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Objetivo General
Determinar la existencia de protena en la aceituna
presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar. Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que permite determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante espectroscopa ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el ion Cu2+).
III.- PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Realizaremos dos pruebas: 3.1. REACCIN XANTOPROTEICA a) Cogemos varias semillas de aceitunas (secadas anteriormente) y las trituramos en un recipiente. Una vez trituradas las echamos en un tubo de ensayo y le aadimos 1cm3 de HNO3concentrado, en esta imagen podemos ver el HNO3 y semillas de aceitunas en distintos tubos de ensayo.
c) Calentamos el tubo de ensayo con un mechero hasta que la reaccin tenga un color amarillo. Una vez calentada la reaccin la enfriamos en agua fra (el color amarillo de la reaccin es debido a la reaccin de las protenas con el cido ntrico concentrado).
d) Aadimos a la reaccin unas gotas de disolucin de sosa al 40% y el color de la reaccin se vuelve anaranjado oscuro (se neutraliza la reaccin).
3.2. REACCIN DEL BIURET El nombre de la reaccin se debe a que cuando las protenas se ponen en contacto con sosa se forma una sustancia llamada biuret. a) Cogemos varias semillas secas de aceitunas y las trituramos en un recipiente. b) Una vez trituradas las echamos en un tubo de ensayo y le aadimos 1 cm3 de hidrxido sdico al 20%.
Aparece un color ms o menos violeta caracterstico de esta reaccin debido al contacto del biuret con el sulfato cprico diluido. IV. CONCLUSION Determinamos la existencia de protena en la aceituna. Describimos las pruebas de xantoproteica y biuret. Realizamos la marcha analtica con las pruebas de xantoproteica y biuret. V. SUGERENCIAS Es conveniente hacer la prctica con semillas de aceitunas secadas con anterioridad y trituradas al mximo, de lo contrario puede salir negativa. VI. BIBLIOGRAFA
Anderson SC (1995): Metabolismo de aminocidos y afecciones relacionadas. En Anderson SC, Cockayne (Iniciales nombre?) (eds): Qumica Clnica, 1 Ed. Editorial Interamericana McGraw-Hill (Mxico D.F., Mxico), pp. 213 221. Berezov TT, Korovkin BF (1992): Chemistry of Proteins. En Berezov TT, Korovkin BF (eds): Biochemistry, 1 Ed. Editorial Mir Publishers Moscow (Mosc, Rusia), pp. 19 64. http://www.redescepalcala.org/olivaryescuela/divulgacion/5_Feria_Sevilla/Proyecto/analisis_ aceituna/analisis_aceituna.htmlANEXOS
VI. ANEXOS