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 CROMATOGRAFIA
@Separa componentes de una mezcla, identifica un
compuesto comparando su comportamiento con el de
sustancias conocidas.

@Fase móvil o eluyente:

Formada por la solución que atraviesa la fase
estacionaria; es la muestra que esta siendo analizada y el
disolvente que se mueven en el interior de una columna,
interactúa con la fase estacionaria y se separa.

@Fase estacionaria o adsorbente:

Constituido por un sólido poroso que queda soportado en
el interior de la columna. Esta separa los componentes y
en dado caso los retiene.
 CROMATOGRAFIA DE COLUMNA

@ Las moléculas de una mezcla son separadas en base a la

afinidad de las moléculas por la fase estacionaria o por la
fase móvil.

@ Utiliza una columna de vidrio vertical llena con soporte

adsorbente (sílice, alumina u oxido de magnesio) a través
de la cual la fase móvil se fuerza a pasar por presión.

@ Las sustancias se separan gradualmente formando

bandas dentro de la banda total. La separación y
resolución aumenta con la longitud de la columna.

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 CROMATOGRAFIA DE ELUCION EN
COLUMNA
@ Constituida por un tubo angosto relleno con un sólido
inerte; mantiene la fase estacionaria en su superficie.

@ Implica la purificación de una especie por lavado en una

columna mediante la adición continua de la fase móvil.

@ La fase móvil contiene la muestra y el eluyente la cual se

introduce en la parte superior de la columna como un
tapón angosto.

@ Los componentes de la fase móvil se distribuyen entre la

fase móvil y la estacionaria, la fase móvil ocupa los
espacios abiertos entre partículas del materia de
empaque
Orden aproximado de elución de compuestos y
de polaridad
DE EXCLUSION O FILTRACION EN
GEL
@ Las moléculas son separadas por su tamaño.

@ El gel consiste en una cama de esferas con poros de

un tamaño dado (por ejemplo sefadex).

@ Moléculas de igual o menor tamaño que el poro

entran a las esferas, mientras que las mas grandes
pasan por la columna.

@ El tiempo de residencia depende del tamaño y salen

de la columna por tamaño.
INTERCAMBIO IONICO

@ Separa moléculas en base a su carga iónica.

@ La fase estacionaria presenta una matriz con carga

(matriz de la columna: Sustancia que está empapada
de solvente y que se empaqueta en la columna.
También se denomina el lecho de la columna).

@ Al eluir una muestra, las moléculas de igual carga

salen con el amortiguador. Las moléculas de carga
opuesta se adhieren al material de empaque con
distintos grados de afinidad.

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@ ara desprender la muestra adherida se usa una
solución alta en cloruro de potasio o de sodio se
puede recolectar las muestras desde las que menos
afinidad por la columna tiene hasta las de mayor
afinidad.

@ El tipo de empaque dependerá de qué queremos

aislar.

@ El pH es importante porque puede alterar la carga

de la columna.
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@ Cromatografía de interacción en la que la fase
estacionaria, con moléculas hidrofóbicas, interactúa con
moléculas hidrofóbicas en la muestra

@ La matriz consiste de fibras de silicato con cadenas de

hidrocarburos. Estas atraerán a las moléculas
hidrofóbicas de la muestra mientras que las hidrofílicas
salen con el amortiguador.

@ Las moléculas son eluídas de la columna lavando con

soluciones de distinta concentración de alcohol o
cualquier otro solvente no polar.
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Bibliografía:
@ Douglas A. Skoog,F James Holler, Stanley R.
Crouch.rincipios de análisis instrumental. Sexta
edicion. Cengage Learning.Mexico D.F 2008.

@ http://depa.pquim.unam.mx(9/oct/2006)

@ http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/cromato
@ grafias.htm(9/oct/2006)