FROTIS Y TINCIN

MTODO DE LOS 2 PORTAOBJETOS

MATERIALES
Portaobjetos de vidrios limpios y desgrasados (25 x 75 mm).
FUNDAMENTO
Consiste en la extensin de una gota de sangre sobre un
portaobjeto (25 x 75), empleando el canto biselado de otro
portaobjeto de igual dimensin.
PROCEDIMIENTO
Una vez extrada la sangre con cualquiera de las metodologas,
se coloca una pequea gota de sangre (5mL) (aprox. 3 mm de
dimetro) sobre un portaobjeto a 2 cm aproximadamente de
uno de los extremos.
Colocar el canto de otro portaobjeto esmerilado sobre la
superficie del primer portaobjeto (en la que se encuentra la
gota de sangre) formando un ngulo de 45.

MTODO DE LOS 2 PORTAOBJETOS

Deslizar suavemente y a velocidad moderada el

portaobjeto sobre el otro en sentido longitudinal,
hasta que la gota de sangre quede bien extendida
sobre la superficie del primer portaobjeto. El
grosor del frotis sanguneo puede variar segn
sea el ngulo que formen entre s ambos
portaobjetos. Si es superior a 45, la extensin
ser gruesa y corta, si es inferior a 45 ser larga
y fina.

El secado del frotis es a temperatura ambiente y

en posicin horizontal.

MTODO DE LOS 2
PORTAOBJETOS

FROTIS

Zona excesivamente gruesa: Se halla en la regin

inmediata al punto de partida de la extensin (cabeza).
En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos.
Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la
extensin y termina en un rea donde las clulas
adoptan una posicin acartonada (barbas). En esta
regin existe un exceso de granulocitos y monocitos.
Zona ideal: Corresponde a la regin intermedia del
frotis y en ella existe un reparto equilibrado de clulas.

FROTIS

TINCIN

COLORANTE DE WRIGHT
Fundamento
El colorante de Wright va a proporcionar un medio para estudiar la
sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura,
forma, tamao, coloracin celular y contenido de hemoglobina en los
eritrocitos. La informacin obtenida de un frotis de sangre
perifrica depende en gran parte de la calidad del extendido
y la coloracin.

Materiales
Colorante de Wright.
Frasco gotero.
Solucin amortiguada tamponada.
Procedimiento

Una vez obtenido el frotis sanguneo, se le dejar secar entre 15 y 20

minutos.
Luego se coloca la preparacin en un soporte y se cubre con el
colorante de Wright, dejndolo por espacio de 5 minutos.

TINCIN

Posteriormente se aade solucin amortiguada

tamponada en partes iguales hasta obtener un brillo
metlico, dejando 6 minutos adicionales.

Finalmente se lava con agua corriente y se deja secar.

Se coloca en el microscopio y, con pequeo aumento, se

revisa la calidad de la coloracin, la cantidad
aproximada de glbulos blancos y se escoge el sitio
para iniciar el recuento. Se coloca una gota de aceite de
inmersin y se enfoca a un aumento de 100x.

La forma de los glbulos rojos se examinar

detenidamente observando adems del color (cantidad
de hemoglobina), presencia de plaquetas, su
agrupacin y distribucin.

TINCIN

Posteriormente, se hace el recuento diferencial de

glbulos blancos en 100 clulas, para lo cual se deber
conocer las diferencias entre neutrfilos, eosinfilos,
linfocitos y monocitos.
Una extensin de sangre bien teida debe
caracterizarse por una buena diferenciacin de
las estructuras subcelulares en los leucocitos,
una coloracin rosada de los hemates y la
ausencia de precipitados.

TINCIN
LOS DEFECTOS MS FRECUENTES OBSERVADOS
EN LA TINCIN DEL FROTIS SANGUNEO SON:
Coloracin excesivamente azul, debido a:

Frotis excesivamente grueso.

Lavado insuficiente.
Tincin muy prolongada.
Empleo de colorante excesivamente alcalino.
Coloracin con una tonalidad rosada:

El colorante, el tampn o el agua de lavado tienen un pH

demasiado cido.
Presencia de precipitados:
Accin excesiva del colorante. Se puede evitar con la
filtracin.