OBJETIVO:

Extraer el DNA de un tejido animal; as como confirmar su estructura fibrilar y el repliegue del ncleo.

INTRODUCCIN.

El DNA est formado por un polmero de nucletidos. Cada nucletido contiene una base nitrogenada que consiste en una purina (adenina o guanina) o una pirimidina (citosina o timina). Las bases se unen mediante enlaces covalentes a la desoxirribosa (azcar de 5 carbonos). La cadena polimrica est unida mediante grupos fosfato, que unen al carbono 5 de la desoxirribosa de un nucletido con el carbono 3 de la desoxirribosa del

nucletido adyacente. Cada molcula de DNA est compuesta por dos cadenas de polinucletidos, que forman una estructura de doble hlice. Las dos cadenas se extienden en direccin opuesta, de manera que en cada extremo de la molcula del DNA, una cadena expone un carbono 5 desoxirribosa y la otra cadena expone un carbono 3 desoxirribosa. Por lo tanto, las cadenas son anti paralelas entre s.

MARCO TEORICO

La existencia de material gentico capaz de replicacin, almacenaje, expresin y mutacin se deduce de los patrones de herencia observados en los organismos. Tanto las protenas como los cidos nuclicos se consideraron, inicialmente, candidatos posibles para el material gentico. Las protenas son ms diversa que los cidos nuclicos, un requerimiento del material gentico, y se vieron favorecidas debido a los avances en la qumica de protenas que se hicieron esa poca. . Inicialmente, solo evidencias circunstanciales apoyaban la idea de que el DNA controlaba la herencia en eucariotas. stas incluan la distribucin del DNA en la clula, anlisis cuantitativos de DNA, y estudios de mutagnesis inducida por UV. Las recientes tcnicas de DNA recombinante, as como experimentos con ratones transgnicos, han

proporcionado pruebas experimentales directas de que el DNA es el material gentico en eucariotas.

El establecimiento del DNA. Como material gentico prepar el terreno para la expansin de la investigacin en gentica molecular, y ha servido de piedra angular para importantes investigaciones durante medio siglo.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO

Un hgado de pollo Una varilla de vidrio Un mortero Vasos de precipitado de 250 ml Pipeta graduada de 10 ml Probeta de 50 ml Alcohol 96 Cloruro de Sdico al 2 M SDS Jabn lquido Arena de mar perlas de vidrio Trozo de gasa Microscopio Colorantes bsicos Portaobjetos Cubre objetos

METODOLOGA

Triturar medio hgado de pollo en un mortero. Aadir arena o las perlas de vidrio, para que al triturar se puedan romper las membranas y queden los ncleos sueltos. Aadir al triturado, 50 ml de agua corriente. Remover hasta hacer una especie de papilla o pur. Filtrar varias veces sobre una gasa, para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper. Medir el volumen del filtrado con la probeta. Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro sdico al 2 M (esto para seguir produciendo el estallido de los ncleos para que queden libres las fibras de cromatina.

A continuacin, se aade 1 ml de SDS jabn lquido (se recomienda DAWN) (la accin de este detergente es formar un complejo con las protenas y separar las del DNA. As quedar libre de las protenas que tiene asociadas.

Aadir mediante una pipeta 50 ml de alcohol del 96. (hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.

Introducir una varilla de vidrio e ir moviendo en la misma direccin.

NOTA: esta prctica puede complementarse con una tincin especfica de ADN. Se debe tomar una muestra de las fibras que se van depositando sobre la varilla de vidrio y depositarlas sobre un portaobjetos y cubrirlas con un cubreobjetos. Teir durante unos minutos con un colorante bsico Observar al microscopio

RESULTADOS DE LA OBSERVACIN AL MICROSCOPIO

Los cuales se obtuvieron sobre la varilla en la cual se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupacin de muchas fibras de ADN.

CUESTIONARIO

1. Cmo defines al DNA? El ADN posee diversas propiedades y funciones de las cuales destaca: El control de la actividad celular. Lleva la informacin gentica de la clula la que determina las caractersticas de sta y que puedan ser transmitidas en el proceso de divisin celular. Puede duplicarse en la divisin celular, formando clulas idnticas a la original. Tiene la capacidad de mutacin (alteracin en la informacin gentica) entendido por un proceso evolutivo. La secuencia de las bases nitrogenadas del ADN cumplen un papel fundamental en lo que se llama la sntesis de protenas. La secuencia de nucletidos es transmitida a un ARN mensajero (ARNm) en forma de codones (tripletes que contienen el cdigo gentico). El ARNm acta sobre las molculas del ARN de transferencia (ARNt) que contiene a los anticodones (tripletes complementarios), copiando el material gentico. A cada anticodn le corresponde un aminocido (unidad bsica de la protena), de esta manera la clula sabr cmo ordenar la secuencia de aminocido para formar la protena que le sea til. En consecuencia, la secuencia de las bases nitrogenadas es una receta que la clula debe seguir para formar la protena necesaria.

2. Menciona el fundamento del uso del alcohol en esta prctica y el por qu de la concentracin del mismo.

Para separar el material gentico, lo cual es lo que obtuvimos para observar en el microscopio.

3. Qu otros compuestos estaras esperando encontrar dentro de la muestra a parte del DNA?

La molcula de ADN que est formada por dos cadenas formada por compuestos qumicos llamados nucletidos. Podemos encontrar cuatro tipos de nucletidos diferenciados por sus bases nitrogenadas; adenina, timina, citosina y guanina. Las cadenas forman una especie de cadena retorcida, lo que permite que el ADN se pueda desenrollar y hacer una lectura de ste. Cada nucletido posee una afinidad qumica con aquel que se encuentra en paralelo en la otra cadena; adenina tiene afinidad con la timina, y la citosina con la guanina. Esta afinidad qumica se ve empricamente con la unin de un enlace de hidrgeno. Los nucletidos estn formados por un cido fosfrico, una desoxirribosa y una base nitrogenada.

CONCLUSIONES

REFERENCIAS

1.- GARDNER E. (1985) Principios De Gentica. Limusa. Mxico

2.- BARAHONA A. Y DANIEL PIERO (1994). Gentica: Continuidad De La Vida. SEP-CONACYT-FCE. Mxico (La Ciencia Desde Mxico).

3.- SMITH-KEARY (1979). Gentica. Estructura Y Funcin.Publicaciones Cultural.Mxico 4. Ville C.A., Solomon E. , Davis P.W. 1987 El Fascinante Mundo De La Biologa. Vol. 3. Primera Edicin, Ed. Nueva Editorial Interamericana S.A. De C.V. Mxico, D.F. Pg. 252-260. 472-475

UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE TECMAC DIVISIN DE BIOTECNOLOGA MATERIA: BIOLOGA GRUPO: 3QBT3

PRACTICA 6 : EXTRACCIN DE DNA

EQUIPO: 6 INTEGRANTES: Peralta Rodrguez Maribel Vzquez Vega Tania lvarez Garca Miguel ngel Vargas Morales Ivan Lona Xicotencatl Gerardo Tlaloc Nayeli Natali Rosas