UJED

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

MICROBIOLOGIA
EQUIPO #2
-MAYRA VALLES
-TERESA GLZ
-ALAN CASTAON
-WILLIAM PAEZ

INTRODUCCION
Las bacterias son seres vivos y estn compuestas al igual
que las clulas eucariotas por protenas, polisacridos,
lpidos, cidos nucleicos, entre otros. El conocimiento de la fisiologa y del metabolismo
bacteriano tiene algunas aplicaciones prcticas:
Permite conocer el modo de vida y el hbitat de
diferentes especies bacterianas. El ser humano actuando
como hospedero por ejemplo, ofrece una variedad de
nichos ecolgicos que se diferencian entre s por
aspectos fsicos y qumicos (temperatura, concentracin
de O2, pH, presin osmtica, etc.) en los cuales pueden
crecer y multiplicarse distintas especies bacterianas, de
acuerdo a sus requerimientos nutricionales. Permite formular medios de cultivo para el

aislamiento e identificacin de los patgenos participantes.

Desde el punto de vista teraputico nos permite conocer

y entender el modo de accin de algunos
antimicrobianos que bloquean una va metablica o la
sntesis de alguna macromolcula esencial para la
bacteria.
El trmino metabolismo se refiere al conjunto de
reacciones qumicas que tiene lugar en la clula, y tiene 3
funciones especficas a saber:
obtener energa qumica del entorno, almacenarla, para
utilizar luego en diferentes funciones celulares,
convertir los nutrientes exgenos en unidades
precursoras de los componentes macromoleculares de la
clula bacteriana, formar y degradar molculas necesarias para funciones
celulares especficas, como por ejemplo, movilidad y
captacin de nutrientes.

META
BOLI
SMO
H

ETER

TROF

La fuente de carbono procede de molculas orgnicas y la energa

procede de laoxidacin de ests molculas orgnicas absorbidas a
travs de lamembrana celular.
La mayora de los microorganismos son hetertrofos,
compuestos orgnicos como fuentes de carbono y de energa.

con

Los microorganismos hetertrofos viven de los alimentos que roban

a anfitriones vivos (como comensales oparsitos) o de la materia
orgnica muerta de todo tipo (saprfagos).

 Este

metabolismo microbiano constituye el principal factor de

descomposicin de todos los organismos despus de muerte.

Muchos

microorganismos eucariontes son hetertrofos por

depredacin o parasitismo, caractersticas tambin encontradas
en algunas bacterias tales comoBdellovibrio(un parsito
intracelular de otras bacterias, causando la muerte de sus
vctimas) y algunasMyxobacteriatales comoMyxococcus
(depredadora de otras bacterias a las que mata y succiona
mediante la cooperacin de enjambres de numerosas clulas).

 La

mayora de las bacterias patgenas son parsitos hetertrofos

de seres humanos o de otras especies eucariontes.

Los

microorganismos hetertrofos son extremadamente

abundantes en naturaleza y responsables de la degradacin de
los polmeros orgnicos tales comocelulosa,quitinaolignina
que son generalmente indigeribles para los animales ms
grandes.

Esta degradacin, generalmente, requiere la colaboracin de

varios organismos distintos, cada uno de los cuales realiza uno de
los pasos de la degradacin hasta obtener CO2.

Bioqumicamente, el metabolismo hetertrofo procarionte es

mucho ms verstil que el de los organismos eucariontes, aunque
muchos procariontes comparten los modelos metablicos ms
bsicos con los eucariontes.

BIOS

NTES
IS

DE M

AC RO
MOL

C UL A
S

 La

primera etapa del proceso es la biosntesis, en la cual los

precursores se transforman en las subunidades bsicas de las
macromolculas.

La

biosntesis constituye la mayor parte del metabolismo.

Las reacciones biosintticas, como las reacciones catablicas,
se organizan en secuencias.

 Las

rutas de biosntesis estn constituidas por

reacciones catalizadas por enzimas que hacen posible
la conversin de los metabolitos precursores en
unidades metablicas para la sntesis.

Algunas de estas rutas son ramificadas y en ellas participan

varios precursores metablicos, y/o dan lugar a diferentes
productos. Por ejemplo, a partir de dos precursores
metabolicos (oxalacetato y piruvato) se sintetizan seis
aminocidos (aspartato, asparragina, isoleucina,
lisina,metionina y treonina), utilizando una ruta ramificada.

Otras rutas no se ramifican y dan lugar a un solo producto a

partir de un solo precursor. Por ejemplo, el aminocido
histidina se sintetiza a partir de ribosa-5fosfato, mediante una
ruta sencilla.

 Las

rutas biosinteticas de E.coli son muy similares a las de todos

los organismos bacterias, microorganismos eucariticos, plantas
y animales.

Sin

embargo, ciertos organismos no pueden sintetizar las

enzimas necesarias para completar ciertas rutas.

 Un

organismo incapaz de sintetizar una determinada

subunidad bsica para la biosntesis, solo crece si se le
aporta dicho producto en su medio de cultivo
(microorganismos) o en su dieta (animales).

Por

ejemplo, E. coli puede sintetizar los 20 aminocidos

necesarios para construir sus protenas y, por lo tanto,
puede crecer en un medio que no contenga aminocidos.

 En

las rutas biosinteticas tambin se producen otras pequeas

molculas esenciales para el crecimiento; algunas son
coenzimas, compuestos que colaboran con las enzimas en su
papel catalizador de las reacciones metablicas.
Los organismos que no pueden sintetizar sus propias
coenzimas necesitan un aporte externo de las mismas o de sus
precursores.
A las molculas que actan como coenzimas, o a sus
precursores, se les llama vitaminas.

Pru
eb

as B
ioq
Del umi
Nitr cas
ge Bsi
cas
no

Las pruebas bioqumicas consisten en distintos test qumicos

aplicados a medios biolgicos, los cuales, conocida su
reaccin, nos permiten identificar distintos microorganismos
presentes.

Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en

determinar la actividad de una va metablica a partir de un
sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la
bacteria al crecer incorpora o no.
Para realizar las pruebas bioqumicas se dispone de mltiples
medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias
del microorganismo en estudio.

UREASA

Se cultiva el microorganismo en slant en agar urea de

Christensen. Este medio se complementa despus
del auto clavado con 50ml/l de urea. sta ser
degradada por aquellos microorganismos capaces de
producir el enzima ureasa. Esta degradacin produce
amoniaco que har variar el color del indicador de
amarillo a rojo, ponindose as de manifiesto la
actividad ureasa.

INDOL

Prueba bioqumica realizada en especies bacterianas

para determinar la habilidad del organismo de romper el
indol del aminocido triptfano. Esta divisin molecular
es lograda por una serie de enzimas intracelulares
diferentes, un sistema que en conjunto se le llama con
frecuencia triptofanasa.
Las bacterias que resultan indol positivas al romper el
indol del triptfano, incluyen:
Aeromonas hydrophilia, Aeromonas punctata.

LISINA
Este medio pone de manifiesto:
Si la bacteria posee la enzima descarboxilasa (LDC). el medio contiene
como indicador Purpura de Bromocresol, cuando la lisina se
descarboxila, el medio se acidifica y el indicador vira amarillo en el
fondo.
- Si es productora de c. sulfhdrico, en cuyo caso el precipitado
negro nos impedir ver si es LDC + o -.
-Si es productora de gas

ARGININA
La L-arginina es un bloque qumico fundamental llamado
aminocido. Se obtiene a partir de la dieta y es necesaria
para el cuerpo para hacer las protenas. La L-arginina se
encuentra en la carne roja, en la carne de aves y los
productos lcteos. Tambin se puede hacer en el laboratorio
y usar como medicamento.

Estas pruebas se utilizan para la determinacin de

microorganismos que requieren de nitrgeno como
principal fuente de energa.

Pruebas bioqumicas
bsicas del carbono

citrato
Esta

prueba sirve para determinar si un organismo

es capaz de utilizar citrato como nica fuente de
carbono y compuestos amoniacales como nica
fuente de nitrgeno en su metabolismo,
provocando una alcalinizacin del medio.

Rojo de Metilo/Voges-Proskauer
Estas

dos pruebas forman parte del IMVIC de las

colimetras y permiten la diferenciacin dentro de
las enterobacterias del grupo coli y aergenes.
Las enterobacterias son anaerobios facultativos
que utilizarn la glucosa en dos fases: primero la
metabolizarn aerobiamente (respiracin
oxibintica) consumiendo rpidamente el oxgeno
del medio, para, en segundo lugar, continuar
metabolizndola por va anaerobia
(fermentacin).

Prueba TSI (Triple Sugar Iron Triple Azcar Hierro)

El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad

de produccin de cido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un
nico medio. Tambien permite la identificacin de la produccin de SH2.
Esta es una prueba especfica para la identificacin a nivel de gnero en la
familia Enterobacteriaceae, con objetivo de diferenciar entre:
bacterias fermentadoras de la glucosa
bacterias fermentadoras de la lactosa
bacterias fermentadoras de sacarosa
bacterias aerognicas
bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgnicas que
contengan azufre.

catalasa
El

objetivo es buscar la presencia de la

enzima catalasa. El perxido de hidrogeno
se produce al utilizar la bacteria el azcar
por va oxidativa. Al ser este un compuesto
oxidante las bacterias lo eliminan mediante
la produccin de la enzima catalasa

Hidrolisis de la casena.
Esta prueba determina la presencia de
proteasas que actan sobre la casena
presente en el medio generando poli pptidos
y/o aminocidos.