Métodos de análisis para

estabilidad de medicamentos
 Métodos de análisis

• Aplicación general en Química Orgánica e Inorgánica

• Adaptaciones convenientes

Métodos de rutina
Métodos para estudios
 Métodos de análisis
Métodos de Rutina
• Exactitud
• Precisión

Métodos para estudios de

estabilidad
• Determinación selectiva del
fármaco
 Desarrollo de un método específico

• Medición de una propiedad de la molécula total

• Pérdida de un grupo funcional indique degradación
• Separación
• Métodos de las farmacopeas
 Características del método analítico

• Específico y sensible
• Lineal
• Se conozcan sus datos estadísticos
• Preparación sencilla de las muestras
VI. 2. Los métodos
analíticos
VI. 2. 2. Cromatografía de líquidos de alta resolución
CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC “HIGH
PRESSURE LIQUID CHROMATOGRAPHY”)

ELEMENTOS QUE PARTICIPAN:

Una mezcla de moléculas = muestra

• Fase estacionaria
• Fase móvil
Interacciona con un medio (Fase
Estacionaria)

• Muestra
Un segundo medio (Fase Móvil) que
es inmiscible a la F.E.
APLICACIÓN:
• Análisis de sustancias Se hace fluir a través de ésta para
“lavar” (eluir) a las moléculas de la
termolábiles o difíciles de muestra
volatilizar
 CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC “HIGH
PRESSURE LIQUID CHROMATOGRAPHY”)

EL ÉXITO DE LA SEPARACIÓN DE COMPONENTES

DEPENDE:
• Tamaño de partículas
• Distribución de las partículas en la columna
“ ↓ tamaño de partícula, la densidad de empaquetamiento
de la columna es ↑ => dificulta el flujo de la F.M “
¿PORQUÉ USAR ALTAS PRESIONES?
Para aumentar la eficiencia en las separaciones; el tamaño
de las partículas de F.E. se disminuye hasta los micrones,
usando altas presiones para lograr que la F.M. pueda fluir.

Para garantizar flujo suficiente de la F.M. se utiliza bomba

que impulsa la FM través de la columna.
 CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC “HIGH
PRESSURE LIQUID CHROMATOGRAPHY”)

CARACTERÍSTICAS: FASE REVERSA:

• Selectividad • F.E. de baja polaridad
• Reproducibilidad • F.M. de alta polaridad
• Sensibilidad
• Rapidez PARÁMETROS:
• Naturaleza de la F.E.
FASE DIRECTA: • Tamaño de partícula
• Fase Estacionaria (F.E.) > polar • Eluyente (composición y flujo)
• Fase Móvil (F.M.) > de baja polaridad • Detector
 CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC “HIGH
PRESSURE LIQUID CHROMATOGRAPHY”)

FASE MÓVIL
• Alta pureza (calidad HPLC)
• Inactividad frente a la Fase Estacionaria
• Compatible con la muestra
• Compatibilidad con el sistema de detección
• Desgasificación de disolventes para evitar
burbujas en la columna o en detector
COMPONENTES BÁSICOS DE UN SISTEMA PARA HPLC

a) Depósitos para la F.M. (disolventes)

b) Sistemas de bombeo para proporcionar presión
a la F.M.
c) Sistema de inyección de muestras
d) Columna cromatográfica
e) Termostatos para columnas
f) Detectores
g) Sistema para el tratamiento de datos y
registrador
PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS

• Tiempo de retención (tr)

• Tiempo de retención de la F.E. (t’R)
• Tiempo muerto (to)
• Factor de capacidad (k’)
• Coeficiente de absorción o reparto (K)
• Tiempo de retención relativo (α )
• Resolución (R)
• Plato teórico
Cromatografía de fluidos supercríticos

Fases:
Cromatografía Extracción con
extracción,
de fluidos fluidos
equilibrio y
supercríticos supercríticos
cromatografía
Cromatografía de fluidos supercríticos
Análisis de misoprostol en una matriz
Característic polimérica de HPMC
o
12 μg de misoprostol

Muestra: 1.2 mg

Fase móvil: CO2 asociado a 5% metanol

No polar
Electroforesis capilar de la zona
La electroforesis capilar (CE) es una técnica de
separación basada en la diferente velocidad de
migración de las distintas especies cargadas
bajo la acción de un campo eléctrico

La CZE es la técnica más apropiada

para la separación de mezclas
complejas.

Baja sensibilidad ( -10 a HPLC)

 Cromatgrafía de gases
• Proceso de separación para substancias en estado gaseoso.
• Principios de adsorción y reparto
• Requiere optimizar; fase de separación
Gas de separación Temperatura del proceso
El gas se escoge en función del detector
Inluye en la velocidad de separación
Causas
• Poca volatilidad
• Destrucción de la muestra
• Alta polaridad

Cuantificación
• Cálculo de la superficie(altura por
ancho) picos simétricos
• Determinar la superficie con
integradores electrónicos
 Cromatografía de capa delgada

• Se caracteriza por tener buena

sensibilidad
• Realizar varias determinaciones al
mismo tiempo
• La separación se lleva a cabo por
una adsocrción a la fase móvil y a la
fase estacionaria
• Rf= linea de aplicación hasta la
mancha/linea de aplicaión hasta
fente del solvente