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Marcadores virales

J. Jorge Huamn Saavedra , Doctor en Medicina, Magister en Bioqumica, Patlogo Clnico,2013

Hepatitis A

Marcadores de Hepatitis B

Hepatitis C
Hepatitis C Se pueden detectar los anticuerpos por ELISA y es una de las pruebas actualmente solicitadas a los donantes de sangre. Se ha encontrado cerca al 1 % en donantes del Per. Cuando se usan reactivos de segunda y tercera generacin, anticuerpos pueden ser detectados durante la fase inicial de aumento de las transaminasas.

Hepatitis C
En pacientes con hepatitis crnica antiHCV es detectable en ms del 95 % de los casos. La prueba confirmatoria, por los falsos positivos es el inmunoblot recombinante o RIBA, sin embargo una alternativa de mayor sensibilidad es la determinacin de RNA viral y es considerado el gold standard. El HC VRNA puede ser detectado antes de la elevacin de las transaminasas y de la aparicin de anticuerpos, por lo que usa para el diagnstico de infeccin aguda antes del desarrollo del anticuerpo, confirmacin de infeccin en aquellos enfermos que no desarrollan anticuerpos o que fallan por inmunocompetencia, para diferenciar infeccin persistente de resuelta, definir respuesta al tratamiento anti-viral

Citomegalovirus
El aislamiento del virus o deteccin de antgenos CMV por inmunofluorescencia o DNA viral por PCR de muestras clnicas apropiadas junto a la demostracin de un incremento de anticuerpos (ELISA) en cuatro veces su ttulo son los medios diagnsticos disponibles. EL DNA puede ser detectado antes que la antigenemia en los pacientes que han recibido trasplantes . Un aumento de anticuerpos puede no ser detectables hasta 4 semanas despus de la infeccin, la deteccin de IgM ( ELISA) es til en el diagnstico de infeccin aguda.. El CMV es parte del TORCH encontrndose en un 4 % de los casos

Virus Herpes Simple


Se distinguen el HSV1 causante principalmente del herpes oral y el HSV2 del genital. El laboratorio puede detectar ambos tipos de HSV por medio de anticuerpos monoclonales por ELISA e inmunofluorescencia, detectndose IgM para infecciones recientes e IgG para crnica. Forma parte del TORCH. La infeccin neonatal es 30 % por tipo 1 y 70% tipo 2.

VIH

Infeccin por VIH


SECUENCIA DIAGNOSTICA ELISA Deteccin de anticuerpos Perodo de ventana 2 semanas a 4 meses. Antes son seronegativos. Es importante trabajar con la ltima generacin de reactivos. Sensibilidad >99.5 % Especificidad: tener cuidado con los falsos positivos: poblacin de bajo riesgo.Causas: anticuerpos a antgenos clase II,autoanticuerpos, hepatopata, vacunacin anti influenza, infecciones virales aguda Resultados. Se determina el valor de corte con los controls Se informa:.no reactivo, reactivo, zona gris o indeterminado(reactivo dbil) Si sale reactivo se repite por duplicado con nueva muestra. Se considera reactivo definitivo con dos resultados reactivos (+) y va al WB Si sale no reactivo (-) ,se repite en 3 a 6 meses si est clnicamente indicado Requiere consentimiento del paciente y previa consejera, excepcin los donantes

Western Blot para VIH


Confirmacin del ELISA. Elisa + WB: falso positivo 1 en 100,000 Mtodos: uso de tiras de papel con antgenos Detecta anticuerpos especficos . Criterios de interpretacin son diversos . Los de la CDC: dos de tres: p24, gp 120/160, gp41 Se informa: Positivo: Criterios de interpretacin son diversos . Los de la CDC: dos de tres: p24, gp 120/160, gp41 Indeterminado: una banda. Control en 4 a 6 semanas . Si sigue saliendo indeterminado infeccin por VIH improbable , pero repetir a los 3 y 6 meses Negativo: ninguna banda. Repetir en 3 a 6 meses si clnicamente est indicado . Hacer p24 o deteccin de RNA viral(PCR) Orientacin post test

p24
Protena del core Medida por ELISA de captura(usando anticuerpos en fase slida) Positivo en 30 % de pacientes, hasta 50 %. Niveles ms altos al inicio y al final(al llegar al SIDA) Importante en diagnstico en seronegativos y RN Monitoreo: debe disminuir

Linfocitos CD4+
Son las clulas blanco del VIH Disminuyen progresivamente con la infeccin Se cuantifica por Citometra de flujo Es el mejor indicador del estado inmunolgico del paciente infectado <200ul : AIDS,riesgo de Pc, < 50: CMV Criterio para inicio: <500 ul Criterio de xito: aumento progresivo Criterio de fracaso:cada persistente del recuento de clulas CD4+ al 30 5 del valor absoluto Control cada 3 a 4 meses de diagnstico

Carga viral
Mide copias de RNA viral por ml de plasma Metodologa aprobada por la FDA: PCR Reaccin de polimerasa en cadena. RNARTDNAPCR-miles de copias. Se detecta por ELISA Se compara con un estndar Sensibilidad: 40 copias/ml, positivo en 98 % de pacientes. Resultado en logaritmos Diagnstico en seronegativos. RN Control c3-4 meses del diagnstico Inicio de tratamiento : >20,000 copias/ml Criterio de xito :cada significativa de 0.5 a 0.75 log 10 a las 4 semanas de iniciada la terapia o de un logaritmo (10 veces) en la octava semana de tratamiento.. La carga viral debes ser indetectable a los 6 meses del tratamiento(menos de 500 copias de vibrin/mmc )

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