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Biotecnolgicos
BT56A-IQ742
Introduccin
INTRODUCCION
Microbianos
Clulas animales
Plantas
Virus
Protenas Concentracin
60 - 70 g/l Agua
Purificacin de
Preacondicionamiento Pulimento
alta resolucin
Caractersticas de la bioseparacin
Tiempo de 12 - 24 10 - 24 6 - 12 1+
procesamiento (h)
Protenas (no producto) Trazas hasta 3 g/l Problema de remocin mayor con
productos enzimticos intracelulares
Acidos nucleicos Trazas hasta 6 g/l (ICP) Problema de remocin mayor para
protenas intracelulares o productos
enzimticos
Polisacridos 1% + (ICP) Usualmente removidos con el
medio, medios residuales
Productos orgnicos Trazas en bajo De materias primas (por ejemplo,
(color) contenido melaza) y los microorganismos
mismos
Slidos orgnicos Bajo contenido
Del medio
Productos Biotecnolgicos de Inters
Biomasa
Levadura Hongos
Bacterias
Virus
Adenovirus Herpes virus
Retrovirus Baculo virus
Adenoasociados
Metabolitos
Alcoholes Antibiticos
cidos
Protenas
Procesos de Produccin de Bioproductos
Qu se desea?
Desde una suspensin diluda se desea un productos biotecnolgico
con:
- Mximo rendimiento
R = Pf/Pi Pf: Concentracin Producto Final
Pi : Concentracin producto inicial
-
- Producto con propiedades funcionales
- Costo Razonable, dado que los costos de proceso son muy caros,
siendo un porcentaje bastante significativo los equipos.
Diseo del Proceso de recuperacin y purificacin
(Downstream processing DSP)
Para el diseo del DSP se debe conocer las respuestas a las siguientes
preguntas:
\
KNA,AFLN-102
H %Air Fi
HSRL-101
_
Heat Steri
B
C w UN
9-
h
BLND-101
5
FRMN-101
jSTRG-101
.^Ferm
T McA
+
L=CMPS-101 M `VAFLN-101
f"CF Co #Air Fi
zc
S<
-
b
JKCFGN-101
?
+iDisk-Stack Centri
?
l{YFBDNG-101 / #pNFILL-101 |
fDRVFL-101 /
I Re0Fluid Be uG%
=Rotary Vacuum Fi
9- |: 4 BOX-101
+
Proceso de produccin de Virus
Crecimiento de Clulas empaquetadoras
Infeccin de Clulas empaquetadoras
Crecimiento de Clulas empaquetadoras
infectadas
Recuperacin de Clulas empaquetadoras
Rompimiento de las clulas (segn virus)
Separacin de los debris celulares
Purificacin de los virus
Almacenamiento de los virus
Produccin y Purificacin de Adenovirus
Mtodo Tradicional de Purificacin :
CsCl Gradiente + Dilisis
Centrifu- Dialisis
gacion
+
Recuperacin
Adenovirus
Adenovirus
Gradiente de Puro
CsCl
Mtodo Propuesto de Purificacin
Dos Fase acuosas + Cromatografa
PEG PEG
+
Sal Sal Adenovirus
Recuperacin
Puro
Adenovirus
ATPS Cromatografa de
Intercambio Inico
Proceso de produccin de
Metabolitos
Crecimiento de la Biomasa (Fermentacin)
Separacin del metabolito de la biomasa.
Tratamiento y purificacin del metabolito
Almacenamiento del metabolito
Produccin de cido Ctrico
7
$
"AFLN-102
VAir Fi
#
vBLND-101
hHSR L-101
o|M q
a?Heat Steri
I
5I
_pMNSTRG-101 { pNRVFL-101 /
C!FRMN-101 |G0% Stora G% Rotary Vacuum Fi
6
Ferm
)N r7 5AFLN-101
@Air Fi
CMPS-101
}CF Co
\
' :
q
L2Sulfu
U g }
9
d*
h
0
$/RVFL-103 / RVFL-102 /
i CCRN-101 M nLRXN-101
zXCont. C rystal
AkRotary Vacuum Fi hRXN-102 a dRotary Vacuum Fi \{_YProduct Preci
a?Gypsum F
Proceso de produccin de
protenas
Caldo de Fermentacin
Con Clulas Sin Clulas
Clulas inmovilizadas
Clulas retenidas
Clulas Separacin de Clulas
Rompimiento Clulas
Separacin Material
Intracelular (Desechos)
Sobrenadante
Precipitacin cidos
Nucleicos, Proteasas
Tratamiento de cuerpos
incluidos
Concentracin
Purificacin Alta
Resolucin
Permite
Refinamiento Altos niveles de pureza
Estabilidad del producto
Efecto de la eficiencia de cada etapa
100.0
80.0
% Recuperacin
60.0
40.0
20.0
0.0
0 1 2 3 4 5 6
Nmero Etapas
Ejemplo 2:
Se tiene un caldo de protenas que contiene un 50% de
lisozima, 20% ovalbmina, 15% conalbmina, etc.
Cul separara primero?
"Siendo el resto igual, desechar aquellas
separaciones que involucren especies que no estn
normalmente presentes en el proceso. Sin embargo,
si se adiciona una especie extraa, se debe remover
inmediatamente despus de ser utilizada".