PRACTICA N 09

COLESTEROL DE LAS FRACCIONES LIPOPROTECAS

OBJETIVOS:

1.-Determinar la concentracin de colesterol total ,
HDL, Triglicridos y LDL en suero.
2.-Conocer la relacin existente entre la
concentracin de colesterol total y HDL.
LIPOPROTEINAS
Los lpidos no pueden movilizarse en los fluidos
corporales debido a su naturaleza hidrofbica.
Por ello, para permitir su transporte en el organismo, son
combinados con protenas llamadas betaglobulinas para
formar lipoprotenas. Se clasifican en funcin de su
densidad, determinada mediante centrifugacin.
Como los lpidos son mucho menos densos que las
protenas, se observa una relacin inversa entre el
contenido de lpidos y su densidad; por ejemplo, un alto
contenido de lpidos significa partculas de baja
densidad.

TIPOS DE LIPOPROTENAS
Quilomicrn (QM) y protena de muy baja densidad
(VLDL). Son relativamente bajas en protenas,
fosfolpidos y colesterol, pero altas en triglicridos (55 a
95 %). En trminos ms amplios, estas partculas son
denominadas lipoprotenas ricas en triglicridos
Lipoprotenas de densidad intermedia (IDL) y
lipoprotenas de baja densidad (LDL). Estn
caracterizadas por elevados niveles de colesterol,
principalmente en la forma de steres colesterlicos. La
segunda forma de colesterol mencionada (LDL) es
altamente insoluble. En virtud de que hasta el 50 % de la
masa de LDL es colesterol, no resulta sorprendente que
el LDL tenga un rol significativo en el desarrollo la
enfermedad aterosclertica.

TIPOS DE LIPOPROTENAS
Lipoprotenas de alta densidad (HDL). Los
aspectos notables de estas partculas son su
alto contenido de protena (50 %) y su
relativamente alto contenido de fosfolpidos (30
%). Generalmente, las HDL son divididas en
dos subclases: HDL2 y HDL3. Las HDL2 son
grandes y menos densas; las HDL3 son
pequeas y ms densas.

ESTRUCTURA DE UNA LIPOPROTENA
PRINCIPALES
ENFERMEDADES DEL
SISTEMA
CIRCULATORIO
Accidente
Vascular
Cerebral
(Apopleja).
Infarto Agudo de
Miocardio
Insuficiencia Cardiaca.
Hipertensin
Arterial.
Arteriosclerosis.
El perfil lipdico es un grupo de exmenes de
sangre que indican la forma como su cuerpo
utiliza, cambia o almacena los lpidos.
Entre los lpidos que se examinan en el perfil
lipdico estn el colesterol, los triglicridos y el
colesterol de alta densidad conocido como HDL.
El colesterol de baja densidad conocido como
LDL es calculado usando los resultados del
colesterol total y los triglicridos mediante
la Frmula de Friedwald:
LDL= CT-(TG/5 +HDL) VLDL=TG/5
IMPORTANCIA: Determinacin del Riesgo
Coronario: 1causa de muerte en el mundo.
Colesterol elevado (LDL) es causa de
aterognesis.



PERFIL LIPDICO
Analizar Perfil Lipdico: Valores de
referencia
Colesterol
Total
< 200 mg/dl Deseable
200-239 Alto limtrofe
>=240 Alto
Colesterol LDL
<100 mg/dl ptimo
100-129 Cercano al ptimo
130-159 Alto limtrofe
160-189 Alto
>=190 Muy Alto
Valores de referencia
Colesterol HDL
<40 mg/dl Bajo
40-59 Normal
>=60 Alto(Protector) (Restar
1FR)
Triglicridos
<150 mg/dl Normal
150-199 Alto limtrofe
200-499 Elevado (HTG
moderado)
>=500 Muy elevado
Determinacin de Colesterol Total

El mtodo para determinar el Colesterol Total consta de 3 reacciones
acopladas:
La enzima Colesterol Ester Hidrolasa, libera el colesterol de los esteres de
colesterol

EL colesterol liberado es oxidado por la Colesterol Oxidasa producindose
proxido de hidrgeno

El peroxido de hidrogeno, en presencia de la enzima Peroxidasa reacciona
con el sistema cromognico dando origen a un compuesto coloreado, que es
leido en el espectofotmetro .

Concentracin de colesterol: Amuestra x (Cestndar / Aestndar )
PARTE EXPERIMENTAL
EXPERIMENTO :

Dosaje colesterol total y colesterol HDL en sangre.

Se toma una muestra de sangre del paciente en ayuno de por lo menos 24 horas.
La sangre se coloca en tubo limpio sin anticoagulante y se centrifuga .


Preparar un tubo al que se le coloca:


1ml de suero lmpido


0.1 ml de reactivo precipitante HDL o II gotas

Agitar y dejar en reposo por 10 minutos al ambiente Centrifugar a 3 000 por 10
minutos separar el sobrenadante.

Preparar cuatro tubos lmpidos y colocar:
TUBO N 1 2 3 4
ml Suero lmpido 0,02 0 0 0
ml Sobrenadente anterior 0 0,02 0 0
ml Patrn de colesterol 0 0 0,02 0
ml Agua destilada 0 0 0 0,02
ml Reactivo de color 2 2 2 2
Agitar: Incubar por 15 minutos a 37C.
Leer al fotocolormetro a 520 nm los tubos 1,2 y 3, llevando a cero
con el blanco (tubo4)
Clculos


200

Colesterol mg/dl=-------- X Abs.(1 2)
Abs.(3)

TUBO N 1 2 3
ml Suero 0 0,02 0
ml Patrn de triglicridos 0 0 0,02
ml Reactivo de color 2 2 2
EXPERIMENTO : Dosaje de triglicridos
Preparar tres tubos con:

Agitar, incubar a 37C por 15 minutos
Leer al fotocolormetro a 520 nm los tubos 2 y 3
llevando a O con el tubo 1

Clculos


Conc. patrn


Triglicridos mg/dl = ------- x Abs.(2)
Abs.(3)

Cuestionario
1.- Cul es la funcin de las lipoprotenas plasmticas?
2.-Cules son las funciones del colesterol en el
organismo?
3.- Bajo que forma y a travs de que vas el colesterol es
absorbido en el intestino
4.-Qu factores determinan la formacin de las placas
de ateromas en la arterioesclerosis?
5.-Qu es una dislipemia?. Mencione tipos, causas,
parmetros bioqumicos y riesgos.
6.-Que es el riesgo coronario? Cmo se evala?