Professional Documents
Culture Documents
Es especfico para cada reaccin. No necesariamente para un solo sustrato, aunque muchas enzimas lo son. Tiene gran poder cataltico, transformando hasta 103 a 104 molculas por segundo. Est sujeto a diversos mecanismos de regulacin de modo tal que no genere ms producto que el necesario.
Catalizan reacciones qumicas necesarias para la sobrevivencia celular y Sin las enzimas los procesos biolgicos seran tan lentos que las clulas no podran existir. y Las enzimas pueden actuar dentro de la clula , fuera de sta, y en el tubo de ensayo.
y
E + S ES EP
E E
E+P
E E
Las reacciones bioqumicas se organizan en forma de rutas metablicas coordinadas y reguladas Los enzimas son esenciales para el control de las rutas metablicas
Los enzimas son el grupo ms importante de protenas con funcin dinmica. Aceleran las reacciones bioqumicas multiplicando su velocidad millones de veces. Unen molculas denominadas sustratos. Liberan molculas denominadas productos. El sitio de unin del sustrato se denomina centro activo.
E+S
La Ea de la hidrlisis de la urea baja de 30 a 11 kcal/mol con la accin de las enzimas, acelerando la reaccin 1014 x El aumento de temperatura necesario para producir la reaccin no catalizada seria de 529C
E+P
Tiempo de la reaccin
Enzimas y Catalizadores
ENZIMA: Protena globular que cataliza las reacciones bioqumicas CATALIZADOR: Sustancia o estructura que aumenta la velocidad de una reaccin qumica sin verse alterada en el proceso global
Las enzimas se unen a los reactivos (sustratos) reduciendo la energa de activacin Cada enzima tiene una forma nica con un sitio o centro activo en el que se une al sustrato Despus de la reaccin, enzimas y productos se separan. Las molculas enzimticas no han cambiado despus de participar en la reaccin
Las enzimas cumplen su papel cataltico gracias a: Fijacin estereoqumicamente complementaria del substrato Transformacin cataltica del mismo En ambas funciones participan: Cadenas laterales de los aminocidos Grupos o molculas no proteicas: Grupos prostticos Iones metlicos Cofactores
Enzima
Sustrato
Sitio activo
Reaccin no catalizada
Reaccin catalizada
Progreso de la reaccin
El centro activo del enzima posee ms complementariedad con el estado de transicin que con el sustrato.
Propiedades de los Enzimas como Catalizadores Eficacia Especificidad Ausencia de subproductos Funcionamiento en condiciones biolgicas Actividad variable Capacidad de regulacin
Propiedades de los Enzimas como Protenas Labilidad Importancia de los enlaces no covalentes Desigualdad de tamao enzima-sustrato En algunos casos requieren cofactores enzimticos
Catlisis
y
Un catalizador es una sustancia que acelera una reaccin sin consumirse. Lo hace reduciendo la energa de activacin. Se denomina energa de activacin a aquella necesaria para alcanzar el estado de transicin.
Reduce la entalpa del estado de transicin (perdida por calor) Reduce la entropa de la transicin (mayor orden mas eficiencia)
Las enzimas aceleran la velocidad de reaccin por las siguientes razones: La unin de sustrato y enzima incrementa la concentracin efectiva de sustrato en las inmediaciones del sitio activo. Hay tambin un cambio conformacional que orienta al sustrato. La unin enzima sustrato tiene un nivel ms alto de energa y las modificaciones de longitud y ngulo del sustrato asemejan a la forma del estado transitorio. Algunos de los residuos del sitio activo, participan de la reaccin donando y aceptando protones. Algunos residuos catalticos tienen grupos que ayudan a romper enlaces covalentes.
Reacciones acopladas
Clases de enzimas
Cofactores y coenzimas
y
Cofactor De naturaleza orgnica o inorgnica que favorece la actividad enzimtica Coenzima De naturaleza orgnica, requerida por una enzima para su actividad cataltica. Generalmente una vitamina o su derivado Las oxido reductasas siempre necesitan: NAD+/NADH + H+ NADP+/NADPH + H+ FAD/FADH2
Cofactores inorgnicos
coenzimas
Enzimas en la clula
Localizacin enzimtica Las enzimas ejercen su funcin predominantemente en el interior celular. Mas an lo hacen en determinado organelo de la clula. Las enzimas que se encuentran en el plasma o lquidos diversos corresponden a aquellas que se estn eliminando y muy pocas como la LCAT (Lecitina colesterol acil transferasa), LLP (Lipasa lipoproteica), ejercen su funcin a nivel plasmtico.
Actividad enzimtica
Actividad enzimtica Es la forma de medida de una enzima. La ecuacin general de las reacciones enzimticas es:
E S Cof1 ES E P Cof 2
Donde la enzima se une al sustrato para generar un producto. Algunas veces con el auxilio de un cofactor que se modifica durante la reaccin. La actividad enzimtica se mide por la reaccin cataltica bajo la forma de desaparicin del sustrato por unidad de tiempo. Tambin por formacin de producto o modificacin del cofactor. Unidades: katal = moles de sustrato/segundo. Unid. Internacionales: umol/minuto. 1 U= 16,7 nkat.
No existe actividad enzimtica a -273C o cero absoluto. A partir de esa temperatura los incrementos provocan mayor actividad enzimtica. La que se expresa como coeficiente de temperatura o Q10. Esto es, el incremento de actividad por cada 10C de aumento de temperatura. En trminos generales Q10 = 2, es decir que por cada 10C de temperatura la velocidad se dobla. Existe una temperatura ptima tras la cual los aumentos provocan desnaturalizacin de la protena enzimtica y prdida de la actividad.
Temperatura
Cada enzima tiene un pH ptimo de trabajo, el cul es variable. Las enzimas intracelulares trabajan entre 5 y 9 , las enzimas digestivas pueden trabajar en pH diferentes. Los extremos de pH afectan la ionizacin de los centros activos (-COO- (glutamico, aspartico) + (arginina, lisina,histidina) NH3 SH (Cisteina, metionina)).
0 pH
pH
14
Las reacciones qumicas son: De primer orden si son dependientes de la concentracin de sustrato De orden cero si son independientes de la concentracin de sustrato La cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas, manteniendo condiciones ptimas en la mayora de factores: pH temp, tiempo, concentracin de enzima, concentracin de sustrato etc
Cintica enzimtica.....
ES
k2 K-2
EP
y y
Esta es la completa formula para una reaccin catalizada por una enzima, donde S es el sustrato y P el producto. Describe la relacin entre velocidad y concentracin del sustrato y explica el mecanismo de saturacin. La ecuacin de Michaelis - Menten deriva de las siguientes consideraciones:
1) Etapa constante (meseta) 2) Velocidad inicial.
Velocidad inicial
ES
y
k1 K-1
ES
k2
EP
En el inicio hay poco producto, luego el aporte de E + P a la formacin de ES es despreciable. Luego en este caso la reaccin puede modificarse a: k2 K-2
ES
k1 K-1
ES
EP
ES
k2 K-2
EP
Se define como la etapa durante la cual el complejo Enzima-sustrato [ES] permanece constante. Estado pre inalterable es aquel durante el cual se genera ES y es muy rpido.
Que es Km
y
k 1 k 2 k1
y y
ES
k1 K-1
ES
k2
EP
Pequea Km significa gran unin entre sustrato y enzima ; alta Km significa poca unin entre E y S.
y
Vmax
Vmax/2
Hexoquinasa (cerebro)
Km. Km
Glucoquinasa (hgado)
Comprendiendo vmax
y Vmax se obtiene conforme se incrementa el sustrato. No se alcanza completamente porque requerira que todo el sustrato se una a la enzima (no habra constante de equilibrio)
ES
k1
ES
k2 K-2
EP
y Numero de recambio, se define como el numero de moleculas de sustrato transformadas por la enzima por unidad de tiempo., cuando la enzima esta saturada por el sustrato. O [S]>>[Et],
Reacciones de multisustrato
y
Reacciones de multisustrato
y y
Captacin ordenada de sustratos para unir un sustrato debe unirse otro primero Reacciones de oxidorreduccin cocatalizadas por NAD
Reacciones de multisustrato
y
Mecanismo ping-pong cuando existe una secuencia cataltica. La enzima se modifica por persistencia de un fragmento del primer sustrato.
Enzimas proteolticas
y y
Estructuras semejantes al sustrato que compiten con l por el mismo centro activo. Sus efectos pueden revertirse si se incrementa la concentracin del sustrato hasta ocupar todos los centros activos. La Vmax no cambia, pero si el Km porque se necesita ms sustrato.
Inhibidores competitivos
v inhibidor
1/V
1/Vmax
[S]
-1/Km
1/[S]
Inhibidores competitivos
Inhibidores no competitivos
y y
Estructuras diferentes al sustrato por lo que se unen a un sitio independiente de la enzima. Ambos, sustrato e inhibidor pueden unirse a la enzima al mismo tiempo. Su efecto no puede revertirse aumentando la concentracin del sustrato.
No tiene efecto sobre la Km pero s sobre la Vmax. 1/V
V inhibidor
1/Vmax
[S]
-1/Km
1/[S]
Inhibicin no competitiva
Reaccionan covalentemente con la cadena lateral de un aminocido de la enzima, para formar un complejo estable permanentemente inactivado. y Se les llama tambin substratos suicidas. y Su efecto es igual al de un inhibidor no competitivo.
y
Inhibidores irreversibles
y y
RESUMEN
Las enzimas son protenas que catalizan las reacciones biolgicas y Presentan especificidad por su sustrato y Cada enzima presenta dos parmetros importantes Vmax (saturacin de la enzima) y la Km (medida de la afinidad por el sustrato)
La actividad enzimtica puede ser inhibida, por inhibidores competitivos (similares al sustrato) o por inhibidores no competitivos. competitivos. y La temperatura y el pH afectan a la enzima en su actividad cataltica. cataltica. y Algunas enzimas requieren de coenzimas y/o cofactores para su actividad. actividad.
y