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agronoma, ingeniera, qumica, medicina y veterinaria entre otras). Es el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre.
Biotecnologa roja:
se aplica a la utilizacin de biotecnologa en procesos mdicos
Biotecnologa blanca:
conocida como biotecnologa industrial, es aquella aplicada a procesos industriales
Biotecnologa verde:
es la biotecnologa aplicada a procesos agrcolas
Biotecnologa azul:
tambin llamada biotecnologa marina, es un trmino utilizado para describir las aplicaciones de la biotecnologa en ambientes marinos y acuticos.
Es el proceso por el cual un nuevo gen es introducido en clulas de un individuo para producir un efecto teraputico. Dicho efecto puede ser una activacin o una supresin de alguna funcin fisiolgica que se est produciendo incorrectamente en el individuo a tratar.
Finalmente, no hay que olvidar la necesidad de tener un conocimiento ntimo de la patogenia de la enfermedad a tratar
Terapia gnica de clulas germinales: Aquella dirigida a modificar la dotacin gentica de las clulas implicadas en la formacin de vulos y espermatozoides y, por tanto, transmisible a la descendencia.
Terapia gnica somtica: Aquella dirigida a modificar la dotacin gentica de clulas no germinales, es decir, de las clulas somticas o constituyentes del organismo. Por ello, la modificacin gentica no puede transmitirse a la descendencia.
Agrupa las tcnicas en las que el material gentico se introduce directamente en las clulas del organismo, sin que se produzca su extraccin ni manipulacin in vitro. La administracin puede ser local en una determinada rea u rgano o sistmica
Inconveniente: el grado de control sobre todo el proceso de transferencia es menor, la eficiencia global es tambin. Es difcil conseguir un alto grado de especificidad tisular.
Comprende todos aquellos protocolos en los que las clulas a tratar son extradas del paciente, aisladas, crecidas en cultivo y sometidas al proceso de transferencia in vitro. Una vez que se han seleccionado las clulas que han sido efectivamente transducidas, se expanden en cultivo y se introducen de nuevo en el paciente.
Problemas: mayor complejidad y coste de los protocolos, imposibilidad de transducir aquellos tejidos que no son susceptibles de crecer en cultivo; riesgo inherente a la manipulacin de las clulas en cuanto a problemas de contaminacin, adems muchas de las clulas manipuladas ex vivo no sobreviven mucho tiempo despus de la reimplantacin
Correccin de genes
Sustitucin de genes
Adicin de genes
Correccin de genes: La forma ideal de tratamiento de las enfermedades genticas sera la correccin de la secuencia defectuosa. Este objetivo es, no obstante, complicado de alcanzar debido a importantes dificultades tcnicas
Sustitucin de genes La sustitucin de genes presenta grandes dificultades tcnicas, pues implica la escisin del segmento de ADN anormal y la colocacin, exactamente en el mismo lugar y orientacin, de un segmento con la informacin correcta. No se dispone en la actualidad de mtodos lo suficientemente eficaces y precisos para llevarla a trmino de manera adecuada
Adicin de genes
Esta tcnica implica la insercin de la versin normal del gen defectuoso SIN MODIFICAR el gen alterado que permanece en la clula y su defuncin es superada por la copia del gen normal no requiere la misma precisin Es la modalidad tpica para el tratamiento de enfermedades sensibles a la actuacin del sistema inmunitario, como las enfermedades infecciosas, las autoinmunitarias o las oncolgicas.
Fsicos:
Qumicos
Biolgicos
la microinyeccin
precipitados de calcio
Adenovirus
los liposomas
Retrovirus
la pistola gnica
Lentivirus
la electroporacin
Virus adenoasociados
los ultrasonidos.
Herpesvirus
Microinyeccin
Se realiza manualmente con la ayuda de un microscopio y de una aguja muy fina que se utiliza para perforar las membranas celulares y, posteriormente, administrar la construccin gentica teraputica o profilctica.
Inconvenientes: Tiempo requerido; es til slo en transformacin ex vivo, y el limitado volumen que puede administrarse para no reventar la clula.
Consiste en la inyeccin intradrmica o intramuscular de plsmidos de ADN en suspensin que contienen el gen teraputico.
Ventajas: la simplicidad de produccin y de almacenamiento. Es el sistema de tranferencia in vivo ms eficaz de entre los no virales. Adems tiene capacidad inmunomoduladora, pero apenas inmungena, lo que ha hecho que se utilice mucho en el rea de las vacunas de ADN,
Inconvenientes: la bajsima eficacia de transferencia gnica que proporciona ex vivo. Un perodo muy corto de expresin del transgn y la nula selectividad de direccin.
Pistola gnica
En este mtodo, las molculas de ADN teraputico, generalmente plsmidos, recubren esferas microscpicas de oro, las cuales se impulsan mediante un gas comprimido o un lquido a presin contra los tejidos a transformar.
Ventajas
Inconvenientes
Electroporacin Este mtodo genera pequeos poros temporales en las membranas celulares. Estos poros se crean sometiendo las clulas a un campo elctrico durante un perodo determinado, que suele oscilar de microsegundos a milisegundos.
ventajas
inconvenientes
baja eficacia
Ultrasonidos
Se trata de un mtodo an en desarrollo que aprovecha el aumento de permeabilidad que se produce en las clulas cuando se someten a ultrasonidos. Esta permeabilidad es aprovechada por las macromolculas para penetrar pasivamente en el interior de las clulas. Parece ser que actan por los fenmenos de cavitacin que se producen en la membrana celular.
Precipitados de calcio
se basa en los precipitados que produce el ADN cuando interacta con iones de calcio. Utilizado en tcnicas ex vivo. La sal ms utilizada es el CaPCO4. Los precipitados de ADN entran en el interior de la clula mediante endocitosis.
ventaja
desventajas
Liposomas
Los lpidos catinicos se unen con las molculas de ADN, quedando entonces los cidos nucleicos en el interior de las esferas formadas por capas de lpidos. Estos lpidos atraviesan con facilidad las membranas celulares y transportan el material gentico al interior de las clulas.
ventajas : el ADN est protegido en el interior de los liposomas y que puede administrarse de forma tanto general como local. la produccin y el almacenamiento son relativamente sencillos, ofrecen una buena tasa de transferencia gnica ex vivo, y apenas es inmungeno. Desventajas: la duracin de la expresin es corta. Adems, la eficacia in vivo disminuye considerablemente y es difcil obtener selectividad de direccin.
ADN condensado
Es una tcnica similar a la de los liposomas, pero que utiliza polmeros en lugar de lpidos. Los polmeros ms utilizados son polilisina, distintos oligopptidos y, especialmente, polietilenimina.
Las ventajas y los inconvenientes son similares a los de los liposomas, siendo su fabricacin ms delicada pero ofreciendo mayor selectividad de direccin en el proceso de transferencia gnica.
Virusomas fusignicos
Este mtodo trata de combinar las ventajas de los vectores virales con la simplicidad y la seguridad de los liposomas. Se obtienen mediante la combinacin de protenas de fusin de membranas virales, normalmente de virus Sendai, con liposomas de manera que la unin y la fusin a las membranas celulares resulta muy eficiente.
Ventaja supera el volumen de insercin, normalmente muy limitado, de los vectores virales tpicos
Biolgicos
Los mtodos biolgicos utilizan fundamentalmente virus para transportar los genes de inters.
se suelen eliminar los genes implicados en la replicacin para hacerlos ms seguros, eficaces y aumentar el tamao del gen a transportar.
Entre las ventajas que tiene la utilizacin de virus estn su especificidad en la unin a las clulas, el eficaz transporte hacia el ncleo celular del gen transportado y la capacidad para evitar la degradacin intracelular.
pueden actuar tanto en clulas que estn proliferando como en aquellas que no lo estn.
Adenovirus
Retrovirus
S que integran el transgn en el cromosoma de la clula diana, lo que produce una expresin ms prolongada del transgn introducido
La eficacia de la transfeccin es buena en los procedimientos ex vivo, en cambio, in vivo, es muy poco eficiente pues son inactivados rpidamente por el sistema del complemento
Slo penetran en el ncleo durante la fase de mitosis, de manera que la restringe a las clulas que estn proliferando.
Ejemplos de aplicaciones potenciales de los retrovirus son las enfermedades oncolgicas, las alteraciones hematopoyticas y el SIDA.
Lentivirus
Es especialmente notable su capacidad para introducir genes en clulas madre del sistema hematopoytico
ventajas de los lentivirus es su facultad para integrarse y transferir genes tanto en clulas en proliferacin como en aquellas que no lo estn.
Virus adenoasociados
VENTAJAS
Destacan frente a los otros vectores virales en el hecho de que la expresin del transgn que transfieren dura varios meses e incluso aos in vivo (enfermedades crnicas)
Presentan como principales inconvenientes un tamao de inserto, que no supera las 4.5 kb, las dificultades de produccin.
DESVENTAJAS
Criterios para seleccionar una enfermedad humana como candidata al tratamiento mediante terapia gnica son:
Los rganos, tejidos y tipos celulares afectados por la enfermedad han de estar bien caracterizados.
La versin normal del gen defectuoso debe haber sido aislada y clonada.
El gen normal ha de poder ser introducido en una fraccin significativa de clulas del tejido afectado
El gen debe poderse expresar adecuadamente, generando una cantidad suficiente de protena normal.