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Ordem de Apresentao
1. Acetil Cloretos 2. Aplicao de PCR na Extraco e Quantificao de
13 de Abril de 2012
Acetil Cloretos
Acetil cloreto um liquido incolor de cheiro acentuado e penetrante. Geralmente uma
Propriedades Qumicas
1. Reaco com Reagentes Inorgnicos
H2O (Hidrlise) NH3 ou Compostos Semelhantes Halognios H2O2
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cidos Inorgnicos
Sais de cidos Inorgnicos
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Propriedades Quimicas:
1. Reaco com NH4OH(aq.) concentrado e frio formando acetamida (77%).
2.
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3.
Reaco com ciclopentano em presena de AlCl3 formando cicloentil metil cetona (acetilciclopentno) .
4.
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Introduo
Princpio do Mtodo: A tcnica de PCR (reaco de polimerase em cadeia) baseia-se no processo de replicao de DNA. Requisitos: DNA alvo, tampo salino contendo a polimerase, primers, os quatro desoxinucletidos (dNTPs) constituintes do DNA e o cofactor Mg2+. Esta mistura submetida a vrios ciclos que consistem em trs passos: 1) Desnaturao: (94-96C) de modo a separar as duas cadeias. 2) Anelamento: (50-65C) Associao dos iniciadores por ligaes de hidrognio ao DNA alvo em cadeia simples. 3) Extenso: (72C) amplificao dos primers pela sntese da cadeia
Existem vrias tcnicas de deteco dentre elas a electroforese em gel de agarose (revelado com brometo de etdio) e electroforese em gel de poliacrilamida (revelado pela prata).
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Metodologia
1. Extraco de DNA 3. Amplificao (PCR)
2. Quantificao
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Resultados e Discusso
Analise qualitativa e quantitativa de DNA (Quantificao por espectrometria)
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Padro
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Os resultados da quantificao indicam uma contaminao por protenas dos DNAs extrados, visto que a razo A260/A280 est abaixo de 1,44 - 1,90 que
1) Inibio pelo Chelex durante a extraco; 2) Inexistncia do DNA de tripanossoma na amostra analisada.
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Concluso
Nesta experincia foi-nos possvel aplicar as tcnicas bsicas de biologia
molecular na extraco e quantificao de DNA, aplicar a reaco de polimerase em cadeia (PCR) na amplificao de uma quantidade mnima de
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Introduo
Princpio do Mtodo de Walkley-Black: o carbono orgnico determinado por oxidao da matria orgnica pelo K2Cr2O7 em meio cido segundo a reaco:
A dosagem feita por meio da titulao do dicromato, remanescente da oxidao, com FeSO4.7H2O em meio cido, empregando-se como
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Metodologia
Pesagem
K2Cr2O7
[Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O]
Clculos
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Resultados e Discusso
Tabela 1: quantidade de matria orgnica em 0,500g da amostra e padro
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Concluso
1. Com base no princpio de Walkley-Black foi-nos possvel determinar o teor de matria orgnica em diferentes amostras de solos; 2. O mtodo apresenta limitaes na determinao de amostras com elevado teor de matria orgnica, como o caso da amostra 4, e recomenda-se nestes casos a determinao por outros mtodos.
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KHANIMAMBO!!!!
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