Tcnicas de ADN

(Electroforesis y vectores)

Yamileth Acosta
Maria Camila Guerra
Gustavo Ariza
Valeria Cadena
Lady Herrera
Linda Viloria

Odontologa
2017
ELECTROFORESIS
 MEDIOS DE SOPORTE
Medios de elevada friccin Medios de baja friccin

*Gel de almidn
*Gel de agarosa *Papel
*Gel de poliacrilamida *Acetato de celulosa
*Gel de agarosa + *Separacin
poliacrilamida principalmente por
*Separacin por carga, carga
tamao y forma
 TIPOS DE ANLISIS

Limite mvil

Propuesto por Picton y

Linde en 1892.
Desarrollado por
Tiselius en 1950.
Isoelectroenfoque
Electroforesis de zona
Electroforesis libre
VARIANTES DE ELECTROFORESIS

Electroforesis
bidimensional
 Electroforesis capilar
electrocintica micelar
(MEKC)
 Electroforesis capilar
en gel (CGE)

Electroforesis en
campo pulsado (pfeg):
EQUIPAMIENTO ELECTROFORTICO
 CASO CLNICO

(Primer caso de hemoglobina Kln (codon98

GTG>ATG) en Costa Rica)

Valores normales
Hb: 11.7 g/dl
Hb:14-18g/dl
Hto: 36.8%,
Hto: 42-52%
VCM: 87 fL
VCM: 80 a 100 fL
HCM: 30-37 g/dl
HCM: 27.7 g/dl
 A B

alte rCartn,Ca rlosSu rez,L

W uis Mora,K
ath iaV
alverde ,BertaV
alv erde.P
rime rcaso dehemoglobin aK
ln(cod on98G
T G>A
TG)e nCos taRica.S cielo[Inte rnet].2010 [Citado1 2Abr20 17].V
52 (1);1-2.Dis ponib
htle
tp:/wen:
ww
.scielo
.s a.cr/pdf/a mc/v52 n1/art09v 52n1 .pdf
VECTORES
 CARACTERISTICAS
Replicarse independientemente con el Debe contener algunos sitios de
segmento de DNA que transporta. corte para enzimas de restriccin.

Marcador de seleccin para distinguir las

clulas husped que transportan el vector
de las que no lo contienen.
 TIPOS DE VECTORES

CSMIDOS
PLSMIDOS

BACTERIFAGO
S
 PLSMIDOS

Ejemplo de plsmido:
Estructura general de un
Mapa de restriccin del plsmido
plsmido.
pBR322
 Ejemplo de plsmido: pUC18

Acepta fragmentos de DNA

relativamente grandes.
Se replica hasta un alto nmero de
copias, y tiene un gran nmero de
sitios de restriccin dentro del gen
lacZ.
 BACTERIOFAGO

Bacterifago insertando el
ADN en la bacteria
Estructura
COSMIDOS

Representacin del cosmido PJB8

GRACIAS!