Magorzata Luchter

IMMUNOCYTOCHEMIA
Wykrywanie i lokalizacja w/na komrkach antygenw przy pomocy swoistych przeciwcia immunohistochemia (tkanki) zastosowanie w badaniach biologii komrki a take diagnostyce: na podstawie charakterystycznego markera lub grupy markerw dla danej jednostki chorobowej

IMMUNOCYTOCHEMIA W DIAGNOSTYCE
choroby autoimmunologiczne choroby neurodegeneracyjne choroby serca zakaenia wirusami, bakteriami, grzybami NOWOTWORY

choroby autoimmunologiczne
ANA antinuclear antibody, przeciwciaa skierowane przeciwko zawartoci jdra komrkowego. Czyli oglne okrelenie na przeciwciaa przeciwko biakom histonowym, towarzyszcym centromerom, topoizomerazom, rybonukleoproteinom. wysokie stenie w surowicy w przypadku chorb autoimmunologicznych takich jak: tocze rumieniowaty, zwyrodnienie staww, syndrom Sjgren`a, zapalenie wtroby i inne

choroby autoimmunologiczne
test z komrkami Hep-2, modyfikacje?

-test mwi o obecnoci choroby autoimmunologicznej -ale jest on przeprowadzany wobec ogu antygenw antyjdrowych -przyblione okrelenie typu choroby na podstawie wzoru (dalsze badania)

choroby autoimmunologiczne

http://ww2.mymedicnews.com/article.asp?newsid=761

choroby autoimmunologiczne
LIMITATIONS OF THE PROCEDURE 1. The ANA test is a laboratory diagnostic aid and by itself is not diagnostic. (Prby pewnej normalizacji) Positive ANA may be found in apparently healthy individuals. It is therefore imperative that ANA results be interpreted in light of the patients clinical condition by a medical authority. Wiek, pe, uywki... 2. SLE patients undergoing steroid therapy may have negative test results. 3. Many commonly prescribed drugs may induce ANA (6,7). 4. One autoantibody pattern may partially or completely obscure the diagnostic features of the other. In such instances, it is necessary to titrate the serum. 5. No definitive association between the pattern of nuclear fluorescence and any specific disease state is intended with this product.
http://eng.genericassays.com/prod/AL/AL_E_8100.pdf

choroby autoimmunologiczne
Badania nad zastosowaniem immunocytochemii w diagnostyce przykad pemfigoidu klasycznego przewlekej choroby skry o podou autoimmunologicznym Przeciwciaa przeciwko skadnikowi dopeniacza C3d

choroby autoimmunologiczne

Formalin fixed tissue, rabbit antihuman polyclonal antibody against C3d Vision BioSystems Bond polymer alkaline phosphatase Red Detection Katrin Pfaltz et al.

Choroby neurodegeneracyjne

Alzheimer: W przypadku Alzheimera stosuj si m.in przeciwciaa przeciwko ubikwitynie- biaku sucym do oznaczania le sfadowanych biaek przeznaczonych do proteasomowej destrukcji. Obserwuje si akumulacj tych przeciwcia w obrbie pytki amyloidowej oraz w obrbie spltek neurofibrylarnych agregatw hiperfosforylowanych biakek tau przeciwciaa anty-tau

Choroby neurodegeneracyjne

Amyloid precursor protein alfa lub beta secretaza materiay informacyjne z kursu stres komrkowy i apoptoza

Choroby neurodegeneracyjne

pytka gra, spltki-d

http://www.propath.com/newsletters-immunohistochemistry-173/157-august-2002-ubiquitin-immunohistochemistry-in-alzheimers-disease

Choroby neurodegeneracyjne

Identyfikacja chorb prionowych: specyficzne przeciwciao anty PrPsc

Vladka Curin Serbec et al. 2003

choroby serca

Przykad diagnostyki zawau minia sercowego (MI-Infarcted myocardium) przeciwciaa anty-C9 oraz przeciwko troponinie T metoda pozwala na wczeniejsze potwierdzenie zawau gdy zwyke metody histochemiczne s skuteczne dopiero po 12h od zaobsrerwowanych objaww
tkanka serca zdrowa MI obecno troponiny T + obniony obecno C9 + -

choroby serca

Diagnostyka HIV

standardowo : ELISA, WESTERN BLOT, RT-PCR na obecno antygenw(p24- rzadko), przeciwcia/ RNA wirusa w linie, serum lub moczu. Dodatkowo symptomy kliniczne: (powikszenie wzw chlonnych, objawy z drg oddechowych, zator drg nosowo-gardwych ) bardziej wyrafinowany sposb detekcji biopsja m.in. wzw chonnych, przeciwciao anty p24 (moliwa anlaziza tkanek z innych miejsc- puc, mzgu, migdaki) obecno virionw w germinal center FDC, ale te czsto w CD4+, aktywowanych CD8+, makrofagach, NK

germinal centres, p24 antibody staining (czerwone)

Mufaddal T Moonim et al.

http://www.pinnacletoxicology.com/std_te sting/hiv_picture.htm

Diagnostyka nowotworw
przeciwciaa specyficzne dla biaek charakterystycznych wobec danego typu nowotworu przeciwciaa skierowane przeciwko biakom filamentw porednich przeciwciaa skierowane przeciwko wydzielanym biakom (nowotwory tk endokrynnych)

Diagnostyka nowotworw
specyficzne antygeny*

PR- progesteron, ER- estrogen receptors-luminal non luminal; HER-2 human epidermal growth factor receptor-2, CK5/6 or epidermal growth factor receptor (EGFR)- basal

Diagnostyka nowotworw
Badanie immunocytochemiczne pozwala na rozrnienie rnych subtypw co z kolei daje moliwoc okreslenia teoretycznego czasu przeycia oraz dostosowania terapii np. Wysokie stenie antygenu Her-2 wiadczy o agresywnym typie nowotworu ale jednoczenie daje wiksze szanse na powodzenie terapii z wykorzystaniem przeciwcia monoklonalnych
http://www.biooncology.com/research/hdis/her2/index.html

Antigen Factor VIII-related antigen

Tumor Specificity guzy naczyniowe

Gross cystic disease fluid protein

Rak piersi

czerniak, renal angiomyolipoma HMB-45 (naczyniakominiakotuszc zak nerek;) ) misniowoguzy misni gadkich i specyficzna aktyna szkieletowych

HMB 45- Przeciwciao stworzone na podstawie ekstraktu z czerniaka w 1986, okazao si byc specyficzne: antygen przeciwko ktremu jest ono skierowane wystpuje tylko w podowych melanocytach
Formalin fixed paraffin embedded human melanoma stained with ab787, using ABC and AEC chromogen http://www.abcam.com/melanoma-antibodyhmb45-ab787.html#ab787_1.jpg

mioglobina
Prostate-specific antigen Thyroglobulin

guz misni gadkich

rak prostaty

nowotwr komrek nabonka pcherzykowatego tarczycy

Diagnostyka nowotworw
filamenty porednie

- brak polaryzacji; dimery spolaryzoawne, tetrameryfunkcjonalne filamenty- uoenie head to tail

Diagnostyka nowotworw
filamenty porednie

Podzia filamentw porednich:

Typ I-keratyny kwane Typ II keratyny zasadowe heterodimery! z typu I i II, komrki epitelialne Typ III Desmina- komponent sarkomerw (linia Z) w komrkach miniowych. GFAP (glial fibrillary acidic protein) znajduj si w astrocytach i innych komrkach gleju. periforyna w neuronach periferycznych. VIMENTYNA- w fibroblastach, leukocytach, komrkach endotelialnych naczy krwiononych- komrki mezodermy Typ IV -interneksyna Neurofilamenty - wzdu aksonw neuronw. Synemina, Syncoilina Typ V Nuclear Lamins

Diagnostyka nowotworw
filamenty porednie

teoretycznie moliwo rozrnienia typw nowotworw w zalenoci od ich pochodzenia ektodermalne, mezodermalne na podstawie filamentow porednich niestety zdarza si, e niektre nowotwory pochodzenia ektodermalnego s pozytywne dla vimentyny itd

Pojedyncza komrka oraz mikroprzerzut komrek raka piersi do szpiku kostnego. Barwienie przeciwciaem przeciwko cytokeratynie 8, 18 i 19 (APAAP)
STEPHAN BRAUN et al.

Bibliografia

http://www.propath.com/newsletters-immunohistochemistry173/157-august-2002-ubiquitin-immunohistochemistry-inalzheimers-disease http://www.alphalabs.co.uk/product-information/diagnosticproducts/immunology.aspx http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK20935/ http://en.wikipedia.org/wiki/HIV_test http://www.abcam.com/melanoma-antibody-hmb45ab787.html#ab787_1.jpg http://www.biooncology.com/research/hdis/her2/index.html http://eng.genericassays.com/prod/AL/AL_E_8100.pdf Vladka Curin Serbec et al., Monoclonal Antibody against a Peptide of Human Prion Protein discriminates between Creutzfeldt-Jacobs Disease-affected and Normal Brain Tissue

Bibliografia

Katrin Pfaltz et al., C3d immunohistochemistry on formalin-fixed tissue is a valuable tool in the diagnosis of bullous pemphigoid of the skin Rodney T. Miller, Immunohistochemistry in the Recognition of Early Myocardial Infarction Stephan Braun et al., Cytokeratin-positive cells in the bone marrow and survival of patients with stage I, II, or III breast cancer Fiona M. Blows et al., Subtyping of Breast Cancer by Immunohistochemistry to investigate a relationship between Subtype and Short and Long Term Survival: A Collaborative Analysis of Data for 10,159 Cases from 12 Studies Mufaddal T Moonim, et al., Identifying HIV infection in diagnostic histopathology tissue samples the role of HIV-1 p24 immunohistochemistry inidentifying clinically unsuspected HIV infection: a 3-year analysis