ACARA I

PENGENALAN ALAT, PEMBUATAN MEDIA,

STERILISASI ALAT & BAHAN, ISOLASI FUNGI DARI
SAMPEL NASI BASI DAN PEMBUATAN KULTUR MURNI

Kelompok 8:
1. Wahyu Nur Hidayati (17308141013)
2. Christiana Evi S. A. (17308141017)
3. Yuan Dewi Florean (17308144020)
4. Halida Zavira (17308144021)

Biologi E
 Tujuan
1. Mengenal alat dan bahan yang digunakan untuk praktikum Mikologi dan cara
pemakaiannya
2. Mengetahui cara sterilisasi alat dan media yang digunakan saat praktikum
3. Membuat medium TEC dan NA
4. Melakukan Isolasi fungi dari sampel nasi basi
5. Mengamati dan menghitung jumlah koloni fungi yang tumbuh
6. Melakukan isolasi kultur murni
 Alat dan Bahan
• Alat yang digunakan:
1. Neraca digital (1) : Untuk menimbang berat bahan yang berupa
padatan
2. Gelas beaker 1000 ml (1) : Sebagai tempat melarutkan bahan dan tempat
memanaskan larutan bahan
3. Botol jam (6) : Sebagai tempat menyimpan media TEC
Neraca digital
4. Erlenmeyer 100 ml (4) : Sebagai tempat menyimpan media NA
5. Gelas ukur 100 ml (1) : Sebagai alat untuk mengukur bahan cair dengan
ukuran tertentu
6. Panci aluminium (1) : Sebagai wadah saat memanaskan larutan bahan Gelas
beaker
media

Botol jam Gelas ukur

Erlenmeyer
7. Pengaduk (1) : Membantu menghomogenkan larutan bahan media
8. Kompor (1) : Sebagai alat untuk memanasakan larutan media
9. Saringan (1) : Sebagai alat untuk memisahkan antara bahan cair dengan bahan padat
10. Hot plate (1) : Sebagai pemanas larutan media
11. Autoclave (1) : Untuk mensterilisasikan media yang telah dibuat dengan suhu dan tekanan
tinggi
12. Ose kolong (1) : Untuk mengambil sampel yang akan diisolasi pada cawan petri
13. Cawan petri (2) : Sebagai tempat untuk mengisolasi fungi dari sampel tertentu
14. Colony counter (1) : Sebagai alat untuk memudahkan dalam menghitung koloni fungi yang
tumbuh pada cawan petri

Cawan petri
Autoclave Ose kolong
Hot plate stirrer Colony counter
• Bahan yang digunakan:

1. Taoge (60 gram)

7. Alumunium foil
2. Serbuk NA (7 gram)
8. Kapas
3. Sukrosa (36 gram)
9. Kertas payung
4. Kloramfenikol (0,12 gram) 10.Karet gelang

5. Aquades steril (850 ml) 11.Plastik wrap

6. Spons penutup (6) 12.Kertas label
13.Kassa
 Taoge yang telah
Cara Kerja mendidih disaring dengan
saringan berlapis kassa,
Air saringan taoge
dimasukkan ke dalam
lalu air hasil penyaringan botol jam masing-masing
1. Pembuatan Media TEC ditambahkan dengan 36 sebanyak 100 ml,
gram sukrosa kemudian ditutup dengan
spons penutup dan
Sebanyak 6 buah botol Air saringan taoge aluminium, lalu
jam beserta spons dipanaskan kembali disterilisasi
penutup disiapkan dengan hot plate &
magnetic stirrer hingga
sukrosa homogen
Sterilisasi dilakukan
Sebanyak 60 gram taoge, dengan autoclave pada
Aquades yang hilang
36 gram sukrosa, 0,12 suhu 121˚ C, tekanan
akibat penguapan di
gram kloramfenikol, dan 1 atm selama 15 menit
ditambahkan aquades
600 ml aquades steril
steril hingga volumenya
disiapkan
menjadi 600 ml

Taoge direbus dengan Sebanyak 0,12 gram

300 ml aquades steril, kloramfenikol
dan dididihkan ditambahkan ke dalam air
(1-2 jam) saringan taoge dan
dihomogenkan
2. Pembuatan Media Nutrien Agar (NA)

Magnetic stirrer Mulut Erlenmeyer ditutup

dimasukkan ke dalam dengan kapas dan kertas
Sebanyak 4 buah
gelas beaker yang berisi payung lalu diikat dengan
Erlenmeyer ukuran 100 karet gelang, dan
media NA
ml disiapkan disterilisasi

Media NA dipanaskan
Sebanyak 7 gram dengan hot plate hingga
serbuk NA dan mendidih dan homogen Sterilisasi dilakukan
250 ml aquades steril dengan autoclave pada
disiapkan suhu 121˚ C, tekanan 1
atm selama 15 menit
Media NA yang telah
mendidih, diangkat dan
Serbuk NA dimasukkan ke ditunggu hingga hangat,
dalam gelas beaker kemudian dimasukkan ke
ukuran 1000 ml yang telah dalam Erlenmeyer ukuran
diisi dengan 250 ml 100 ml masing-masing
aquades steril sebanyak 60 ml
3. Isolasi Fungi dari Sampel Nasi Basi

Bagian mulut cawan Pinggiran cawan petri

Alat dan bahan petri yang akan dibuka dibungkus dengan plastik
dipanaskan dengan api wrap dan diberi identitas
disiapkan
bunsen dengan label berupa
identitas kelompok
Nasi basi yang telah
Meja kerja dan tangan disiapkan diambil sedikit
praktikan disterilkan dengan menggunakan ose
dengan disemprot alkohol kolong, lalu dimasukkan Cawan petri diinkubasi
70% lalu dilap hingga ke dalam media agar pada suhu ruang, lalu
kering steril dalam cawan petri diamati dan dihitung
membentuk tiga titik jumlah koloni fungi yang
tumbuh pada hari ke- 2,
Ose kolong dipanaskan Cawan petri ditutup, 3, dan 4.
dengan api bunsen hingga kemudian bagian
membara, lalu diangin- mulutnya dipanaskan
anginkan sebentar dengan api Bunsen
4. Isolasi Kultur Murni
Koloni fungi yang tumbuh
dari sampel nasi basi pada
Alat dan bahan cawan petri diambil
disiapkan dengan menggunakan ose
kolong

Meja kerja dan tangan Fungi yang telah diambil

praktikan disterilkan dengan ose kolong,
dengan disemprot alkohol diinokulasi pada medium
70% lalu dilap hingga PDA Slant dengan gerakan
kering zig-zag

Tabung reaksi diberi

Ose kolong dipanaskan identitas kelompok, lalu
dengan api Bunsen hingga diinkubasi pada suhu
membara, lalu diangin- ruang dan diamati
anginkan sebentar pertumbuhannya
Tabel Pengamatan

Pengamatan Ulangan Jumlah Koloni

Hari ke-2 I spreader

Rabu, 13 Februari 2019
II 3

Hari ke-3 I spreader

Kamis, 14 Februari
2019 II 3

Hari ke-4 I spreader

Jumat, 15 Februari
2019 II 3
Hari ke-2 (Rabu, 13 Februari 2019) Hari ke-3 (Kamis, 14 Februari 2019)

spreader 3 koloni spreader 3 koloni

Hari ke- 4 (Jumat, 15 Februari 2019)

spreader 3 koloni
 Perhitungan Bahan
1. Menghitung berat taoge untuk membuat 600 ml media TEC
Jika 100 gram taoge digunakan untuk membuat 1000 ml media TEC, maka
untuk membuat 600 ml media TEC diperlukan taoge sebanyak:
600 𝑚𝑙
x 100 gram = 60 gram
1000 𝑚𝑙

2. Menghitung berat sukrosa untuk membuat 600 ml media TEC

Jika 60 gram taoge digunakan untuk membuat 1000 ml media TEC, maka
untuk membuat 600 ml media TEC diperlukan taoge sebanyak:
600 𝑚𝑙
x 60 gram = 36 gram
1000 𝑚𝑙
3. Menghitung berat kloramfenikol untuk membuat 600 ml media TEC

Jika 200 mg taoge digunakan untuk membuat 1000 ml media TEC,

maka untuk membuat 600 ml media TEC diperlukan taoge sebanyak:
600 𝑚𝑙
x 200 mg = 120 gram = 0,12 gram
1000 𝑚𝑙

4. Menghitung berat serbuk NA untuk membuat 250 ml media NA

Jika 28 gram serbuk digunakan untuk membuat 1000 ml media

Nutrien Agar (NA), maka untuk membuat 250 ml media NA diperlukan
taoge sebanyak:
250 𝑚𝑙
x 28 gram = 7 gram
1000 𝑚𝑙