Eventos pós-transcricionais

 Fatores envolvidos
. tRNAs
. ribossomo
. mRNA
. fatores protéicos
. aminoácidos
 Etapas da Tradução
. Ativação dos aminoácidos
. Iniciação
. Elongação
. Terminação
 Modificações pós-traducionais
 Endereçamento das proteínas
 Produção de proteínas recombinantes em E. coli
 CARACTERÍSTICAS GERAIS DA
TRADUÇÃO
1- DE ACORDO COM O CÓDIGO GENÉTICO
SEQÜÊNCIA DE NUCLEOTíDEOS (mRNA)

SEQÜÊNCIA DE AMINOÁCIDOS (Proteína)

2- ONDE OCORRE?
NO CITOPLASMA, EM POLIRRIBOSSOMOS
(mais de um ribossomo traduzindo um único mRNA)

3- DIREÇÃO DA TRADUÇÃO:
5´  3´ no mRNA  NH2  COOH na proteína
(1º. aminoácido sempre é a Met)

 ATRAVÉS DO PAREAMENTO (PONTES DE HIDROGÊNIO) DA

SEQÜÊNCIA DE BASES NO mRNA (CODONS) COM SEQUENCIA DE BASES
NO tRNA (ANTI-CODON), O RIBOSSOMO DETERMINA A SEQÜÊNCIA DE
AMINOÁCIDOS A SEREM INSERIDOS NA CADEIA POLIPEPTÍDICA.
 O código genético
AA AA Sequência de bases (4)

Sequência de aminoácidos (20)

2ª. base 43 = 64 trincas:

61 códons de aminoácidos
3 códons de parada
UUUUUUUUUUUU  poli Phe
1ª. base

3ª. base
 O CÓDIGO GENÉTICO

Características:

1- universal (o mesmo para todos os seres vivos)

2- contínuo (sem espaços)
3- degenerado (mais de um códon para
cada aminoácido, exceto Met e Trp)

determinação da janela de leitura (ORF):

Estrutura secundária dos rRNAs

Estrutura secundária dos tRNAs

A 3’ aminoácido

tRNAs
60-95 nt – seqüência variável (8 nucleotídeos invariáveis)
várias bases modificadas
anticodon
extremidade 3’ : CCA - sítio de ligação ao aminoácidos
Alça do anticódon - sítio de interação com o mRNA
Componentes dos ribossomos
 AA
tRNA
Ativação dos aminoácidos
Amino acil tRNA sintetases:
ligação dos aminoácidos à
extremidade 3’ do tRNA de
acordo com o anti-códon

braço do
anti-codon

AAs

Uma única amino acil tRNA sintetase liga um

Aminoácido a todos os seus tRNAs
 Iniciação da Tradução
Em procariotos:
a seqüência de Shine-Delgarno: pareamento do mRNA com rRNA 16S

Formação do
Complexo de
Iniciação 70S
mRNA +
fMet-tRNA +
ribossomo
Em eucariotos:
a seqüência consenso de Kozak presente na maioria dos mRNAs

GCCPuCCAUGG

hipótese do “scanning” pelo ribossomo

necessidade do 5’ CAP

Fatores de Iniciação: IFs ou eIFs

 Tradução em procariotos

http://www.biostudio.com/demo_freeman_protein_synthesis.htm

http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072437316/student_view0/chapter15/animations.html#

Tradução em eucariotos

http://207.207.4.198/pub/flash/26/transmenu_s.swf
Em procariotos: mRNA policistrônico, várias ORFs,
cada uma c/ RBS (sítios de entrada do ribossomo)

Em eucariotos: mRNA monocistrônico,

interação entre proteínas que se ligam a cauda poliA
e proteínas do Complexo de Iniciação
 Tradução nos polirribossomos

Terminação

Reciclagem do
ribossomo
Fatores de Alongamento: EF-Tus Fatores de Terminação: RFs
 Formação de ligações dissulfeto/dobramento
 Clivagem da cadeia
 Fosforilação
 Glicosilação
 Metilação/Acetilação
 Adição de âncoras lipídicas
Endereçamento de Proteínas

I - Co-traducional (vias de secreção):

ER
Golgi
Membrana plasmática
Meio extracelular

II- pos-traducional:
núcleo
mitocôndria
cloroplasto
Lisossomos/peroxissomos

Sinais de endereçamento na Proteína:

1- Seqüência sinal (16-30 aminoácidos no N-terminal)
2- Sinal de endereçamento nuclear ( 4-8 aminoácidos com carga positiva, ex.: PKKKRLV)
3- Sinal de retenção no RE (KDEL)