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Spectromtriedemasse
CHM3522
Spectromtriedemasse
Introduc<on
M
ionisa<on
+
M+ m n+
M+
m+
n+
spara<on
M+
m+ n+
+
M+ m+ n
1. uncomposestionis
2. lesionssontsparsselonleurrapportmasse/charge(m/z)
3. lenombredionsdechaqueunitmasse/chargeest
enregistrsouslaformedunspectre
techniquedionisa<on
CHM3522
techniquedespara<ondesions
Spectromtriedemasse
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Unexempledespectredemasse:
CHM3522
Spectromtriedemasse
Schmagnraldunspectromtredemasse:
quellessontlestechniquesdionisa<on?
quellessontlestechniquesdespara<ondesions?
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Lestechniquesdionisa<on
(A)Techniquesdionisa2onenphasegazeuse
ionisa<onparimpactlectronique
ionisa<onchimique
(B)Techniquesdionisa2onpardsorp2on
ionisa<onpardsorp<ondechamp
ionisa<onparbombardementdatomesrapides
dsorp<onionisa<onparplasma
dsorp<onionisa<onlaser
(C)Techniquesdionisa2onparvapora2on
spectromtriedemassethermospray
spectromtriedemasseparlectrospray
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Spectromtriedemasse
(A)Techniquesdionisa<onenphasegazeuse
lestechniquesdegnra<ondionsenphase
gazeusesontlesplusanciennesetlesplus
populaires
ellessontapplicabledescompossayantune
tensiondevapeurdaumoins106Torrune
tempraturelaquellelecomposeststable
unegrandenombredecompossorganiques
nonioniquesdeM<1000Da
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Ionisa<onparimpactlectronique(IE)
e
e
M
ionisa<on
M+
M+
desmolcules,enphasevapeur,delchan<llon,sont
bombardespardeslectronstrsnerg<ques(e.g.,70eV)
celaproduiseunradicalca<onnommionmolculaire
1eV=96,485kJmol1=23,0605kcalmol1
70eV=6,75x103kJmol1
Lnergiedionisa<ondescompossorganiquesestgnralement
infrieur15eV,alorsilreste55eVpourbriserdesliaisons
covalentesdelamolcule(nergiedecesliaisons:310eV)
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Spectromtriedemasse
Ionisa<onchimique(IC)
unemthodedionisa<onplusdouce
ungazrac<f(lemthane,lisobutane,lammoniac,etc.)est
introduitdanslasourceetionis
lemolculesdelchan<llonentrentencollisionavecles
molculesionisesdugazrac<f
uneionisa<onsecondaireproduiseunion[M+1]+ou[M+15]+
etc.
lnergietransfrelchan<llonestgnralement<5eV
lecontenunerg<quedesionssecondairesdcrotdans
lordresuivant:CH3+>tC4H9+>NH4+
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Ionisa<onchimique(IC)
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SpectresIEetICdela
3,4dimthoxyactophnone
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Quelquescommentaires
ilyaplusdefragmenta<onaveclamthodeIE
ilyadespicsreprsentantlapertedeCH3(15Da),CO(28Da),
etc.
lespectreICnousdonnepresqueexclusivementlionquasi
molculaire[M+1]+
ilnyapasdepicsdefragmenta<on
onobservedespicsrsultantdesaddi<onslectrophilesdes
ionsdugazrac<faveclionmolculaire
CH3++CH4C2H5++H2
CH4+C2H5+C3H5++2H2
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(B)Techniquesdionisa<onpardsorp<on
lesmolculestudierpassentdirectementdune
phasecondenselaphasevapeursousforme
dions
u<lisespourdescomposslourds,nonvola<ls,ou
ioniques
fourninormalementseulementlamassemolculaire
(pasdefragmenta<on)
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Ionisa<onpardsorp<ondechamp(FD)
lchan<llonestplacsurunmemeurmtalliquedisposant
demicroaiguillesdecarbone(anode)
lesgradientsdhautetensionarrachentunlectron
lchan<llon,etleca<onformestexpulsdelmemeur
lesionsgnrsontgnralementpeudnergie
excdentaire,alorsonobserveseulementlionmolculaire
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Comparison:IE,IC,etFD
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Ionisa<onparbombardementdatomesrapides(FAB)
lchan<llonestdissousdansunematrice(solvant)qui
protgelchan<llondesdommagesexcessifsdusaux
radia<ons
lchan<llonetlamatricesontbombardspardesatomes
dexnonoudargondhautenergie(610eV)
onobservelion[M+1]+et/ou[M1]+
u<lepourdesgrossesmolculesavecunefaibletensionde
vapeur(e.g.,polysaccharides,pep<desde1020kDa)
lafragmenta<onahabituellementlieuauniveaudes
liaisonsglycosidiquesetpep<diques>squenage
inconvnient:lesionsprovenantdelamatriceellemme
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Dsorp<onionisa<onlaser
unfaisceaulaserpulsest
u<lispourlionisa<onde
lchan<llon,normalement
dansunematrice
dansunematrice:Matrix
AssistedLaserDesorp<on
Ioniza<on,MALDI
massesjusqu3kDa
peudefragmenta<on
interfrencesdelamatrice
adduitsformsaveclamatrice;dicileiden<eruncompos
inconnu
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(C)Techniquesdionisa<onparvapora<on
Lesionsoulescompossneutresensolu<onsont
isolsparvapora<ondesmolculesdesolvant
(i) spectromtriedemassethermospray
unesolu<onestchauedansuntubecapillaire
uncourantdegoumelemesestintroduitdansla
sourcedions
largementsupplanteparllectrospray
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(C)Techniquesdionisa<onparvapora<on
(ii)spectromtriedemasseparlectrospray(ES)
aussiionisa<onpressionatmosphrique(API)
lchan<llonensolu<onpasseparlaiguilledunbuliseur
danslarosol,latailledesgoutelemediminueavec
lvapora<ondusolvent;laconcentra<ondesionsaugmente
explosionCoulombiquedonnedesionsisols
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Comparison:ESetIEdelactose
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Rsumdestechniquesdionisa<on
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Lestechniquesdespara<ondesions
ANALYSEURS
Lanalyseursparelemlangedionsgnrltape
dionisa<onparordredem/zandobtenirunspectre
spectromtredemassesecteurmagn<que
spectromtredemassequadriple
spectromtredemasstrappeionique
spectromtredemassetempsdevol
spectromtredemassetransformedeFourier
spectromtriedemassetandem
(Voirpp813dumanuel)
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Spectromtredemassesecteurmagn<que
LionsubituneforceBvzquicourbesatrajectoire.
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Spectromtredemassequadriple
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Rsumdesanalyseurs
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Dtermina<ondelaformulemolculaire
Grcelaspectromtriedemasse,onpeutdterminer
lamasseexacteformulemolculaire.
Exemple:CO,N2,C2H4ontenvironlammemassede
28Da.
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Dtermina<ondelaformulemolculaire
Enu<lisantlesmassesexactes
pourlesisotopes
abondants,onob<ent:
12C16O:12,0000+15,9949
=27,9949Da
14N :2x14,0067
2
=28,0062Da
12C 1H :2(12,0000)+4(1.00794)
2 4
=28,0312Da
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Dtermina<ondelaformulemolculaire
Lesespcesmolculairesquicon<ennentdes
isotopesmoinsabondantsvontdonndespics
deM+1,M+2,etc.
Exemple:CH4
12C1H4:
13C1H4:
12C2H1H3:
13C2H1H3:
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16Da
17Da
17Da
18Da
M+
M+1
M+1
M+2
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Dtermina<ondelaformulemolculaire
Desformulesgnrales(maisapproxima<ves)pourcalculerles
intensitsdespics:
%(M+1)=100(M+1)/M=
1,11x(No.deC)+0,016x(No.deH)+0,38x(No.deN)+
%(M+2)=100(M+2)/M=
(1,11x(No.deC))2/200+(0,016x(No.deH))2/200+0,20x(No.deO)
Exemple:PourCO,N2,etC2H4,lesintensitsdespicssont:
compos M M+1 M+2
CO 100 1,15 0,21
N2 100 0,76 0,0
C2H4 100 2,28 0,02
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Lescomposshalogns
LesisotopesduCl
etBrdonnentdes
spectres
intressants
Abondances
rela<ves:35Cl
100%;37Cl32,5%;
79Br:100%;81Br
98,0%
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