Introduccin

El tratamiento anti-CD20 anticuerpo monoclonal no slo ha aumentado las tasas de supervivencia y curacin en muchos linfomas no Hodgkin, sino tambin ha provocado una explosin en el desarrollo de nuevos anticuerpos y sustancias biolgicamente activas con especficos blancos celulares en el campo del tratamiento de tumores malignos. Ya que las fuertes respuestas inmunitarias son producidas por las clulas T gen modificadas, la terapia gnica basada en clulas T tambin pueden proporcionar una poderosa herramienta para la inmunoterapia del cncer.

 El linfoma no-Hodgkin, enfermedad hematolgica maligna, es un tumor agresivo con un pronstico pobre. Aunque los resultados clnicos de los pacientes ha mejorado dramticamente con quimioterapia de combinacin (CHOP y otros protocolos estndar) y terapia con anticuerpos monoclonales anti-CD20, el linfoma no-Hodgkin ha demostrado ser resistente al tratamiento y presentar recadas, y es la falla de los tratamientos estndar

 CHOP consists of: Cyclophosphamide, an alkylating agent which damages DNA by binding to it and causing cross-links Hydroxydaunorubicin (also called doxorubicin or Adriamycin), an intercalating agent which damages DNA by inserting itself between DNA bases Oncovin (which is the trade name for vincristine), which prevents cells from duplicating by binding to the protein tubulin Prednisone or prednisolone is a corticosteroid

Anticuerpo Monoclonal
Los investigadores Niels K. Jerne, Georges Khler y Cesar Milstein, describieron la tcnica que permita el cultivo de hibridomas o clulas hbridas de linfocitos B con clulas plasmticas tumorales de mieloma mltiple. Con esta fusin de dos clulas, una programada para producir un anticuerpo especfico pero que no se multiplica indefinidamente (linfocito) y otra inmortal con gran capacidad de crecimiento pero que no produce inmunoglobulina (clula de mieloma), se combina la informacin gentica necesaria para la sntesis del anticuerpo deseado y una capacidad de sntesis proteica, permitiendo su multiplicacin indefinida tanto in vitro como in vivo. Por esta aportacin a la ciencia Jerne, Klher y Milstein recibieron el premio Nobel de Medicina en 1984. En el ao 2010, los anticuerpos monoclonales han cumplido 30 aos desde su invencin dejando de ser una curiosidad biolgica para ser una forma de tratamiento y diagnstico muy importante en diversas enfermedades. Existen ms de 17 anticuerpos monoclonales aprobados por la FDA, pero el nmero de anticuerpos monoclonales en fase de ensayo clnico es elevado y representan un 30 por ciento de todos los compuestos en investigacin en el 2005. Muy importante para tratamientos de distintas enfermedades como artritis reumatoide, distintos canceres, enfermedad de Crohn...

Mtodos: En este estudio, hemos desarrollado una construccin vector que codifica para el receptor quimrico de clulas T que reconoce el antgeno CD20 y enva seales co-estimuladoras para lograr la activacin de clulas T. Una celula del linfoma no Hodgkin de la linea celular Raji co-cultivadas con clulas de sangre perifricas fueron transfectadas establemente con antiCD20scFvFc/CD28 / CD3zeta gen o genes anti-CD20scFvFc. T las clulas que expresan genes anti-CD20scFvFc/CD28/CD3zeta o anti-CD20scFvFc co-cultivo con clulas CD20 positivas Raji a diferentes tiempos. lisis de la clula de ensayo fue llevado por [3H] ensayo de liberacin de TdR. Las expresiones de Fas, Bcl-2 y caspasa-3 de las clulas Raji fueron detectados por citometra de flujo. La secrecin de IFNgamma y la IL-2 en un medio de co-cultivo se evalu mediante el ensayo ELISA. Actividad de la AP-1 fue analizado por la EMSA.

RESULTADOS: Despus de transduccin eficiente de las clulas T derivados de la sangre perifrica con el gen anti-CD20scFvFc/CD28/CD3zeta , una obvia lisis de clulas Raji se observ en el co-cultivo. Las clulas T transducidas con el gen anti-CD20scFvFc/CD28 / CD3zeta tuvieron una secrecin superior de IFN-gamma e IL-2 en comparacin con las clulas T transducidas con el gen antiCD20scFvFc. Tambin llev a una apoptosis inducida por Fas mucho ms fuerte sealizada por la transduccin en las clulas cancerosas blanco.