UNIVERSIDAD NACIONAL SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO

FACULTAD DE INGENERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS TRABAJO ENCARGADO PRODUCCION DE ENZIMAS A PARTIR DE MICROORGANISMOS CURSO PRESENTADO POR DOCENTE

. : BIOTECNOLOGIA ALIMENTARIA

: SANTILLAN BAILON MIRIAM MAGALY : Ing. GAMARRA RAMIREZ NORMA HUARAZ, 05 DE JULIO 2013

INTRODUCCION
La implementacin de microorganismos en los diversos procesos biotecnolgicos ha incrementado progresivamente, debido a que stos pueden complementar, y en algunas ocasiones reemplazar los procesos anteriormente usados, causando un menor impacto negativo en la naturaleza y proporcionando ms ventajas, ya que representan una disminucin en los costos de produccin y mayor rendimiento.

OBJETIVOS
0BJETIVO GENERAL OBJETIVO ESPECIFICO

Conocer el mtodo de produccin de las enzimas a partir de microorganismos.

Conocer la importancia de la produccin enzimtica a partir de microorganismos Conocer los microorganismos productores de enzimas ms importantes y utilizados en la industria Saber la aplicacin de las enzimas producidas por microorganismos.

INFORMACION GENERAL SOBRE LAS ENZIMAS

ETIMOLOGA E HISTORIA
en el s.XIX, Louis Pasteur lleg a la conclusin de que esta fermentacin era catalizada por una fuerza vital. En 1878 el fisilogo Wilhelm Khne acu el trmino enzima, que viene del griego "en levadura", para describir este proceso.
En 1907 Eduard Buchner recibi el Premio Nobel de Qumica "por sus investigaciones bioqumicas y el haber descubierto la fermentacin libre de clulas". John Howard Northrop y Wendell Meredith Stanley, quienes trabajaron con diversas enzimas digestivas como la pepsina la tripsina y la quimotripsina (1930), premio nobel 1946

INFORMACION GENERAL SOBRE LAS ENZIMAS

DEFINICION las enzimas son protenas que actan como aceleradores de las reacciones qumicas, de sntesis y degradacin de compuestos, stas se encuentran en todos los seres vivos y son piezas esenciales en su funcionamiento

FUNCIONAMIENTO
al unirse con el sustrato adecuado, se produce la reaccin. La enzima no afecta el producto, solo cataliza la reaccin

INFORMACION GENERAL SOBRE LAS ENZIMAS

CARACTERISTICAS
Las enzimas son usualmente nombradas de acuerdo a la reaccin que producen. Normalmente, el sufijo "-asa" es agregado al nombre del sustrato son catalizadores de origen biolgico. Son muy activos en medios acuosos y en condiciones muy suaves de temperatura, presin, pH, etc. Son muy especficos: pueden modificar un nico substrato en una mezcla de substratos muy similares e incluso pueden discernir entre dos ismeros de una mezcla racmica de un compuesto quiral. Son muy selectivos: pueden modificar un nico enlace o un nico grupo funcional en unas molculas que tenga varias posiciones modificables.

FACTORES QUE PUEDEN MODIFICR LA ACTIVIDAD

TEMPERATURA PH CONCENTRACION SALINA

FUENTES DE OBTENCIN DE LAS ENZIMAS

a. Animales: La industria empacadora de carnes es la fuente principal de las enzimas derivada del pncreas, estmago e hgado de los animales, tales como la tripsina, lipasas y cuajos (quimosina y renina) b. Vegetales: La industria de la malta de cebada es la fuente principal de enzimas de cereales. Las enzimas proteolticas (que degradan protenas) tales como la papana y la bromelina se obtienen de la papaya y del anan, respectivamente. c. Microbianas:principalmente se extraen de bacterias, hongos y levaduras que se desarrollan en la industria de la fermentacin. d. Las enzimas Recombinantes Mediante I.G. Los ideales son aquellos que tienen una larga tradicin de uso en los alimentos como las levaduras de la industria cervecera y los fermentos lcticos. Bacillus, Aspergillus y Sacharomyces son tres especies de microorganismos bien conocidas, su manipulacin es segura, son de crecimiento rpido y producen grandes cantidades de enzimas, generalmente mediante fermentacin.

Algunas enzimas recombinantes destinadas a la industria alimenticia

TECNOLOGIA DE LA PRODUCCION DE ENZIMAS

Elaboracin de enzimas de origen animal o vegetal. si se trata de enzimas de origen animal la simple trituracin de algunos tejidos especializados, como el pncreas o el hgado, permite formar una papilla, la cual se extrae a continuacin con un solvente adecuado como agua, acetona fra (-20 C ), glicerina o una solucin salina. En forma parecida se procede con los tejidos vegetales, previamente sometidos a trituracin o disrupcin (rotura). Tambin puede partirse de los jugos de expresin de los respectivos tejidos, cuya estructura celular se destruye por autolisis, plasmlisis o por congelacin, la cual revienta las paredes celulares. ELABORACIN DE ENZIMAS DE ORIGEN MICROBIANO actualmente la tendencia industrial es el reemplazo de muchas enzimas provenientes de tejidos por aquellas que resultan de la aplicacin de cultivos de microorganismos seleccionados, que generan la enzima especifica Los microorganismos adecuados para la produccin de enzimas deben ser estables y aceptados por las autoridades de control, tener facilidad y rapidez de crecimiento con nutrientes sencillos y relativamente baratos, producir una enzima de alto rendimiento, que sea fcil de aislar, purificar y concentrar sin contaminantes o txicos

 Hongos productores de enzimas frecuentemente las enzimas fngicas tienen un pH cido o neutro y no son termoestables. Los ms usados son: Penicillium lilacinum Penicillium funiculosom Saccharomyces cerevisiae Aspergillus niger (cepas como: A. awamori, A. foetidus, A. phoenicis, A. saitoi y A. usumii) Aspergillus oryzae (cepas como: A. sojae y A. effusus) Mucor javanicus Rhizopus arrhizus Rhizopus oligosporus Kluyveromyces fragilis Rhizopus oryzae Kluyveromyces lactis

Bacterias productoras de enzimas las enzimas bacterianas tienden a tener un pH alcalino o neutro y con frecuencia son termoestables. Las ms usadas son: Bacillus subtilis (cepas como: B. mesentericus, B. natto y B. amyloquefaciens) Leuconostoc oenos

ETAPAS DEL PROCESO DE OBTENCION DE ENZIMAS DE ORIGEN MICROBIANO

I. Seleccin de microorganismos: Se empieza generalmente por un cultivo de enriquecimiento de la cepa seleccionada. Cultivos originales pueden obtenerse de la firma American Tipe Culture Collection (ATCC), del Northern Utilization Research Branch o de otro organismo o instituto reconocido. II. Cultivo: Las materias primas que sean de costo adecuado y que puedan utilizarse como medio de cultivo varan naturalmente segn la enzima por elaborar y pueden ser de los siguientes orgenes a) Materias azucaradas o amilceas, como melaza, jarabe de glucosa, almidones y afrechos de trigo, arroz o maz; b) Materias proteicas, como hidrolizados proteicos, harina de pescado, casena, gelatina y afrechos de extraccin de semillas oleaginosas; c) Componentes nitrogenados, como sales de amonio, nitratos, urea; d) Sustancias favorecedoras del crecimiento microbiano; como, extractos y autolizados de levadura, sales minerales con inclusin de elementos trazas y eventualmente vitaminas.

 Fuera de la composicin del medio constituyen parmetros importantes que deben controlarse en el cultivo, las condiciones ptimas del caso, en cuanto a temperatura, pH, aereacin (para suministrar el oxgeno necesario y evitar exceso de calor de reaccin), y velocidad de agitacin. En lo que se refiere a los reactores para realizar la fermentacin se distingue entre los cultivos en superficie de medios lquidos o semislidos, usndose ya sea sartenes o tambores rotatorios, y cultivos en profundidad, actualmente ms usados, mediante tanques agitados, de lecho fijo o de lecho fluidizado (partculas suspendidas y agitadas, lo que facilita su mezcla y circulacin) III. Terminada la incubacin del proceso fermentativo se separa la biomasa junto con el resto de las clulas y los componentes slidos del medio de cultivo por filtracin o centrifugacin. El lquido resultante, generalmente an bastante heterogneo, puede utilizarse directamente como preparado enzimtico; Pero, generalmente, se somete a una purificacin y/o aislamiento posteriores, que comprenden diferentes fases y que pueden aplicarse igualmente en las enzimas de origen vegetal o animal.

PARAMETROS DE CONTROL
Factores
Dosis pH

Unidades
ml de caldo enzimtico/g de pulpa base seca Adimensional

Temperatur c a

PURIFICACIN AISLAMIENTO ENZIMAS Se logran: Adsorcin selectiva Por precipitacin Dilisis Ultrafiltracin Fraccionamiento cromatografico

Y ENZIMAS DE INMOVILIZADAS ha significado un avance importante la posibilidad de inmovilizar las enzimas sobre soportes inertes, reteniendo as gran parte de su actividad cataltica original.

PROCESO DE OBTENCIN DE ENZIMA MICROBIANA

GRACIAS.