ACIDOS NUCLEICOS

Dinmica poblacin celular:

1.-Cambios adaptativos

2.-Cambios no adaptativos

Cambios adaptativos:

A.-Hiperplasia B.-Hipertrofia C.-Atrofia D.-Metaplasia E.-Displasia

Caractersticas de la displasia:

Alteracin de la posicin celular normal. Prdida de la uniformidad y de la orientacin arquitectnica (premaligna en algunos casos). Proliferacin desordenada, pero no neoplsica (principalmente en epitelios). Pleomorfismo Ncleos grandes e intensamente teidos (Hipercromatismo). Cambios notables en todo el espesor del epitelio Precede invariablemente a cncer. No progresa necesariamente a cncer

Cambios no adaptativos:

Neoplasia crecimiento nuevo. Tejido anormal cuyo crecimiento excede al del tejido normal, sin finalidad y sin detencin; por prdida o dao de las seales de detencin de mitosis.

La prdida o dao se produce por:

Factores Genticos. Agentes Fsicos. Agentes Qumicos. Virus.

Criterios de diferenciacin:

- Diferenciacin - Anaplasia

Anaplasia:

Pleomorfismo Hipercromatismo. Alteracin relacin Ncleo/citoplasma Aumento de tamao de la clula. Polimorfismo nuclear. Aumento de mitosis anormales Perdida orientacin. Simplificacin funcional

Como se produce la neoplasia

La activacin de genes estimuladores y la inactivacin de genes supresores de cncer.

El cncer puede afectar a:

Genes normales. Genes con predisposicin. Genes con mutaciones heredadas. Puede ser: Traslocacin. Alteracin en el nmero

CONFORMACIN:
Nuclesido Acido Fosfrico

Nuclesido
Azcar Base Nitrogenada

Base Nitrogenada:
Purinas Pirimidinas

Hidrlisis cida:
Liberacin de Purinas en el ADN

METODOS DE ESTUDIO HISTOLOGICO

Fijacin:
Carnoy Alcohol Formol Zenker

Tcnicas de estudio:
Inclusin en parafina Cortes por congelacin

Mtodos de Demostracin:
Histoqumicos Moleculares

Histoqumicos:
Generales Especficos

Mtodos generales:
Mitchel : Serra : Turchini :

B. N. Fosfato Azcar

Mtodos especficos:
Feulgen Unna-Pappenheim Acridina Orange

Feulgen:

ADN

Feulgen:
1 Hidrlisis cida 2 R. Schiff

Feulgen:

1.-Hidrlisis cida formacin de -CHO distancia entre -CHO es de 1 a 1.1 nm

Feulgen:

2.- Schiff color magenta

Qu es el reactivo de Schiff?

Fucsina bsica

Reactivo de Schiff

Feulgen:

Reaccin Plasmal

ARN

Distancia entre carbonilos menor de 1 nm Extraccin por hidrlisis

PROBLEMAS:

Exceso de hidrlisis Falla del Schiff.

FEULGEN-FLUORESCENTE

Unna-Pappenheim:
ADN ARN

Unna-Pappenheim:
Verde Metil Pironina

Verde metil

Cristal violeta

Pironina

Unna-Pappenheim:
pH : 4.8 Estructura Brachet

Unna-Pappenheim:
Verde metil : Pironina :

ADN ARN

Acridina Orange:
Fluorescente Metacromtico

Acridina orange

Takahashi

Acridina Orange:
ADN ARN

Acridina Orange:

Digestin enzimtica

Marcadores de proliferacin celular

Ki -67 Bcl-2 P53 Her2/neu MPM-2 PCNA

IHQ DE CARCINOMA EPIDERMOIDE

c-erbB POSITIVO EN ADENOICARCINOMA ENDOMETRIAL

Moleculares:
Hibridacin in situ PCR

Hibridacin in situ:(HIS)
Dterminacin de secuencias especficas de DNA y RNA en los tejidos.

HIS : Pasos
Desnaturalizacin del ADN Hibridacin Visualizacin

HIS: Desnaturalizacin:
Temperatura de 100 +/- 3 C Placas trmicas

HIS: Hibridacin
Sondas especficas marcadas 37 C

HIS: Sondas
Secuencia especfica de ADN que se desea investigar.

HIS: Sondas

Las sondas deben estar marcadas: - Biotina - Fluorocromo - Istopos

HIS: Visualizacin

Depende del tipo de marcador que se haya utilizado

HIS:Visualizacin
Biotina: Enzima Fluorocromo:Fluorescencia Istopos: Autorradiografa

CROMOSOMA 22

CROMOSOMA 4

CROMOSOMA X

CROMOSOMA 13 Y 21

PCR

REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA

PCR

Aumento notable de ADN a travs de sntesis sucesivas.

PCR: Pasos
Desnaturalizacin del ADN Apareamiento de Primers Extensin de la cadena

TERMOCICLADOR

Usos de la PCR
Test de Paternidad Diagnstico de enfermedades hereditarias Mutagnesis Anlisis de ADN fsil Genotipado de mutaciones especficas Identificacin de especies