumicos e hormnios.

Fazer

30

minutos

de

repouso

no

laboratrio antes da coleta.

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IDADE

Importante na determinao de hormnios, protenas e

substncias do metabolismo bioqumico.

CICLO MENSTRUAL E RITMO CIRCADIANO

Deve conter no laudo o dia do ciclo

menstrual.

Cortisol o parmetro mais afetado ao

longo do dia. Preconiza-se coletar entre 7:00 e

9:00h da manh.

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Laboratrio de Anlises Clnicas Finalidades: Verificar estgios da condio biolgica humana Verificar ausncia de patologias, como parte de algoritmos mdicos ex.: Diabetes Mellitus (adulto) Estabelecer diagnsticos Fornecer informaes para diagnstico e acompanhamento de patologias agudas e crnicas

COLETA DE SANGUE

O tipo de amostra para cada analito definido por protocolos

internacionais.
Evitar

hemoconcetrao: no deixar o torniquete por mais de

1minuto.
Evitar

hemlise: ruptura de hemcias.

Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato,

heparina, EDTA e inibidor de glicose).

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AMOSTRAS
COLETA - o primeiro passo para TODAS as anlises efetuadas no Laboratrio Clnico -Todas as etapas seguintes dependem da coleta do material - importante que o procedimento apropriado (indicado) seja seguido = para obteno de resultados exatos - Utilizar material completamente limpo para evitar falsos resultados

OBTENO DE SORO OU PLASMA

necessrio certo tempo para formao do cogulo e

retrao ideal.
No

aconselhvel refrigerar a amostra. centrifugao, obtm o soro ou plasma.

Aps

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OUTROS ESPCIMES BIOLGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS

URINA
Determinao

hormonal ou de drogas

Lquido Cefalorraquidiano (LCR)

Pesquisa Pesquisa

de antgenos bacterianos, virais e parasitrios de Ac

LQUIDO AMNITICO Amniocentese procedimento para obteno de lquido aps 16. Semana de gestao.
No

deve conter sangue. Pesquisar presena de patgenos.

OUTROS ESPCIMES BIOLGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS

FEZES
Pesquisar

a presena de antgenos

SALIVA
Determinao de hormnios livres: cortisol, progesterona, estradiol e testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam.

SMEN
Pesquisa Manter Aps

de anticorpos antiespermatozides.

3 dias de abstinncia sexual.

ejaculao aguardar 30 min, e usar o material em at 2h

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Agradecimento: Profa. Adriana Di Brito, pelo material gentilmente cedido Bibliografia: VAZ et al., Imunoensaios Fundamentos e Aplicaes, Guanabara Koogan, 2007. Internet: Pesquisa na internet agosto de 2011 Cruz, CF, LACEN/PR