Citologia (Parte 2)

Citogenética Clínica

Prof. Pierre T. Félix

PhD em Genética/UFPE
CONSIDERAÇÕES GERAIS

Empacotamento
Cromossômico
CONSIDERAÇÕES GERAIS
 CONSIDERAÇÕES GERAIS

Braço Curto (p)

Constricções Centrômero
Secundárias (envolvido pelo
Cinetócoro)

Constrição
Primária
Braço Longo (q)

Cromátide
Telômeros
 CONSIDERAÇÕES GERAIS

Cromossomos com alto grau de

condensação, curtos e espessos,
facilmente visíveis com o auxílio da
microscopia óptica.

Mitose
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

• Método Cultura Celular:

- Sangue periférico
- Medula Óssea
- Tumores sólidos, etc.
 Amostra Heparinizada
 Meio RPMI
 Glutamina
 Soro Fetal Bovino
 Fitohemaglutinina
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

46,XX
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Classificação de Denver – 1960 (Colorado/USA)

1. Posição do Centrômero (Meta, Submeta e Acro)

 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Posição do centrômero

r = razão entre os braços cromossômicos

r = l/c l = braço longo
c = braço curto

ic = c . 100/c + l Ic = índice cromossômico

Cromossomo r ic
Metacêntrico 1,00 – 1,49 50,0 – 40,1
Submetacêntrico 1,50 – 2,99 40,0 – 25,1
Acrocêntrico 3,00 - ∞ 25,0 – 0,01
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Classificação de Denver – 1960 (Colorado/USA)

2. Tamanho (Grande, Médio e Pequeno)

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Aspectos Metodológicos e Aplicações

Características
No. de
Grupo Posição do Cromossomos
Pares Cromossômicos
Tamanho
Centrômero
Meta 1
A Grandes Submeta 6 2
Meta 3
B Grandes Submeta 4 5e6
♀ 16
C Médios Submeta 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 e X
♂ 15
D Médios Acro 6 13, 14 e 15
E Pequenos Submeta 6 16, 17 e 18
F Pequenos Meta 4 19 e 20
♀4
G Pequenos Acro 21, 22 e Y
♂5
Total 46 Cromossomos
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Baixa Resolução – 400 bandas (regiões e bandas)

Alta resolução – 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas)

Altíssima resolução – 2.000 bandas (regiões, bandas, sub-bandas e

sub-sub-bandas)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Coloração
Convencional

Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc).

 Rápido, fácil e baixo custo

 Permite a contagem do número

de cromossomos

 Permite avaliar a qualidade dos

preparados cromossômicos

 Muito utilizado em dosimetria

biológica
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Dosimetria Biológica
Aplicação da coloração
convencional na análise
cromossômica.
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Aspectos Metodológicos e Aplicações

Bandeamento
Cromossômico
Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação,
envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática
seguida da incorporação de corante DNA-específico

Formação de bandas claras e

escuras ou coloridas, evidenciando
estruturas de 1-10Mb
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Autossomos (1 – 22)

Heterossomos ou Cromossomos Sexuais

(X e Y)

♀ 44AXX ou 46,XX
♂ 44AXY ou 46,XY
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Aspectos Metodológicos e Aplicações

1p22.2
Cromossomo: 1
Braço: Curto
Região: 2
Banda: 2
Sub-banda: 2
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Aspectos Metodológicos e Aplicações

 A–G Grupos cromossômicos

ISCN: An International System for
 1 - 22 Números de autossomos Human Cytogenetic Nomenclature

 X, Y Cromossomos sexuais

 / Separar as linhagens celulares

 + ou - Indica se o cromossomo foi adicionado ou perdido; indica ganho ou perda no

braço cromossômico

 ? Identificação questionável do cromossomo ou da estrutura cromossômica

 * Indica que o cromossomo ou a estrutura deve estar explicada no rodapé

 ace Acêntrico
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

 cen centrômero  Mat Origem materna

 pat Origem paterna
 dic cromossomo dicêntrico

 p braço curto do cromossomo

 end endoreduplicação

 q braço longo do cromossomo

 h heterocromatina

 r cromossomo em anel
 i isocromossomo

 s satélite
 inv inversão

 t translocação
 Inv(p+q-) Inv(q+p-) inversão pericêntrica

 tri tricêntrico
 mar marcador
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

 del deleção

 der cromossomo derivativo

 dup duplicação  : quebra sem junção dos fragmentos

 :: quebra e junção
 ins inserção

 de-para
 rcp translocação recíproca

 rec translocação recombinante

 Rob translocação robertsoniana

 tan translocação em tandem

 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

 Exemplos:

1. 46,XX,1qh+

2. 46,XX,t(9;22)(q34;q11)

3. 46,XX,5p-

4. 46,XX,del(5)(p13)

5. 46,XY,inv(16)(p15;q22)

6. 46,XX/45,X

7. 46,XX,rec(7),dup p,inv(7)(p15;q22)mat

8. 47,XX,+21

9. 69,XXX

10. 46,XX,r(2)(p21;q31)

11. 47,XX,+mar

12. 46,X,i(Xq)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Metáfase

Cariótipo: 46,XY

Pareamento Cromossômico
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

SPTZs (N)

2N
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Aspectos Metodológicos e Aplicações

Metáfase

Cariótipo: 46,XX Pareamento Cromossômico

 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Óvulos (N)

2N
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Alterações Cromossômicas Numéricas:

1. Euploidias (monoploidia, triploidia, tetraploidia etc)

2. Aneuploidias (monossomia, nulissomia, trissomia,
tetrassomia etc)

Alterações Cromossômicas Estruturais:

1. Deleção 3. Inversão
2. Duplicação 4. Translocação
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Gametas anormais (100%) Gametas anormais (50%)

 Citogenética
Mutações Cromossômicas Numéricas (EUPLOIDIAS)

N = 3 (Monoplóide)

3N = 9 (Triplóide)

Euploidias

2N = 6 (Normal Diplóide)

4N =12 (Tetraplóide)
 Citogenética
Euploidias (3N-Triploidia)
 Citogenética
Mutações Cromossômicas Numéricas (ANEUPLOIDIAS)

2N-1 = 5 (Monossômica) 2N + 1 = 7 (Trissômica)

Aneuploidias

2N = 6 (Normal Diplóide)
2N - 2 = 4 (Nulissômica)

2N + 2 = 8 (Tetrassômica)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Óvulos Anormais
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Ovo ou Zigoto com Trissomia do 21

 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

47,XY,+21

Síndrome de Down (Trissomia do Cromossomo 21)

 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

14 – Acro (Gd)

21 – Acro (Pq)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

46,XX,rob(14;21)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

46,XX,rob(21;21)
 Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações

Cariótipo: 47,XXY
 Citogenética
Síndrome do Duplo Y

•1:1000 nascimentos;
• Estatura média 1,83 m;
• Orelhas displásicas;
• Ponte nasal larga;
Descrita em 1961 por Sandberg e colaboradores
• Acnes; Dedos alongados;
• Hiperatividade; Fertilidade normal; 47,XYY
• Intelecto normal
 Citogenética
Síndrome do Triplo X

•1:1000 nascimentos;
• Tendência a esquizofrenia;
•Hiperatividade;
• Fertilidade normal; Descrita em 1959 por Jacobs e colaboradores

• Intelecto normal
47,XXX
 Citogenética
Síndrome de Patau

47,XX,+13 ou
47,XY,+13

• 2 – 4 : 10.000 nascimentos;
• Aplasia cutânea do cabelo;
• Microcefalia e microftalmia;
• Fissura lábio-palatal bilateral;
• Micrognatia, Surdez, Proboscis;
• Anomalias do SNC;
• Quadro convulsivo
• 95% mortalidade nos até 6o.
mês;
 Citogenética
Síndrome de Edwards

47,XX,+18 ou
47,XY,+18

• 1: 3000 nascimentos;
• Comprometimento cardíaco;
• Alterações pulmonares graves;
• 15% dos afetados sobrevivem
ao primeiro ano de vida;
• Convexidade plantar;
• Hérnias umbilicais;
• Micrognatia;
 Citogenética
Síndrome de Turner

Cariótipo: 45,X
 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

Alterações Cromossômicas Estruturais:

1. Deleção 3. Inversão
2. Duplicação 4. Translocação
 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

Translocação
Não recíproca
Translocação Crossing-Over desigual
Não recíproca (Duplicação / Deleção)

Translocação
Recíproca
(Robertsoniana)
Translocação
Recíproca
 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

p-

q-

Inversões Deleções
(Pericêntrica e Paracêntrica) (Intertiscial, Terminal p e Terminal q)
 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

Duplicação Direta e Invertida

 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

Cromossomo em Anel (r)

 Citogenética
Aberrações Cromossômicas

Isocromossomos Iso q
 Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
Cri-du-Chat (Miado-do-Gato)

Cariótipo:
46,XX, 5p- ou 46,XX,del(5p21.1pter)

• 1: 50.000 nascimentos;
• Choro característico;
• Microcefalia e mandíbula
pequena;
• Retrognatia;
• Faringe pequena anormal,
epiglote flácida e glote
hipotônica;
• Dismorfia cranio-facial;
 Citogenética
Alterações Cromossômicas Numéricas
Síndrome de Turner

Variantes: 46,XX/45,X ou 46,X,i(X) ou 46,X,del(Xq) ou 46,X,r(X)

r(X)
i(X)

del(Xq)
Síndrome del(11p)

Cariótipo:
46,XX,11p- ou 46,XY,del(11p11.1pter)

• Rara;
•Expressão facial grosseira;
• Microcefalia;
• Trigonocefalia;
• Dismorfia cranio-facial;
• Baixa estatura;
• Displasia auricular
Síndrome del(18p)

Cariótipo:
46,XX,18p- ou 46,XX,del(18p11pter)

• Rara;
•Boca grande com anomalias dentárias;
• Catarata e defeitos na visão;
 Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
LMC

t(9;22)
 Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
Variantes em LMC

t(17;22)(p13;q11)

t(2;9;22)(p23;q12;q11)
 Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
ANLL M2

8 21
 Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
LEUCEMIAS