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Fermentacin
Proceso realizado en un fermentador o biorreactor,
mediante el cual determinados sustratos que componen el
medio de cultivo son transformados por accin microbiana
en metabolitos y biomasa.
Componentes:
-Macronutrientes: Fuentes de C, N, S, P, K y Mg, en g/l.
-Micronutrientes: Elementos traza. Sales de Fe, Mn, Ca, Zn,
Co, en mg/l.
-Factores de Crecimiento:vitaminas, aminocidos, acidos
grasos, etc.
MEDIO DE CULTIVO:
Por su composicin:
- Medios Generales: Desarrollo de gran variedad de MO.
- Medios de Enriquecimiento: Favorecen el desarrollo de determinado
grupo de MO.
- Medios Selectivos: Crecimiento de un tipo de MO e inhiben el
desarrollo de los dems.
- Medios Diferenciales: nfasis en alguna propiedad que un determinado
MO posee.
DISEO DEL MEDIO
Elegir los componentes necesarios para lograr el crecimiento y
formacin de productos en el proceso.
Conocer los proceso y operaciones previos y conocer los mecanismos
bioqumicos que regulan la formacin de productos.
Requerimientos Nutricionales:
Tipo de metabolismo celular:
Auttrofos: Algas, bacterias que obtienen C del CO2
Hetertrofos: Requieren compuestos orgnicos como fuente de C.
Condiciones de Cultivo:
Aerobio: oxigeno como aceptor de electrones
Anaerobio: N, SO4, NO3 como aceptor de electrones.
Fuentes de nitrgeno:
Inorgnica u Orgnica, sntesis de protenas, cidos nucleicos,
pared celular
Macronutrientes:
P y S en forma de PO4 y SO4, para formar ADN, ARN, ,
aminocidos azufrados.
K y Mg, ligados al RNA. K acta como coenzima y Mg es
estabilizador de organelos y es cofactor.
Micronutrientes:
- Esenciales: Ca, Mn, Fe, Cop, Cu, Zn.
- Poco esenciales: Na, Al, Si, Cl, Cr, Ni, Se, Mo
Difciles de cuantificar y sus requerimientos aumentan cuando el
cultivo se somete a stress.
Factores de crecimiento:
Aminocidos, tiamina, riboflavina, niacina; la mayora son
constituyentes de coenzimas
Disponibilidad de los Componentes:
Componentes susceptibles de ser usados por la clula.
Concentracin de iones metlicos modificada por
quelacin, para controlar el fenmenos se usa agentes
quelantes, EDTA.
Se debe tener en cuenta la naturaleza de los compuestos
orgnicos que pueden actuar como ligandos y sobre
todo del ion metlico considerado, es necesario controlar
su concentracin.
Materias Primas:
Se debe considerar costos, disponibilidad y estabilidad en
su composicin qumica.
Las materias primas fundamentales son las fuentes de C y
N.
FORMULACIN
-Carbono: 46 48%
-Nitrgeno: 7-12
-Fsforo: 13
-Azufre: 0.5 1
-Mg: 0.5 1
COMPONENTE ELEMENTO/FUNCION MASA. gr
Glucosa C, energa 22.7
NH4Cl N 4.37
KH2PO4 P+K 1.13
MgSO4.7H2O S + Mg 0.232
CaCl2.2H2O Ca 0.011
FeSO4.7H2O Fe 0.007
MnS.4H2O Mn 0.002
ZnSO4.7H2O Zn 0.002
CuSO4.5H2O Cu 0.0004
CoCl2.6H2O Co 0.0004
EDTA Quelante 0.394
Agua destilada 1 ml
Patente
Conveniencia logstica del almacenamiento
centralizado
Seguridad de abastecimiento del material ante
prdidas eventuales
Adecuada informacin de los riesgos ambientales y
para la salud
Seguridad en la conservacin
ESQUEMA DEL PROCESO DE CONSERVACIN Y SUS
ETAPAS CRTICAS
Aislamiento primario
Microorganismo
viable Reactivacin 3
(gentica/fenotpo)
cultivo 1 Almacenamiento
Tipo de propgulo
Estado fisiolgico Proceso de conservacin 2
MTODOS DE CONSERVACIN DE CULTIVOS
1. con crecimiento
transferencia seriada
Liofilizacin (freeze-drying)
CRIOCONSERVACIN
Crioconservacin es la conservacin de
material biolgico a muy bajas temperaturas
muestra +
vaco 30-60 militorrs
protectores
en ampollas
manifold
-70 C - 5 C
trampa de agua Bomba de vaco de aceite
congelamiento
etilenglicol + hielo seco (- 40 C)
etanol + hielo seco (-70 C)
La muestra colocada en una ampolla estril con un plug de algodn, se congela entre - 40
C y -70 C. Una vez colocada la muestra en el manifold del equipo se comienza con el
vaco y se retira el enfriamiento. La temperatuyra sube hasta -5 C. A esta temperatura y
con un vaco entre 30 y 60 militorrs, el secado es rpido. El tiempo es variable y depende
del volumen de muestra. Al finalizar el proceso se sella la ampolla al vaco
L-DRYING
Impregnacin en
Muestra soporte
Secado sobre silicagel
Ingeniera de la fermentacin.
BIBLIOGRAFIA:
Texto Base:
Textos Complementarios: