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El mejoramiento vegetal Las plantas que hoy se cultivan son distintas de sus antepasados silvestres, ya que el hombre ha modificado y seleccionado sus propiedades a lo largo de ms de diez mil aos en funcin de sus necesidades. La civilizacin moderna basa su agricultura en agroecosistemas, ecosistemas fuertemente alterado por las actividades humanas con el objetivo de la produccin agrcola, en los que la biodiversidad se ha reducido para maximizar los rendimientos multiplicando la produccin de alimentos para satisfacer necesidades humanas. Muchas especies (animales, vegetales, microorganismos) que predominan en estos sistemas resultan de la seleccin artificial vinculada al manejo agrcola. Un agro-ecosistema es controlado con el objetivo definido de producir alimentos, y a diferencia de un ecosistema natural (como el que se encontrara en un parque nacional), es de naturaleza artificial y se encuentra en constante evolucin y mejoramiento de las prcticas agrcolas. La gran mayora de los cultivos que utiliza el agricultor en la actualidad han sido generados por los mtodos convencionales, como los cruzamientos selectivos, en centros dedicados a la produccin de nuevas variedades. Hoy, la ingeniera gentica se suma a las prcticas convencionales como una herramienta ms para mejorar o modificar los cultivos vegetales. La incorporacin de OGMs (organismos genticamente modificados) en los agroecosistemas ha ayudado a hacerlos ms sustentables a partir de la asociacin con mtodos conservativos, como la siembra directa y un control ms focalizado de los insectos plaga respetando otros insectos benficos. Tcnicas tradicionales de mejoramiento de plantas Existe gran diversidad de fenotipos en las plantas, en sus caractersticas y en sus funciones, determinada por la variabilidad gentica y la interaccin de estos genotipos con el ambiente. Existen diferentes factores que favorecen la diversidad gentica y la variedad de caractersticas entre individuos de una misma especie o de diferentes especies. Entre estos factores se puede mencionar la reproduccin sexual y las mutaciones que aumentan la diversidad sobre la que acta la seleccin natural. A esto se suma la accin del hombre que, a travs de la seleccin artificial y la hibridacin (cruzamientos selectivos) aprovecha esta diversidad y promueve la reproduccin y supervivencia de determinadas especies o variedades que resultan favorables. Todos estos mecanismos, naturales e inducidos por el hombre, se incluyen en lo que se denominan tcnicas tradicionales de mejoramiento vegetal, que se detallan a continuacin: 1. Seleccin artificial y cruzamientos selectivos: El hombre selecciona las plantas que le ofrecen ms ventajas (mejores frutos, mayor crecimiento, mayor resistencia a enfermedades, etc.), y realiza cruzamientos selectivos entre esas variedades para obtener descendencia con
"El Cuaderno de Por Qu Biotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada por el equipo pedaggico del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa. Su reproduccin est autorizada bajo la condicin de que se aclare la autora y propiedad de este recurso pedaggico por parte del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa.
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mejores rendimientos. Adems, desde que es agricultor, el hombre no solo ha seleccionado sino que tambin ha trasladado especies vegetales de un lugar a otro, a otras condiciones ambientales. Estas variables ambientales tambin originaron gran diversidad en los vegetales. Por ejemplo, las diferentes coles (brcoli, coliflor, repollo, repollito de Burselas, y otros) son descendientes de una especie original, obtenidas por el hombre mediante seleccin artificial. 2. Hibridacin (intervarietal, interespecfica, intergenrica): El hombre realiza cruzamientos no solo entre diferentes variedades de una misma especie, sino tambin interespecficos (entre especies) e inclusive intergenricos (entre diferentes gneros). Estos cruzamientos generan hbridos: mezcla entre dos especies o gneros diferentes pero sexualmente compatibles que da como resultado una descendencia cuya combinacin de genes ser al azar, diferentes de los progenitores. Esta tcnica es una de la que ms contribuy a la diversidad. 3. Mutagnesis inducida (agentes mutagnicos). Esta tcnica se utiliza desde mediados del siglo XX. Por medio del uso de sustancias qumicas o radiaciones se inducen mutaciones al azar en el genoma que generan cambios en la planta. 4. Polinizacin y Fertilizacin in vitro: Existen barreras sexuales entre organismos de diferentes especies y gneros. El hombre puede atravesar estas barreras a travs de la polinizacin (traslado del polen que contiene las gametas masculinas de la planta, hacia la estructura reproductiva femenina). Cuando el hombre aprende a polinizar artificialmente estas plantas y se genera la unin de las gametas, se pueden cultivar los embriones in vitro. 5. Cultivo in vitro de clulas, tejidos y rganos vegetales. Tambin se cultivan clulas, tejidos u rganos en medios nutritivos en frascos. Esta tcnica acompaa otras tcnicas de mejoramiento vegetal. El cultivo in vitro es posible debido a que las plantas tienen una propiedad denominada totipotencialidad celular: toda clula viva e ntegra de una planta, sin importar el grado de especializacin alcanzado, es capaz de regenerar una planta entera igual a la original (ver Cuaderno N 35 y N 56). 6. Obtencin de haploides: cultivo in vitro de estructuras sexuales haploides que generan organismos haploides que pueden aportar caracteres agronmicos importantes. 7. Variacin somaclonal (cultivo in vitro o a campo) : mediante cultivo de clulas o tejidos in vitro se pueden generar variaciones.
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Seleccin y Cruzamiento tradicional Las diferentes variedades de maz (Dent, Sweet, Popcorn, Flint, Pod, etc.) son producto de procesos de seleccin artificial, sumado a procesos de seleccin natural y mutaciones que el hombre fue aprovechando y seleccionando hasta llegar a domesticarlo. Hoy en da hay una gran variedad de maces hbridos, ms vigorosos, con mejores caractersticas, ms beneficiosos desde el punto de vista alimenticio, como el tamao y disposicin de los granos. Estos mtodos se basan en el cruzamiento entre individuos de la misma especie pero que muestran caractersticas diferentes, y una posterior seleccin de los ejemplares que presentan las caractersticas deseadas. Este mtodo de cruzamiento y seleccin se repite sucesivamente de manera de lograr, en la variedad final, la incorporacin de los genes que llevan informacin para los rasgos deseados y la eliminacin de aquellos relacionados con las caractersticas no deseadas. Este proceso de generacin de nuevas variedades ha sido (y contina siendo) muy til en la agricultura y ha originado a las variedades que se cultivan hoy en da.
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A travs de los cruzamientos tradicionales se mezclan genes de plantas que presentan diferentes variantes para una misma caracterstica, como el tamao del choclo en este caso. De la diversidad que se obtiene, el agricultor selecciona el que ms le conviene y lo vuelve a cruzar, y as sucesivamente hasta obtener la especie deseada. El hbrido que resulta por cruce sexual tiene una combinacin gentica de los progenitores. Esta recombinacin es al azar.
La mutagnesis A fines de la dcada de 1920, los investigadores descubrieron que se pueden obtener mutaciones (cambios en el ADN) exponiendo a las plantas a agentes mutgenos fsicos (rayos X y gamma, neutrones, protones, etc.) o qumicos (etilmetanosulfonato, azida sdica, etc). Estas mutaciones ocurren al azar en el genoma y generan una enorme variabilidad que puede dar lugar a la aparicin de caractersticas interesantes, las que son seleccionadas por el agricultor. As se obtuvo el pomelo rosado, a partir del pomelo blanco mutagenizado por radiacin. Otros cultivos modificados por mutagnesis son: trigo, arroz, lechuga y porotos, entre otros. La mutagnesis no es dirigida. Se induce una gran cantidad de variaciones a travs de los agentes mutagnicos en diferentes cromosomas, proporcional a la dosis del agente que se emple para causar las mutaciones. Las mutaciones que se inducen son al azar, no se sabe qu tipo de mutaciones o dnde en el genoma de la planta ocurren, pero dan nuevas variedades que pueden ser aprovechables porque ofrecen caracteres nuevos interesantes.
La biotecnologa moderna en el mejoramiento vegetal Las tcnicas tradicionales de hibridacin mezclaron durante varios aos miles y miles de genes y muchas generaciones de plantas con el fin de obtener una caracterstica deseada. La biotecnologa acelera este proceso permitiendo a los cientficos tomar solamente los genes deseados de una planta, logrando de ese modo los resultados buscados en tan slo una generacin (ver Cuaderno N67). La biotecnologa es una herramienta ms segura y eficiente para el mejoramiento de especies respecto de las tcnicas tradicionales, puesto que elimina gran parte del azar presente en el mejoramiento tradicional. Por otro lado, la biotecnologa moderna es una nueva tecnologa, en la medida que puede modificar los atributos de los organismos vivientes mediante la introduccin de material gentico que ha sido trabajado in vitro (fuera del organismo). Esta metodologa ofrece tres ventajas fundamentales respecto a las tcnicas convencionales de mejora gentica basadas en la hibridacin, como muestra el esquema:
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Los genes que se van a incorporar pueden provenir de cualquier especie, emparentada o no (por ejemplo, un gen de una bacteria puede incorporarse al genoma de la soja). En la planta mejorada genticamente se puede introducir un nico gen nuevo preservando en su descendencia el resto de los genes de la planta original. Este proceso de modificacin demora mucho menos tiempo que el necesario para el mejoramiento por cruzamiento.
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De esta forma se puede modificar propiedades de las plantas de manera ms amplia, ms precisa y ms rpida.
Mediante el cruzamiento tradicional se genera un hbrido que combina al azar genes de ambos organismos parentales, entre ellos el gen de inters que codifica para la caracterstica deseada. Mediante las tcnicas de la biotecnologa moderna se pasan uno o unos pocos genes, que codifican una caracterstica especfica conocida. La nueva planta est integrada con todos los genes originales de la planta y un gen que es introducido de manera precisa y dirigida.
Perspectivas de la biotecnologa agrcola La biotecnologa moderna est avanzando en desarrollos que tendran beneficios para productores, consumidores e industrias, entre ellos: Aumento de la productividad y calidad de los cultivos. Resistencia a enfermedades y plagas. Tolerancia a herbicidas, sequas, salinidad y temperaturas extremas. Alimentos ms nutritivos, como frutas y cereales con mayor contenido de vitaminas. Vacunas comestibles, como bananas que contengan la vacuna contra la hepatitis B. Alimentos ms saludables, como aceites con menor contenido de cidos grasos indeseables, papas que absorban menos aceite, frutas con ms antioxidantes y man libre de alrgenos.
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Actividades
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Objetivos: - Repasar conceptos analizados en el texto. - Introducir conceptos bsicos de biotecnologa moderna. - Diferenciar entre tcnicas tradicionales y biotecnologa moderna para el mejoramiento vegetal. - Interpretar representaciones grficas y relacionar con los conceptos trabajados. Destinatarios y conceptos relacionados Los temas abordados en este Cuaderno se adaptan al trabajo con alumnos de EGB ya que incorporan conceptos de Ecologa, como los ecosistemas, sus estructuras y funciones, y conceptos vinculados con la reproduccin sexual y la diversidad de caractersticas. Con alumnos de Polimodal es posible vincular con conceptos como diversidad gentica, seleccin natural y seleccin artificial, mutaciones, y evolucin. Tanto en EGB como en el Polimodal es posible incorporar conceptos vinculados con el cultivo in vitro de clulas, as como la reproduccin asexual en vegetales. Consideraciones metodolgicas A travs de este Cuaderno se pretende introducir conceptos bsicos que permitan comparar las tcnicas tradicionales y las tcnicas que emplea la biotecnologa moderna para el mejoramiento vegetal. En este sentido es importante dejar en claro que la biotecnologa moderna no reemplaza sino que complementa las tcnicas que emplea la agricultura tradicional. Tambin, es importante comprender que la biotecnologa moderna no se presenta como una alternativa para paliar el hambre en el mundo, sino que ofrece soluciones puntuales a problemticas especficas, como plantas resistentes a las sequas, o una mayor proporcin de nutrientes en alimentos que constituyen la base de la dieta en determinadas regiones. Otro aspecto interesante para incluir en la clase a partir de este Cuaderno es el concepto de agroecosistema y de agricultura tradicional, y sus efectos en el ambiente, y dejar en claro que la biotecnologa moderna no puede revertir de forma generalizada sus efectos negativos, pero aporta soluciones puntuales a problemas particulares (ver Cuaderno N 59). Vinculado con este punto, es importante que los alumnos puedan comprender el hecho de que los alimentos que son producto de la actividad agrcola no son naturales, independientemente de la tcnica empleada para su obtencin (convencional, orgnica, ingeniera gentica) ya que implican la intervencin humana que se inici con el comienzo mismo de la agricultura hace 10 mil aos. Otro aspecto a tratar es el hecho de que no existe riesgo cero; es decir que los alimentos, sea cual fuere el mtodo de obtencin, implican ciertos riesgos calculables, pero que no implican peligro si se los consume de forma apropiada (por ejemplo, en lo que respecta a su higiene y coccin).
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En el Cuaderno se presenta un esquema que compara ambas tcnicas de mejoramiento vegetal que requiere de un trabajo de interpretacin y anlisis con los alumnos. Se sugiere realizar la Actividad N2 del Cuaderno N1 para trabajar este esquema ya que si bien las representaciones grficas son herramientas tiles para la enseanza, en ocasiones resultan difciles de interpretar por los alumnos y pueden obstaculizar la comprensin. Por eso, es recomendable dedicarle un tiempo al anlisis de esquemas para favorecer su interpretacin y, en consecuencia, la comprensin de los conceptos que se pretende transmitir a travs de su utilizacin. Se sugiere explicitar los cdigos y simbolismos que se emplean y construir equivalencias con otros lenguajes (traducir los textos en esquemas y los esquemas en textos). Asimismo, es importante el anlisis de los grficos y poner nfasis en diferenciar la informacin que se lee en el grfico y lo que es posible interpretar a partir de esa informacin. La interpretacin de un grfico implica examinar los datos representados en funcin de la informacin previa con la que cuentan, y sacar conclusiones acerca de la situacin o el proceso particular que se analiza. Actividad 1. Comprensin de conceptos A partir del texto responder las siguientes consignas: 1. A qu se denomina agroecosistema y en qu se diferencia de un ecosistema natural? Rta. Un agroecosistema o sistema agrcola difiere de un ecosistema "natural" tanto en su estructura como en su funcin. Los agroecosistemas son sistemas modificados por el hombre, y que dependen de prcticas agrcolas para la produccin de alimentos, fibras y otros productos de uso humano. Un ecosistema natural emplea recursos disponibles en el entorno para el desarrollo de las especies del lugar sin intervencin humana. 2. Mencionar los factores naturales que aumentan la diversidad de los seres vivos sobre la que acta la seleccin natural. Rta. Reproduccin sexual, mutaciones. 3. Cmo interviene el hombre en la diversidad o seleccin de determinadas especies? Rta. a travs de la seleccin artificial y la hibridacin (cruzamientos selectivos) el hombre aprovecha la biodiversidad y promueve la reproduccin y supervivencia de determinadas variedades o caracteres que le resultan favorables. 4. Las plantas con flores de colores vistosos resultan convenientes para un agricultor ya que le puede ofrecer mayores ventas e ingresos. Explicar cmo sera posible obtener plantas con flores vistosas por el proceso de seleccin artificial y cmo sera posible hacerlo con tcnicas de ingeniera gentica. Rta. El agricultor debera seleccionar aquellas plantas que tienen flores ms vistosas y cruzarlas con otras de flores menos vistosas, y luego cruzar los descendientes una y otra vez hasta obtener las plantas deseadas. Mediante tcnicas de biotecnologa moderna, si se identifica el gen que le confiere a las plantas el color de las flores, se podra aislar, clonar y transferir a aquellas plantas que se desee comercializar. 5. En qu consiste la mutagnesis y cmo afecta las caractersticas de los organismos? Rta. La mutagnesis es el origen de mutaciones mediante diferentes agentes (fsicos o qumicos). La mutacin es una alteracin en el ADN. Debido a que el ADN determina las
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caractersticas del organismo, un cambio en el ADN puede provocar un cambio (favorable o no) en los rasgos del organismo. 6. Qu diferencia se podra establecer en la especificidad o precisin de los cambios que se introducen mediante tcnicas tradicionales y mediante biotecnologa moderna? Rta. Las tcnicas de ingeniera gentica que emplea la biotecnologa moderna permiten introducir cambios de forma ms precisa ya que se agrega un nico gen especfico y conocido en lugar de mezclar o modificar genes de manera azarosa. Actividad 2. Los ecosistemas a. Definir qu es un ecosistema. b. Diferenciar entre Ecosistema natural y Agroecosistema. Nota para el docente: a partir de una investigacin acerca de los ecosistemas, sus caractersticas y diversidad, se sugiere construir con los alumnos un cuadro comparativo como el que figura a continuacin, para establecer una comparacin entre un ecosistema natural, un agroecosistema y un sistema urbano.
Ecosistema natural Impulsado por energa solar. Agroecosistema Sistema urbano
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Impulsado por energa solar y combustible Impulsado por combustibles, auxiliar. energa hidroelctrica, energa nuclear. Los animales y plantas que dominan son Los productores son escasos, seleccionados artificialmente y no por abundan los consumidores: los seleccin natural. seres humanos y sus animales domsticos.
Requieren fuentes auxiliares de energa, que Usan recursos disponibles en el Importan su energa en forma de pueden ser humana, animal y combustible, as lugar, no los importan alimentos de otras regiones donde como riego, labranza, y tcnicas de control se producen. para aumentar la productividad encaminada a la obtencin de alimento y fibras vegetales, cultivables, procesables y de amplio uso. Diversidad de especies; con La diversidad puede ser muy reducida en Empobrecimiento en especies; se variadas relaciones entre ellos comparacin con la de otros ecosistemas. reduce el nmero de relaciones y con el suelo entre ellos y, especialmente, con el suelo. Descomponen la totalidad de Alto rendimiento mediante la conversin de la Producen residuos que, por su sus desechos: restos de hojas, energa en alimento. Existe un mecanismo de cantidad o calidad no pueden ser organismos muertos, etc. retroalimentacin del sistema. descompuestos en el lugar; son exportados y acumulados en otras regiones.
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ACTIVIDAD 3. Cultivos in vitro La siguiente actividad presenta un texto introductorio y una investigacin del INTA en el tema del cultivo in vitro. La realizacin de esta actividad se sugiere para abordar el tema del cultivo in vitro y sus utilidades en el mejoramiento vegetal. Se sugieren enlaces que se pueden consultar para ampliar la informacin y se plantean preguntas para analizar la actividad. a. Introduccin Una de las formas de conservar con la mayor integridad posible la variabilidad gentica de poblaciones seleccionadas es mediante la preservacin de germoplasma. Los mtodos de conservacin ex situ se basan en el mantenimiento del material biolgico en bancos de semillas, bancos de cultivo in vitro, colecciones de plantas (en campo, viveros o jardines botnicos). En general, los bancos de semillas constituyen uno de los mtodos ms convenientes para la conservacin de germoplasma ex situ, porque permiten almacenar una gran variabilidad gentica en forma econmica y prctica. Otro mtodo de conservacin de germoplasma ex situ, es mediante el cultivo in vitro de tejidos En estos casos, la conservacin de los genotipos se realiza mediante el mantenimiento de plantas vivas o mediante el cultivo in vitro de pices o de nudos. El estudio de los materiales que contienen los genes (germoplasma) es de utilidad en investigaciones bsicas y aplicadas de reas que incluyen, entre otras, la gentica, la citogentica y el mejoramiento gentico, la bioqumica y la patologa (http://www.inta.gov.ar/ediciones/2004/biotec/parte5_cap3.pdf y http://www.ciencia-hoy.retina.ar/hoy35/papa03.htm) b. Conservacin de germoplasma de papa Fuente: http://www.inta.gov.ar/balcarce/info/documentos/recnat/germo/conservacion.htm Ing. Agr. Andrea Clausen M.Sc. (INTA) El banco de germoplasma de la EEA Balcarce tiene como objetivos coleccionar, conservar, distribuir, caracterizar y evaluar las especies de papa silvestres y cultivadas nativas de nuestro pas. La disponibilidad de germoplasma es imprescindible para el mejoramiento gentico ya que se requiere de variabilidad para aquellos caracteres que limitan la produccin del cultivo de papa. El valor de las especies silvestres de papa, as como de los cultivares locales andinos, radica en que poseen resistencia a diversos patgenos (virus, bacterias, hongos, insectos, nematodos) y a estrs ambiental (sequa, fro, calor) as como variabilidad para factores asociados con la calidad, por lo que la conservacin de estos recursos en el mediano y largo plazo es necesaria a fin de disponer de fuentes de variabilidad gentica. La papa y sus congneres silvestres poseen una amplia distribucin, desde el sur de los Estados Unidos hasta la isla de Chilo y se conocen ms de 200 especies entre silvestres y cultivadas. En nuestro pas las especies silvestres se encuentran desde el litoral Atlntico
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hasta la Prepuna y Puna en la regin Andina y desde el NE y NO del territorio hasta la provincia de Ro Negro. Los cultivares nativos se encuentran nicamente en el NO argentino, principalmente en las provincias de Jujuy y Salta. En las especies silvestres se produce la prdida de genotipos y/o poblaciones como consecuencia del sobrepastoreo, incorporacin de nuevas reas de cultivo, infraestructura urbana y vial, lo que diezma la vegetacin natural ocasionando la prdida de materiales valiosos. El abandono de los cultivos tradicionales, en algunos casos su reemplazo por otras alternativas, la migracin de la poblacin rural hacia centros poblados, as como la presencia de plagas y enfermedades, son algunas de las causas que han reducido el cultivo de las variedades andinas. Con el objetivo de disponer de materiales genticos para el programa argentino de mejoramiento de papa, en la dcada del setenta se iniciaron actividades orientadas a disponer de una coleccin de especies emparentadas con la papa cultivada. Como resultado de las actividades desarrolladas, actualmente se dispone de una coleccin que incluye todas las especies silvestres y la mayora de los materiales cultivados nativos del pas. Las especies silvestres se conservan como semilla sexual bajo condiciones controladas de humedad y temperatura y los materiales cultivados se conservan in vitro. Adems se realiza la regeneracin y multiplicacin de los materiales conservados en aquellos casos en los que no se dispone de suficiente semilla, ya que como consecuencia del uso y distribucin del germoplasma es necesario reponer las existencias de los mismos. El Banco de Germoplasma de Papa de Balcarce integra la Red de Bancos Activos del INTA, que totalizan nueve bancos distribuidos en las distintas reas agroecolgicas del pas y un Banco Base, con sede en el Instituto de Recursos Biolgicos (IRB) del INTA Castelar que conserva duplicados de todas las colecciones activas. Con este objetivo anualmente se regenera parte de la coleccin de papa a fin de disponer de un duplicado en el Banco Base. Actualmente, en el Banco de conservacin in vitro del IRB se mantiene "en custodia" un duplicado de seguridad de la coleccin in vitro de papa del Centro Internacional de la Papa (CIP). La utilizacin efectiva de estas especies requiere de la descripcin y evaluacin de la variacin existente en los materiales conservados. En una primera etapa se deben identificar las distintas especies que integran la coleccin, detectar la variacin intra e interespecfica para diversos caracteres e identificar caractersticas de importancia agronmica. Como resultado de estas actividades, que integran a distintos grupos de trabajo, no solo de la Unidad Integrada Balcarce, se han identificado nuevas especies, genotipos resistentes a algunos de los patgenos que afectan al cultivo de la papa, variabilidad morfolgica, agronmica, bioqumica y molecular. Preguntas para el anlisis de la actividad 1. Investigar qu significan los conceptos in situ y ex situ. 2. A qu se denomina germoplasma? De qu forma se puede conservar? 3. Cules son algunos objetivos de la conservacin de germoplasma?
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4. Cmo podra contribuir la conservacin de germoplasma al mejoramiento de especies vegetales? 5. Cul es el cultivo al que se refiere el trabajo del INTA, y cmo se conservan? Rta. Papas silvestres y cultivadas nativas de la Argentina. Las especies silvestres se conservan como semilla bajo condiciones controladas de humedad y temperatura y los materiales cultivados se conservan in vitro. Adems se realiza la regeneracin y multiplicacin de los materiales conservados en aquellos casos en los que no se dispone de suficiente semilla. 6. Cul es el valor que se le atribuye a las especies silvestres de papa que se conservan en el INTA? Rta. poseen resistencia a diversos patgenos (virus, bacterias, hongos, insectos, nematodos) y a estrs ambiental (sequa, fro, calor) as como variabilidad para factores asociados con la calidad. 7. Cules son las causas que atribuye este texto a la prdida de genotipos y poblaciones de las especies silvestres? 8. Cul es el objetivo de su conservacin? Rta. Disponer de fuentes de variabilidad gentica para el programa argentino de mejoramiento de papa. 9. Investigar qu proyectos de bancos de germoplasma se llevan a cabo en el INTA de Pergamino. Para hacerlo se puede consultar el siguiente sitio. http://www.inta.gov.ar/pergamino/investiga/grupos/bcogermoplasma/banco.htm
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Actividad 4. Experiencia de laboratorio. Cultivo de porotos de soja in vitro (ver Cuaderno N 35) El objetivo de esta actividad es ensayar un cultivo in vitro que es simple de realizar y que requiere de material de fcil acceso. Se sugiere que los alumnos elaboren una tabla en la que puedan registrar a lo largo de 10 das los cambios que observan en las semillas, en el medio de cultivo, en las plantas, etc. y que respondan a las consignas que siguen. Preparacin de medio de cultivo: Materiales: 1 sobre de gelatina sin sabor (el necesario para realizar 1 litro de gelatina, aunque en el prctico se lo disuelva con menos lquido para que resulte ms consistente) 20 g de azcar 750 ml de agua caliente Mechero de Bunsen Olla a presin Dos botellas de litro de vidrio resistente al calor, con tapa Frasquitos de vidrio estriles con tapa
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Nota: si se dispone de los materiales, el medio de cultivo se puede preparar tambin con 30 gramos de sacarosa, 7 gramos de agar-agar, por medio litro de agua destilada y esterilizar el olla a presin o autoclave. Procedimiento Dividir el agua en dos botellas de litro de vidrio y agregar la gelatina sin sabor de forma equitativa en los dos frascos. Agregar en cada frasco 10 g de azcar y mezclar hasta que la mezcla quede homognea. Esterilizar en olla a presin durante 20 minutos con las tapas de los frascos flojas (Atencin! Si las botellas estn cerradas existe riesgo de explosin. Nunca llenar las botellas con el medio de cultivo porque se derramar y adems no alcanzar la temperatura de esterilizacin necesaria) Apagar el fuego y dejar que se iguale la presin interna de la olla con el exterior. Abrir la olla y cerrar las botellas. Distribuir 50 o 100 ml de medio de cultivo, preparado y esterilizado, en frasquitos de vidrio estriles (segn el volumen de los mismos). Atencin! Realizar este paso delante de un mechero prendido, abriendo los frascos y botellas cerca de la llama (sin hablar ni soplar para no contaminar). Inmediatamente cerrar los frascos tambin cerca de la llama. Dejar que la preparacin se solidifique y enfre. Desinfeccin de granos o porotos de soja Materiales: Granos de soja comercial Alcohol 70% (70 ml de alcohol diluido en 30 ml de agua) Lavandina 20% (20 ml de lavandina comercial diluida en 80 ml de agua) Agua estril (esterilizar de la misma forma que el medio de cultivo) Pinza de metal Recipientes bien limpios para desinfectar las semillas Procedimiento Esterilizar la pinza: mojar la pinza en alcohol puro, quemarla a rojo en el mechero, dejar enfriar. Esto se realizar al inicio de cada etapa que requiera el uso de la pinza. Si la pinza se usa muchas veces para lo mismo, la siguientes veces solo se mojar la pinza con alcohol y se quemar sin llevar a rojo. Usando una pinza estril, pasar los granos de soja durante un minuto en una solucin alcohol 70% . Luego sumergirlos en lavandina al 20% durante 15 minutos y por ltimo, darles 4 lavados en agua estril. Siembra
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Sembrar con pinza estril 4 granos por frasco de modo que el hleo (punto oscuro) quede hundido en el medio de cultivo y el resto del grano por encima del mismo. Por lo menos la mitad del poroto debe salir hacia la superficie, de lo contrario no germinar. Asegurarse que los porotos queden firmes o agarrados al medio pero no totalmente hundidos. Esterilizar la pinza cada vez que tomo un nuevo grano. Tapar cada frasco con papel film (el que se usa para envolver alimentos) y dejar a temperatura entre 24 - 26 (no menor a 20C) en un lugar que reciba luz directa durante el da. Preguntas para el anlisis de la experiencia 1. Investigar cul puede ser la utilidad del cultivo in vitro. Rta. Propagacin masiva de plantas, Clonacin de individuos elite durante todo el ao, Obtencin de plantas libres de virus, Produccin de semillas, Conservacin de germoplasma, Obtencin de metabolitos secundarios, Produccin de nuevos hbridos, Mejora gentica de plantas, Germinacin de semillas, Produccin de haploides, Estudios fisiolgicos diversos. 2. Si el cultivo de semillas de soja se realizara en un laboratorio de investigacin, cul podra ser el objetivo? Rta. Conservar semillas como fuente de material gentico, estudiar sus caractersticas y mejorar las semillas mediante ingeniera gentica, emplearlas como fuente de genes para transformar otras especies, realizar estudios fisiolgicos (funciones), propagar masivamente las plantas de soja, entre otros. 3. Qu funcin cumplen la gelatina y el azcar donde se siembran las semillas? Rta. Son el medio de cultivo que les provee de nutrientes, agua y sostn a las semillas. 4. Por qu se debe esterilizar el medio de cultivo y los materiales de trabajo, o tapar con film los frascos? Rta. Para evitar la contaminacin con microorganismos del ambiente. 5. Por qu se requiere una temperatura no menor a 20C, y luz? Rta. Son las condiciones en que la semilla y, luego la planta de soja, se desarrollan. La luz se necesita una vez que la planta germina y empieza el proceso de fotosntesis.
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Material de consulta
Edicin N 5
Ecologa. El vnculo entre las ciencias naturales y las sociales. Eugene P. Odum. (1978).
Compaa Editorial Continental S:A: de C:V: Mxico. Sitio Espaol con textos de biologa y geologa, esquemas, diapositivas, animaciones, y ejercitacin. http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/index.htm Ediciones INTA Biotecnologa y Mejoramiento Vegetal. Editores Dra. Viviana Echenique, Dra. Clara Rubinstein, Ing. Agr. Luis Mroginski- Argenbio -Consejo Argentino para la Informacin y el Desarrollo de la Biotecnologa. http://www.inta.gov.ar/ediciones/2004/biotec/biotec.htm Especies Silvestres y Mejoramiento Gentico de la Papa. ELSA L. CAMADRO. Estacin Experimental Agropecuaria Balcarce (INTA) y Facultad De Ciencias Agrarias Universidad Nacional De Mar Del Plata. Vol 5. N35 (1996). http://www.ciencia-hoy.retina.ar/hoy35/papa01.htm Micropropagacin de plantas. Protocolos Redbio/FAO Red de Cooperacin Tcnica en Biotecnologa Vegetal para Amrica Latina y el Caribe. http://www.redbio.org/protocolos/index.htm Ms all de la revolucin verde: un papel para la biotecnologa Enrique Iez. Instituto de Biotecnologa. Universidad de Granada. http://fai.unne.edu.ar/bioetica/agricultura.htm Preguntas y Respuestas en Biotecnologa Agropecuaria. Secretara de Agricultura, Ganadera, Pesca y alimentos, Argentina. http://www.sagpya.mecon.gov.ar/new/0-0/programas/biotecnologia/respuestas.php
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