Anomalias Cromossmicas

Fabrcia Lima Fontes Programa de Ps- Graduao em Cincias da Sade

Citogentica

Aspectos Metodolgicos e Aplicaes

Consideraes gerais
Cromossomos com alto grau de condensao, curtos e espessos, facilmente visveis com o auxlio da

microscopia.

Cromossomos
Os cromossomos possuem caractersticas morfolgicas distintas:
Centrmeros; Telmeros; Cromtides irms; Regies satlite.

Nomenclatura dos cromossomos

Quanto a presena nos organismos:
Autossomos; Sexuais.

Quanto a posio do centrmero:

Metacntricos; Submetacntricos; Acrocntricos; Telocntricos.

Caritipo masculino normal (46,XY)

Caritipo feminino normal (46,XX)

ISCN 2009

Quais as indicaes clnicas para a anlise cromossmica?

Problemas precoce de crescimento e desenvolvimento; Natimortos e morte neonatal; Problemas de fertilidade; Histria familiar; Neoplasias; Gestao em uma mulher em idade avanada.

Aspectos metodolgicos
Mtodo Cultura Celular: - Sangue perifrico/Pele/ Medula ssea -Liquido amnitico/Vilosidades Corinicas - Tumores slidos, etc.
Sangue perifrico Amostra Heparinizada Meio RPMI

Glutamina
Soro Fetal Bovino Antibiticos

Obteno de cromossomos metafsicos

Cultura celular
Clulas em cultivo

200X

hipotonizao
Soluo hipotnica

200X

fixao Fixador

200X

1000X

Banda G

Bandeamento G
Colorao com Giemsa; Cada par de cromossomos cora-se num padro tpico de bandas claras e escuras.


Chave mestra para servio de citogentica clnica, sendo o mais indicado para screening inicial

Bandeamento Q
Colorao com quinacrina-mostarda ou compostos semelhantes ; Examinados por microscopia de fluorescncia; Padro especfico de bandas brilhantes e opacas.
As bandas brilhantes correspondem quase exatamente s bandas G escuras.

Bandeamento R
Pr-tratamento com calor + corante Giemsa, bandas escuras e claras (oposto de G).

Bandeamento C
Colorao na regio do centrmero e outras regies que contem heterocromatina.

Citogentica Molecular
Sondas de DNA especficas para cromossomos ou regies cromossmicas particulares; FISH:
a tcnica de citogentica molecular mais comumente utilizada; A sonda(fluorescente) de DNA reconhece e se hibridiza com sua seqncia complementar no cromossomo;

 Vantagens: Pode ser aplicada para clulas em:

Pr-metfase; Metfase; Interfase,

Permite fazer diagnsticos de forma mais acurada; Tecidos preservados podem ser investigados; Identificao de alteraes alm da resoluo visual (microdelees); Rearranjos de difcil interpretao como rearranjos dentro do cromossomo.

SKY CARITIPO ESPECTRAL

Alteraes cromossmicas
Consistem em alteraes nos cromossomos autossomas ou sexuais; Defeitos congnitos, perdas fetais, infertilidade Estimativa ao nascimento: 0,6%

numricas Alteraes cromossmicas estruturais

Alteraes cromossmicas numricas

Euploidias: Clulas com complementos cromossmicos extras.
Ex.: TRIPLOIDIA
TETRAPLOIDIA Viveis em mosaico

69,XXY

( 3n )

92,XXXX ( 4n ) 3n/2n e 4n/2n TRIPLOIDIA 3n

69,XXY

 Aneuploidia: ou de cromossomos de um par.

Ex.: Monossomia do cromossomo X Trissomia do cromossomo 21 Tetrassomia e Pentassomia
No-disjuno Causas Perda anafsica MONOSSOMIA

45, X (2n-1) 47, XX, +21 (2n+1) 48,XXXX 49, XXXXY

TRISSOMIA

Ex.: monossomia do cromossomo X Sndrome de Turner

Ex.: trissomia do 21 Sndrome de Down

No disjuno

Perda anafsica
Quando os membros de um par de cromossomos deixam de fazer sinapse*, eles no se separam corretamente no fuso.

Alteraes cromossmicas estruturais

Quebras cromossmicas seguida de reconstituio em combinao anormal;
Balanceadas: se o conjunto de cromossomos possuir o complemento normal de informao gentica; No-balanceadas: se ocorrer perda ou ganho de informao gentica;
Alterao balanceada

TRANSLOCAO BALANCEADA ENTRE OS CROMOSSOMOS 6 E 9

TRANSLOCAO BALANCEADA ENTRE OS CROMOSSOMOS 7 E 21 NO GENITOR

ALTERAO NO BALANCEADA ENTRE OS CROMOSSOMOS 7 E 21 NA CRIANA

 Delees: perda de segmento cromossmico.

TERMINAL

INTERSTICIAL

 Inverses: cromossomo sofre duas quebras e reconstitudo invertido.

Paracntrica

Pericntrica

 Translocaes: troca de segmentos cromossmicos entre dois cromossomos geralmente no-homlogos.

Robertsonianas;

 Recproca;

 Insero: Segmento de um cromossomo e inserido em um outro cromossomo.

 Isocromossomo: cromossomo no qual um brao est faltando e o outro est duplicado

 Cromossomo em anel: delees terminais + extremidades livres fraturadas se unem.

LIPOSSARCOMA BEM DIFERENCIADO

Mosaico
Duas ou mais linhagens celulares diferentes em um mesmo indivduo, provenientes de um mesmo zigoto.

Mosaico

46,XX

47,XX,+21 [70]/46,XX[30]

Mosaico

46,XX

45,X [70] / 46,XX [30]

Alteraes dos Autossomos X Cromossomos Sexuais

Deficncia mental:
raro nas de cr.sexuais; freqente nas trissomias de autossosmos

nas aberraes dos autossomos

Expectativa de vida:

Estatura:

em 47,XXY e 47,XYY

Padres dismrficos:
raros e no especficos nos crs.sexuais (exceto S.Turner) mais raras nos cr. sexuais (exceto S.Turner - coartao da aorta)

Malformaes maiores:
Infertilidade:
mais marcante nas aberraes dos cr. sexuais

Sndrome de Down
Trissomia do Cromossomo 21: ~ 1: 700 nascimentos; Aumento com a idade materna;

Trissomia do 21
47,XX,+21 (Trissomia Livre) 47,XX,+21/ 46,XX (Mosaico) 46,XX, 46,XY,t(21:21), 46,XY,t(14:21) (Alterao Estrutural)

Sndrome de Down - 47,XY,+21

Sndrome de Down - 46,XY,t(21:21)

Sndrome de Down - 46,XY,t(14:21)

Trissomia 18 (Sndrome de Edwards)

47,XX,+18 ou 47,XY,+18
1:7500 nativivos Caractersticas: RDNPM (retardo de desenvolvimento neuropsicomotor ) Malformaes cardacas; Hipertonia; Micrognatia; Orelhas malformadas e de implantao baixa; Esterno curto; Posio caracterstica das mos; Calcanhar proeminente. 60% sexo feminino 95% so abortados

Trissomia 18 (Sndrome de Edwards)

Caritipos:

Trissomia Livre 47,XX,+18 47,XY,+18

Mosaicos 47,XX,+18/46,XX

Sndrome de Patau
47,XX,+13 ou 47,XY,+13
1:20000 a 1:25000 nativivos Caractersticas: RDNPM malformaes do SNC Microcefalia Microftalmia orelhas malformadas fendas labial e palatina Polidactilia posio das mos caracterstica calcanhar proeminente malformaes cardacas malformaes urogenitais

Caritipos:

Trissomia Livre
47,XX,+13 47,XY,+13

Translocaes (20%)

Sndrome de Turner
55% 45,X 20% Isocromossomo
46,X,i(Xq) ou 46,X,i(Xq)/45,X 46,X,i(Xp) ou 46,X,i(Xp)/45,X

10% 45,X/46,XX 45,X/47,XXX 45,X/47,XXX/46,XX 5% Deleo

46,X,del(Xp) 46,X,del(Xq) 46,X,del(Xp)/45,X 46,X,del(Xq)/45,X

5% Anel
45,X/46,X, r(X ou Y)

5% 46,X,i(Yq)
45,X/46,XY

Sndrome de Klinefelter
47,XXY

SNDROME DO DUPLO Y
47,XYY
Estatura elevada Displasia auricular Distrbios comportamentais Comprometimento intelectual

Comprometimento cognitivo
Hipogonadismo

Sndromes 48,XXXY e 49,XXXXY

Hipogenitalismo
Clinodactilia Alteraes auriculares Narinas antevertidas

Comprometimento intelectual
Fendas palpebrais oblquas para cima e para fora Persistncia do conduto arterial Mos pequenas com clinodactilia dos quintos dedos e dedos fusiformes Hipoplasia genital

Sndrome de Cri-du-chat (5p-)

1:50.000 nascimentos. 85% dos casos espordica; 10-15% translocao balanceada (RR 15-25%). Pontos de quebra e extenso do segmento afetado variam nos pacientes. Regio crtica = 5p15 Baixo peso ao nascimento Choro fraco como miado de gato, hipotonia microcefalia

Alteraes subtelomricas

Alteraes subtelomricas

Alteraes subtelomricas

Iceberg de perda gestacional cromossmica

Pesquisa pr-implantao

FISH em uma nica clula

Casos Clnicos
1. Qual o tipo de alterao cromossmica? 2. Qual a sndrome? 3. Qual o risco de que os pais venha a ter uma criana nascida com vida em uma gestao futura?

Casos Clnicos
1. Qual o tipo de alterao cromossmica? 2. Qual a sndrome? 3. Os pais solicitaram ao clnico a pesquisa da probabilidade de uma nova gestao com a sndrome, no entanto a anlise dos caritipos de ambos apresentou padres normais, o que pode ter acontecido?

Casos Clnicos

46,XX

1. 2. 3. 4.

O que significa 47,XX,+21 [70]/46,XX[30]? Qual a sndrome? Quando foi que o evento da no disjuno provavelmente ocorreu? Qual o prognstico para essa doena?

Casos Clnicos
Para cada um desses casos determine se a anlise cromossmica est indicada ou no? Para qual dos membros da famlia? Qual a anomalia cromossmica? 1. Mulher grvida com 29 anos, marido com 41 anos, sem histria de defeitos genticos. 2. Mulher grvida de 41 anos, marido com 29 anos, sem histria de defeitos genticos. 3. Um casal cujo primeiro filho possui Sndrome de Down. 4. Um casal que tem dois meninos com leve retardamento mental.

AO DE EQUIPE MULTIDISCIPLINAR

AO DE EQUIPE MULTIDISCIPLINAR