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OTROS PATÓGENOS DEL TRACTO

DIGESTIVO HUMANO,
IDENTIFICACIÓN POR EL
LABORATORIO
Luz Adriana Loaiza Salazar
Docente
Bacteriología III Semestre.
2010.
Bacillus cereus
• CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS:

ASC: Colonias grandes, con textura mate o


granular y la mayoría de Cepas son Beta-


Hemolíticas, de color blanco, blanco-grisáceo, con
bordes lisos, festoneados o fimbriados.
• CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
• Bacilo Grampositivo, con extremos cuadrados o cóncavos, se pueden
observar esporas centrales o subterminales.

• Agar Bacillus cereus: Indicador Azul de bromotimol, yema
de huevo, Manitol y Polimixina B.

Las colonias típicas de B. cereus


son crenadas, filamentosas de
aproximadamente 5 mm de
diámetro a las 24 horas de
incubación, y tienen un color
turquesa (peacock blue)
rodeado por un precipitado de
hidrólisis de yema de huevo. A
las 48 horas de incubación
presentan el color con centro
grisáceo.

MANITOL: NEGATIVO.
• Agar Yema de Huevo: Rico en proteínas que B.cereus
aprovecha para su crecimiento.

La lecitinasa (alfa-toxina,
fosolipasa C) produce un halo
opaco alrededor de la colonia
por lisis de la lecitina

1.Clostridium perfringens
2.Bacillus Cereus.

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• Agar Almidón: Los polímeros del Almidón son demasiado grandes
para entrar al interior de la célula bacteriana, por tal razón el B. cereus
hidroliza los polímeros, y los transforma en monómeros para su
aprovechamiento.

Una prueba positiva se revela


añadiendo solución de Lugol, la
aparición de zonas incoloras
alrededor de las colonias indica
la hidrólisis del almidón; si la
prueba es negativa el medio se
tiñe totalmente de azul-
púrpura.
• Hidrólisis de la Gelatina: B. cereus produce
enzimas proteolíticas que licúan la gelatina
(gelatinasas)

Agar con gelatina;


después de la
incubación; llevar a la
nevera 10’

POSITIVO:
Licuefacción de la
Medio Frazier; Cloruro Mercúrico Ácido Gelatina.

NEGATIVO:
Solidificación.
Hidrólisis de la Caseína:
 Detección de proteasas, que
transforman las proteínas de la leche (caseína) en polipétidos que
atraviesan la membrana celular.

Reacción positiva: Bacillus


cereus; hidroliza la caseína
y se observa un halo
transparente alrededor de
la colonia. Agar Leche.
• MOVILIDAD: es un microorganismo móvil, se
evidencia en el Medio MIO. Flagelos perítricos.
• FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA: Positivo en
Agar CTA.

Reducción de Nitratos: Bacillus cereus reduce los nitratos a nitritos.


Clostridium perfringens
• CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS:

ASC: Colonias pequeñas - medianas, con textura


cremosa con una zona de DOBLE Hemolisis, de
color blanco, blanco-grisáceo, con bordes enteros,
después de la incubación en Anaerobiosis.
Sin luz Con luz
• CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
 Bacilos Grampositivos, con extremos cuadrados, no se observan las
esporas.

• Agar Yema de Huevo: Rico en proteínas que B.cereus
aprovecha para su crecimiento.

La lecitinasa (alfa-toxina,
fosolipasa C) produce un halo
opaco alrededor de la colonia
por lisis de la lecitina

1.Clostridium perfringens
2.Bacillus Cereus.

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REACCIONES EN LITMUS MILK – LECHE TORNASOLADA

· Fermentación de lactosa
· Producción de gas
· Formación de coágulos
· Proteólisis
REACCIÓN DESCRIPCIÓN

FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA INDICADOR DE pH LITMUS; VIRA DE


AZUL – PURPURA A ROSA O ROJO,
POR LA ACIDIFICACIÓN DEL MEDIO.

PRODUCCIÓN DE GAS LA PRESENCIA DE CO2 SE EVIDENCIA


MEDIANTE LA FORMACIÓN DE
FORMACIÓN DE COÁGULOS. BURBUJAS. +/-
COÁGULO ÁCIDO: LA PRODUCCIÓN
DE ÁCIDO LÁCTICO PRECIPITA LA
PROTEÓLISIS CASEÍNA – COÁGULO
LA CASEÍNA SÓLIDO.
DE LA LECHE, ES
COÁGULO DE RENINA: CASEÍNA
HIDROLIZADA Y ES DEMOSTRADA A
PARACASEÍNA – COÁGULO DE
MEDIANTE LA FORMACIÓN
SEMISÓLIDO.
COÁGULO, Y LA ALCALINIZACIÓN
DEL MEDIO.
• Hidrólisis de la Esculina: Clostridium
perfringens hidroliza la esculina en esculetina.
• Hidrólisis de la Gelatina: Clostridium
perfringens, produce enzimas proteolíticas que
licúan la gelatina (gelatinasas)

Agar con gelatina;


después de la
incubación; llevar a la
nevera 10’

POSITIVO:
Licuefacción de la
Medio Frazier; Cloruro Mercúrico Ácido Gelatina.

NEGATIVO:
Solidificación.
PRUEBA DE CAMP INVERTIDA: Se observa la sinergia de la
Hemólisis entre el SABP; y el Clostridium perfringens.
• OTRAS PRUEBAS:

• INDOL: NEGATIVO
• MOVILIDAD: NEGATIVO
• CATALASA: NEGATIVO
• DNASA: POSITIVO.
Vibrio cholerae
• CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS:

ASC: Colonias lisas, convexas, de consistencia


cremosa, blanco grisáceas y bordes continuos, el


biotipo el Tor muestra Beta-Hemolísis.
• CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
 Bacilos Gramnegativos, rectos o curvos.
• Agar TCBS: Tiosulfato-Citrato-Bilis-Sacarosa.

TIOSULFATO Y NITRATO:
Inhiben la mayoría de
Enterobacterias.

SALES BILIARES:
Suprimen los Enterococos.

SACAROSA: Azúcar que


puede fermentar el Vibrio
cholerae.

Azul de Bromotimol:
Indicador de pH.
• MOVILIDAD, INDOL, ORNITINA: POSITIVO.

• CATALASA Y OXIDASA: POSITIVO.
• PRUEBA DE LA CUERDA: Desoxicolato de Na al
o,5%.

Si el resultado es positivo, las


células bacterianas
serán lisadas por el
Desoxicolato de sodio, la
solución perderá turbidez y el
ADN se
desprenderá de las células
lisadas, causando la
viscosidad de la mezcla. Se
formará
una “cuerda” mucoide cuando
se introduzca lentamente un
asa de inoculación en
la suspensión.

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